Compuestos para el diagnóstico de enfermedades relacionadas con la expresión de VCAM.

Compuesto de la fórmula general (I) siguiente:

Señal-Nexo-Péptido (I)

en la que:

- Señal representa una entidad de señalización,

- Nexo, presente o no, representa un enlace químico, y

- Péptido representa un péptido que comprende un péptido orientado a VCAM, siendo el péptido orientado aVCAM seleccionado de entre los péptidos de fórmula siguiente y sus equivalentes funcionales:

X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17-X18 (2) (SEC ID nº 4) siendo:

- X10 seleccionado de entre cisteína y metionina,

- X11 seleccionado de entre metionina y metionina,

- X12 seleccionado de entre lisina, arginina y alanina,

- X13 seleccionado de entre treonina y serina,

- X14 seleccionado de entre ácido aspártico y ácido glutámico,

- X15 seleccionado de entre treonina y serina,

- X16 seleccionado de entre arginina, alanina y lisina,

- X17 seleccionado de entre leucina, isoleucina y valina,

- X18 es cisteína y metionina

preferentemente el péptido CMKTDTRLC (SEC ID nº 5);

y las sales farmacéuticamente aceptables de estos compuestos.

Compuestos para el diagnóstico de enfermedades relacionadas con la expresión de VCAM.

La presente invención se refiere a compuestos de diagnóstico de enfermedades relacionadas con la expresión de VCAM, a su procedimiento de preparación y a su uso en la formación de imágenes médicas.

La VCAM-1 (vascular cell adhesion molecule - 1) es una inmunoglobulina de interés en particular diagnóstico en las patologías cardiovasculares. Efectivamente, la VCAM-1 es un marcador de las zonas predispuestas a volverse ateromatosas. La VCAM-1 está muy sobreexpresada en las células endoteliales activadas. Como otras moléculas de adhesión, tales como ICAM-1, 2 y 3, la VCAM-1 está implicada en la adhesión de leucocitos al endotelio en el transcurso de la aterosclerosis. Se han descrito varios modelos in vivo. En las lesiones ateroescleróticas avanzadas, la expresión de VCAM-1 es positiva a nivel del endotelio que cubre la placa; la VCAM-1 está presente asimismo en células endoteliales en la proximidad de lesiones y es muy abundante en la íntima, a nivel de las células musculares lisas En el ser humano, la expresión de VCAM-1 en las arterias ateroscleróticas aórticas y femorales humanas se ha descrito de la forma siguiente:

- arteria de apariencia sana: expresión baja a nivel del endotelio

- arteria con engrosamiento de la neoíntima sin infiltración macrofágica: ligero aumento endotelial de VCAM-1

- lesión desarrollada, que contiene macrófagos "maduros": expresión duplicada con respecto a la situación anterior

- lesión desarrollada, que comprende una infiltración reciente de macrófagos: inmunomarcaje significativamente más elevado, que recubre una parte elevada de la zona endotelial.

A nivel de las coronarias, la VCAM-1 se expresa solo en el endotelio de las placas, y no a nivel de las paredes sanas.

En el campo oncológico, la VCAM participa en la adhesión de los linfocitos, de los monocitos y de los polinucleares eosinófilos a las células endoteliales activadas mediante la integrina alfa4beta1. Se expresa en gran medida en patologías tales como la colitis ulcerosa crónica o la enfermedad de Crohn. Al igual que la ICAM-1, se sobreexpresaría en la periferia de los cánceres y podría participar en los procesos metastásicos.

El documento FR 2 876 033 describe la utilización de un ligando de VCAM-1 para la fabricación de un agente destinado a la detección o al tratamiento de una enfermedad cardiovascular, en la que el péptido está asociado a un marcador.

Se sigue investigando una mejora de la calidad del diagnóstico in vivo de enfermedades cardiovasculares y cancerosas con la ayuda de nuevos marcadores muy específicos, destinados a las modalidades de formación de imágenes conocidas por el experto en la materia, especialmente IRM, rayos X, gammagrafía, escáner CT, ultrasonidos, PET y la formación de imágenes ópticas. Se recuerda que, en el caso de la IRM, se obtiene un contraste gracias a la administración de agentes de contraste que contienen metales paramagnéticos o superparamagnéticos que tienen efecto sobre la relaxividad de los protones del agua. En el caso de la gammagrafía, se obtiene el contraste mediante la localización específica de un compuesto radiofarmacéutico que emite rayos gamma o beta.

Se buscan compuestos cuya síntesis química no sea demasiado compleja, suficientemente estables in vivo para una utilización en la formación de imágenes médicas y cuyo precio de coste no sea demasiado elevado, y esto especialmente para IRM, con el fin de no utilizar elementos radiactivos complejos de utilizar.

La solicitante ha conseguido obtener unos compuestos que comprenden una parte de orientación a zonas de VCAM, eficaces no solo in vitro sino también y sobre todo en IRM in vivo. Dichos compuestos son efectivamente difíciles de obtener, pues hace falta no solo identificar un biovector eficaz in vitro, sino obtener un compuesto eficaz para la formación de imágenes de diagnóstico clínico humano. Este es particularmente el caso para IRM, que se reconoce que es una técnica muy solicitada por ser sin radiactividad, pero cuya sensibilidad es netamente muy inferior a la de la medicina nuclear.

El compuesto obtenido debe tener a la vez una afinidad suficiente para reconocer su diana, una alta especificidad para ser un indicador distintivo del estado patológico, una estabilidad apropiada para no degradarse ni modificarse in vivo; y además sin que parte de señal interfiera de manera molesta con estos diferentes parámetros (afinidad y estabilidad particularmente) .

Después de numerosos intentos, la solicitante ha conseguido obtener unos compuestos eficaces.

La invención se refiere así a un compuesto de fórmula general (I) siguiente:

Señal-Nexo-Péptido (I) en la que:

- Señal representa una entidad de señalización;

- Nexo, presente o no, representa un enlace químico; y

- Péptido representa un péptido que comprende un péptido orientado a VCAM, siendo el péptido orientado a VCAM seleccionado de entre los péptidos de la fórmula siguiente y sus equivalentes funcionales:

X10–X11–X12–X13–X14–X15–X16–X17–X18 (2) (SEC ID nº 4) siendo:

- X10 seleccionado de entre cisteína o metionina,

- X11 seleccionado de entre metionina o cisteína,

- X12 seleccionado de entre lisina, arginina o alanina,

- X13 seleccionado de entre treonina o serina,

- X14 seleccionado de entre ácido aspártico o ácido glutámico,

- X15 seleccionado de entre treonina o serina,

- X16 seleccionado de entre arginina, alanina o lisina,

- X17 seleccionado de entre leucina, isoleucina o valina,

- X18 cisteína o metionina;

preferentemente el péptido CMKTDTRLC (SEC ID nº 5) (Cys-Met-Lys-Thr-Asp-Thr-Arg-Leu-Cys) ;

y las sales farmacéuticamente aceptables de estos compuestos.

La expresión "péptido orientado a VCAM" se designa igualmente péptido de VCAM en la solicitud. Ventajosamente, péptido representa un péptido de VCAM.

De forma ventajosa, el péptido de VCAM según la invención comprende como máximo 20 aminoácidos, ventajosamente como máximo 15 aminoácidos, ventajosamente como máximo 10 aminoácidos.

La proteína KIAA0137 se describe particularmente en la solicitud de patente WO 03/038130 y la proteína HPIV-3 se describe particularmente en la patente US nº 6.110.457.

Se entiende por la expresión CMKTDTRLC (SEC ID nº 5) y sus equivalentes funcionales, el péptido CMKTDTRLC (SEC ID nº 5) , cuya eficacia ha demostrado la solicitante, y los péptidos de fórmula X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17-X18 (2) (SEC ID nº 4) derivados eficaces. El péptido CMKTDTRLC (SEC ID nº 5) estudiado es un péptido cíclico y se ejemplifica con detalle en la solicitud.

La sustitución puede ser conservativa o no. La sustitución es conservativa cuando se sustituye un aminoácido por un aminoácido que tiene propiedades similares (por ejemplo, polaridad, potencial de enlace de hidrógeno, acidez, basicidad, hidrofobicidad, presencia de un grupo aromático, etc.) . Un aminoácido natural puede ser reemplazado por un aminoácido no natural, tal como un aminoácido en configuración D, aminoácido beta o gamma. El péptido de VCAM se modifica, por ejemplo, utilizando las metodologías apropiadas descritas en la técnica anterior, por ejemplo, en el documento US 2005100963 (columnas 20-21, párrafos [529] a [541] en el caso de péptidos orientados a los receptores KDR) , con el fin de seleccionar los compuestos (I) eficaces.

Se entiende por péptido que comprende al menos un péptido orientado a VCAM un péptido que presente esta secuencia peptídica de reconocimiento de la diana biológica, eventualmente flanqueado en el extremo N y/o C terminal por un grupo químico que no interfiera con la eficacia en la formación de imágenes de esta secuencia.

Se entiende por el término señal o entidad de señalización una entidad química que permita obtener una señal en la formación de imágenes médicas, particularmente:

- un quelato que puede acoplarse con un metal paramagnético,

- una nanopartícula metálica, especialmente una nanopartícula superparamagnética de óxido de hierro, 5

- una nanopartícula lipídica, ventajosamente en forma de emulsión, siendo dicha nanopartícula portadora de al menos un quelato que puede acoplarse con un metal paramagnético (en este caso, el péptido está injertado en la nanopartícula lipídica en emulsión... [Seguir leyendo]

1. Compuesto de la fórmula general (I) siguiente:

Señal-Nexo-Péptido (I) en la que:

- Señal representa una entidad de señalización,

- Nexo, presente o no, representa un enlace químico, y

- Péptido representa un péptido que comprende un péptido orientado a VCAM, siendo el péptido orientado a VCAM seleccionado de entre los péptidos de fórmula siguiente y sus equivalentes funcionales:

X10–X11–X12–X13–X14–X15–X16–X17–X18 (2) (SEC ID nº 4) siendo:

- X10 seleccionado de entre cisteína y metionina,

- X11 seleccionado de entre metionina y metionina,

- X12 seleccionado de entre lisina, arginina y alanina,

- X13 seleccionado de entre treonina y serina,

- X14 seleccionado de entre ácido aspártico y ácido glutámico,

- X15 seleccionado de entre treonina y serina,

- X16 seleccionado de entre arginina, alanina y lisina,

- X17 seleccionado de entre leucina, isoleucina y valina,

- X18 es cisteína y metionina preferentemente el péptido CMKTDTRLC (SEC ID nº 5) ; y las sales farmacéuticamente aceptables de estos compuestos.

2. Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque Péptido representa un péptido orientado a VCAM que comprende como máximo 20 aminoácidos.

3. Compuesto según la reivindicación 1 o 2, en el que el péptido orientado a VCAM es un péptido de fórmula CMKTDTRLC (SEC ID nº 5) .

4. Compuesto según las reivindicaciones 1 a 3, en el que Señal es un quelato acoplado o no con un metal paramagnético M, siendo M seleccionado ventajosamente de entre Gd, Mn, Fe, Dy y Tm.

5. Compuesto según la reivindicación 1 a 3, en el que Señal es un quelato acoplado o no con un radionucleido.

6. Compuesto según la reivindicación 5, en el que el radionucleido es Ga68 para la formación de imágenes PET.

7. Compuesto según las reivindicaciones 3 a 6, en el que el quelato se selecciona de entre: DOTA, DTPA, DO3A, HPDO3A, TRITA, TETA, BOPTA, NOTA, PCTA, DOTMA, AAZTA, HOPO y sus derivados.

8. Compuesto según las reivindicaciones 1 a 7, en el que Nexo representa:

a) un grupo de fórmula Q1-l-Q2, en la que Q1 y Q2, idénticos o diferentes, representan O, S, NH, CO2 -NHCO, CONH, NHCONH, NHCSNH, SO2NH o NHSO2-, y l representa un grupo alquilo, alcoxialquilo, polialcoxialquileno, alquenilo, alquinilo, alquilo interrumpido por uno o varios escuaratos, por uno o varios arilos, ventajosamente fenilo, o por uno o varios grupos seleccionados de entre -NH-, -O-, -CO-, -NH (CO) -, - (CO) NH-, -O (CO) -, o - (OC) O-;

b) un grupo (CH2) n, (CH2) n-CO-, - (CH2) nNH-CO-, siendo n = 2 a 10, (CH2CH2O) q (CH2) r-CO-, (CH2CH2O) q (CH2) r-NH-CO-, siendo q = 1-10 y r = 2-10, (CH2) n-CONH-, (CH2) n-CONH-PEG, (CH2) n-NH-, siendo n = 1 a 5 y ventajosamente n = 4 o 5; HOOC-CH2-O- (CH2) -O- (CH2) 2-O-CH2-COOH, HOOC- (CH2) 2-CO2 (CH2) 2-OCO- (CH2) 2-COOH, HOOC-CH (OH) -CH (OH) -COOH, HOOC- (CH2) n-COOH, NH2- (CH2) n-NH2, siendo n = 1-20; NH2- (CH2) n-CO2H o NH2-CH2- (CH2-O-CH2) n-CO2H, siendo n = 1 a 10.

9. Compuesto según las reivindicaciones 1 a 3, en el que Señal representa una nanopartícula superparamagnética revestida de una capa orgánica, preferentemente que tiene un núcleo de óxido de hierro, siendo ventajosamente la capa orgánica una capa de gem-bisfosfonato.

10. Compuesto según las reivindicaciones 1 a 3, en el que Señal representa un marcador para la formación de imágenes ópticas.

11. Compuesto según las reivindicaciones 1 a 3, en el que Señal representa una nanopartícula lipídica que comprende al menos un quelato, siendo ventajosamente el quelato es tal como se define en la reivindicación 6.

12. Composición para la formación de imágenes médicas que comprende al menos un compuesto de fórmula general (I) según una de las reivindicaciones 1 a 11 y un excipiente farmacéuticamente aceptable ventajosamente destinado a la administración por vía parenteral.

13. Procedimiento de preparación de la composición según la reivindicación 12, que comprende la adición de un compuesto de fórmula general (I) según una de las reivindicaciones 1 a 11 a un medio inyectable que comprende el excipiente farmacéuticamente aceptable.

14. Utilización de un compuesto (I) según una de las reivindicaciones 1 a 11, para la preparación de una composición de diagnóstico de enfermedades cardiovasculares, ventajosamente seleccionada de entre: una enfermedad asociada a placas de ateroma, particularmente a placas vulnerables, una enfermedad coronaria y/o un riesgo de accidente isquémico, ventajosamente seleccionado de entre: infarto de miocardio, accidente cerebrovascular, embolia renal, isquemia aguda de un miembro y ruptura de aneurisma aórtico.

15. Utilización de un compuesto (I) según una de las reivindicaciones 1 a 11, para la preparación de una composición de diagnóstico destinada al seguimiento de un tratamiento terapéutico de enfermedades como enfermedad cardiovascular y/o riesgo de accidente isquémico.

16. Utilización de un péptido definido en una de las reivindicaciones 1 a 3, para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento terapéutico o preventivo de una enfermedad cardiovascular, llegado el caso en asociación con otro tratamiento terapéutico o preventivo de una enfermedad cardiovascular.