Compuesto que tiene una estructura de fórmula I **Fórmula**

o fórmula II **Fórmula**

en el que en dicha fórmula I,

R1 se selecciona entre el grupo que comprende:

R2 se selecciona entre el grupo que comprende H y 3-CONH2, y n es un número entero entre 8 y 10;

en el que en dicha fórmula II, R1 es **Fórmula**

R2 se selecciona entre el grupo que comprende: **Fórmula**

y n es un número entero que vale 8.

Compuestos de piridinio anfífilos, método de fabricación y utilización de los mismos

SECTOR DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a compuestos, un método de fabricación y un método de utilización de dichos compuestos para el tratamiento de las enfermedades relacionadas con interleuquina-8, tales como fibrosis quística.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

La interleuquina-8 (IL-8) es una citoquina que activa y atrae neutrófilos y atrae linfocitos T. La IL-8 es liberada por varios tipos celulares incluyendo monocitos, macrófagos, linfocitos T, fibroblastos, células endoteliales y queratinocitos mediante un estímulo inflamatorio. La IL-8 es un miembro de la superfamilia de beta-tromboglobulina y está estructuralmente relacionada con el factor plaquetario 4.

La IL-8 es una proteína no glucosilada de 8 kDa (72 aminoácidos) y se produce mediante el procesamiento de una proteína precursora de 99 aminoácidos. La proteína IL-8 contiene cuatro residuos de cisteína que participan en puentes disulfuro. El gen de IL-8 humana (SCYB8) tiene una longitud de 5, 1 kb, contiene cuatro exones y mapas para el cromosoma humano 4q12-q21. El ARNm está compuesto por una región no traducida 5’ de 101 bases, un marco abierto de lectura de 297 bases, y una larga región 3' no traducida de 1, 2 kb. La región flanqueante 5' del gen de IL-8 contiene una serie de elementos que actúan en posición cis que son potenciales sitios de unión para factores nucleares. Algunos de los elementos que actúan en posición cis son sensibles a reguladores intrínsecos tales como NFκB y AP-1, mientras que otros son específicos de patógenos. Las identidades de los elementos que actúan en posición cis se resumen de la siguiente manera: (i) el RSVRE, (sitio de unión -162 a -132) es el recién descubierto Elemento Sensible al Virus Respiratorio Sincitial, que es responsable de la inflamación pulmonar intensa dependiente de IL-8 en infección por VRS [Casola y otros, J. Immunol., 164: 5944-5951, (2000) ]. (ii) IFNRF1, el factor de regulación de interferón 1, se une a RSVRE y activa además el mismo. [Casola y otros, supra]. (iii) AP-1, (sitio de unión:-126 a -120) , es activado por el heterodímero de JunD/cFos, y es superactivado en infección por citomegalovirus (CMV) por el (iv) CMVRE1 (elemento sensible a CMV) . (v) NF-IL6 (sitio de unión: -94 a -81) es activador de la transcripción de IL-8 y es un posible sitio de solapamiento de interacción con C/EBPa (proteína a de unión a la secuencia potenciadora CCAAT) . (vi) NFκB (sitio de unión: -80 a -70) es activado por la familia de los factores de transcripción NF B/Rel, y superactivado por CMV1E1. (vii) C/EBPa (sitio de unión: -91 a -81) se solapa parcialmente con el sitio de NFκB, y activa o inhibe la transcripción de IL-8, dependiendo del contexto [Victor y otros,

J. Trauma, 39: 635-640, (1996) ; Stein y otros, Mol. Cell. Biol., 13: 7191-7198, (1993) ]. (viii) GC (receptor de glucocorticoides) se une a NFκB e inhibe la transcripción [Baldwin, Annu. Rev. Immunol., 14: 649-681, (1996) ]. (ix) OCT-1 es un factor de homeodominio que suprime la transcripción de IL-8 actuando sobre NF-IL6 [Wu y otros, J. Biol. Chem., 272: 2396-2403, (1997) ]. (x) NF-AT (Factor Nuclear de células T Activadas) se une en el sitio de NFκB

o cerca del mismo y activa la transcripción [Roebuck, J. Interferon Cytokine Res., 19: 429-438, (1999) ]. (xi) TAX, codificado por el virus VLTH-1, se une a NFκB y promueve la transcripción [Suzuki y otros, Oncogene, 9: 3099-3105, (1994) ]. (xii) NRF (sitio de unión: solapamiento parcial con NFκB) es el Factor de Represión de NFκB que es principalmente responsable de la silenciación basal, pero también es necesario para la producción completa de ARNm de IL-8 [Nourbakhsh y otros, J. Biol. Chem., 44: 4501-4508, (2000) ]. (xiii) secuencia TATA (sitio de unión: -20 a -13) se une a TF-III y a TBP, y es absolutamente necesaria para la transcripción de IL-8.

La IL-8 difiere de todas las demás citoquinas en su capacidad para activar específicamente granulocitos neutrófilos. En los neutrófilos, IL-8 causa un aumento transitorio de los niveles de calcio citosólico y la liberación de enzima a partir de gránulos. La IL-8 también mejora el metabolismo de especies de oxígeno reactivas y aumenta la quimiotaxis y la expresión mejorada de moléculas de adhesión. Se requiere una pre-activación mediante IL3 para hacer a los basófilos y neutrófilos susceptibles a activación adicional por IL-8, y la IL-8 sola no libera histaminas. La IL-8 realmente inhibe la liberación de histamina de basófilos humanos inducida por factores de liberación de histamina, CTAP-3 (proteína activadora de tejido conectivo-3) e IL3.

La IL-8 es quimiotáctica para todos los tipos conocidos de células inmunitarias migratorias e inhibe la adhesión de leucocitos a células endoteliales activadas y, por lo tanto, posee actividades antiinflamatorias. La IL-8 es un mitógeno para células epidérmicas y se une fuertemente a eritrocitos in vivo. Esta absorción puede ser de importancia fisiológica en la regulación de reacciones inflamatorias, dado que IL-8 unida a eritrocitos ya no activa los neutrófilos. La IL-8 obtenida de macrófagos apoya la angiogénesis y puede desempeñar un papel en trastornos dependientes de angiogenes tales como artritis reumatoide, crecimiento tumoral y cicatrización de heridas.

La expresión y la regulación de IL-8 se han asociado con diversos estados de enfermedad tales como enfermedad intestinal inflamatoria, aterosclerosis, y trastornos pulmonares. La IL-8 se ha asociado específicamente con fibrosis quística (FQ) , dado que es profundamente elevada en fluidos de lavado broncoalveolar, esputo y suero de pacientes de FQ [Dean y otros, Pediatr. Res., 34: 159-161, (1993) y Armstrong y otros, Am J. Resnir. Crit. Care Med., 156: 1197-1204, (1997) ].

La FQ es la enfermedad mortal autosómica recesiva más común en los Estados Unidos [Welsh y otros, Cystic fibrosis in: The metabolic and molecular bases of inherited diseases [Fibrosis quística en: Las bases metabólicas y moleculares de enfermedades hereditarias] (Scriver, C.L., Beaudet, A.L., Sly, W.S., y Valle, D. eds.) Séptima Ed. 5 págs. 3799-3876, McGraw-Hill, Nueva York. (1995) ]. Aproximadamente el 5% de la población porta un gen regulador de la conductancia transmembrana de fibrosis quística (CFTR) mutante [Rommens y otros, Science, 245: 1: 1059-1065, (1989) ; Riordan y otros, Science, 245: 1: 1066-1073, (1989) ; y Kerem y otros, Science, 245: 1: 1073-1080, (1989) ], y la enfermedad se produce a una frecuencia de 1 de cada 2500 nacidos vivos. Estadísticamente, la muerte se produce en la mayoría de los pacientes a la edad de 28 años. Las dificultades

respiratorias y subsiguientes complicaciones de inflamación e infección de pulmón son directamente responsables de la eventual muerte de más del 90% de los pacientes de FQ.

El pulmón con FQ ha sido descrito como microscópicamente normal en el nacimiento, con sutiles anormalidades en secreción de moco que aparecen muy temprano [Pilewski y otros, Physiol. Rev., 79: 5215-5255, (1999) ]. La infección 15 bacteriana y la prueba objetiva de inflamación se producen en momentos posteriores, con una clara evolución temporal de diferentes patógenos bacterianos principales. Por ejemplo, Staphylococccus aureaus y Hemophilus influenzae comienzan la residencia en las vías respiratorias con FQ temprano, siendo la edad media de cultivo positivo de 12, 4 meses [Abman y otros, J. Pediatrics 119: 211-217, (1991) ]. En comparación, la infección por Pseudomonas aeruginosa sigue en un tiempo sustancialmente posterior, siendo la edad media del primer cultivo

positivo de 20, 8 meses. La colonización persistente por P. aerarginosa caracteriza al paciente de FQ más antiguo, y la evidencia celular persistente y profunda de inflamación acompaña a la infección persistente a medida que el paciente se acerca a las fases terminales de la enfermedad.

A medida que el paciente de FQ envejece, el pulmón con FQ se vuelve caracterizado por elevados niveles de

glóbulos blancos. Estos incluyen leucocitos polimorfonucleares, macrófagos, monocitos, linfocitos y eosinófilos. Se sugiere que estas células son atraídas desde la circulación a la vía respiratoria por los altos niveles de IL-8 y otros factores proinflamatorios tales como IL1β, IL6, leucotrieno B4, RANTES, y TNFα. Estos factores marcan el carácter del... [Seguir leyendo]

1. Compuesto que tiene una estructura de fórmula I

o fórmula II

en el que en dicha fórmula I, R1 se selecciona entre el grupo que comprende:

R2 se selecciona entre el grupo que comprende H y 3-CONH2, y n es un número entero entre 8 y 10; en el que en dicha fórmula II, R1 es

R2 se selecciona entre el grupo que comprende:

y n es un número entero que vale 8.

2. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto tiene la estructura de fórmula I, y en el que R1 es

R2 es H, y n es 8.

3. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto tiene la estructura de fórmula I, y en el que R1 es

R2 es H, y n es 8.

4. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto tiene la estructura de fórmula I, y en el que R1 20 es R2 es H, y n es 10.

5. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto tiene la estructura de fórmula I, y en el que R1 es

R2 es H, y n es 8.

7. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto tiene la estructura de fórmula I, y en el que R1 es

R2 es H, y n es 8.

8. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto tiene la estructura de fórmula I, y en el que R1 es

R2 es 3-CONH2, y n es 8.

9. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto tiene la estructura de fórmula I, y en el que R1 es

R2 es H, y n es 8.

10. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que dicho compuesto tiene la estructura de fórmula II, y en el que R1 es

R2 es

R2 es

y n es 8.

12. Compuesto, según la reivindicación 1, que tiene una estructura de fórmula I

o fórmula II

en el que en dicha fórmula I, R1 se selecciona entre el grupo que comprende:

y

R2 se selecciona entre el grupo que comprende H y 3-CONH2, y n es un número entero entre 8 y 10; en el que en dicha fórmula II, R1 es

R2 se selecciona entre el grupo que comprende

y n es un número entero que vale 8.

13. Composición farmacéutica para tratar una enfermedad o afección relacionada con IL-8, que comprende dichos compuestos, según las reivindicaciones 1 a 12, y un vehículo farmacéuticamente aceptable, en el que dicha enfermedad o afección relacionada con IL-8 se selecciona entre el grupo que comprende fibrosis quística, operaciones de circulación extracorpórea, parada cardiorrespiratoria, enfermedad intestinal inflamatoria, aterosclerosis, lesiones térmicas, lesiones provocadas por un ácido, inhalación de humo, edema pulmonar por

reexpansión, lesión cerebral traumática, apoplejía, diabetes, rechazo de injerto en transplante, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, infecciones víricas tales como VIH, cáncer, fiebres resistentes a inhibidores de ciclooxigenasa, artritis reumatoide y trastornos inflamatorios relacionados.

14. Composición farmacéutica, según la reivindicación 13, en la que dicho compuesto es 15

15. Composición farmacéutica, según la reivindicación 13, en la que dicho compuesto es

16. Composición farmacéutica, según las reivindicaciones 13 a 15, para su utilización en un método para tratar una enfermedad o afección relacionada con IL-8 en un mamífero, en el que dicha enfermedad o afección relacionada con IL-8 se selecciona entre el grupo que comprende fibrosis quística, operaciones de circulación extracorpórea, parada

cardiorrespiratoria, enfermedad intestinal inflamatoria, aterosclerosis, lesiones térmicas, lesiones provocadas por un ácido, inhalación de humo, edema pulmonar por reexpansión, lesión cerebral traumática, apoplejía, diabetes, rechazo de injerto en transplante, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, infecciones víricas tales como VIH, cáncer, fiebres resistentes a inhibidores de ciclooxigenasa, artritis reumatoide y trastornos inflamatorios relacionados.

17. Composición farmacéutica, según las reivindicaciones 13 a 15, para su utilización, según la reivindicación 16, en la que dicha enfermedad relacionada con IL-8 es fibrosis quística.

18. Composición farmacéutica, según las reivindicaciones 13 a 15, para su utilización, según la reivindicación 16, en 35 la que dicha composición farmacéutica es administrada por vía oral.

19. Composición farmacéutica, según las reivindicaciones 13 a 15, para su utilización, según la reivindicación 16, en la que dicha composición farmacéutica es administrada por vía intravascular.

20. Composición farmacéutica, según las reivindicaciones 13 a 15, para su utilización, según la reivindicación 16, en 5 la que dicha composición farmacéutica es administrada por vía intramuscular.

21. Composición farmacéutica, según las reivindicaciones 13 a 15, para su utilización, según la reivindicación 16, en la que dicha composición farmacéutica es administrada por vía subcutánea.

22. Composición farmacéutica, según las reivindicaciones 13 a 15, para su utilización, según la reivindicación 16, en la que dicha composición farmacéutica es administrada por vía intraperitoneal.

23. Composición farmacéutica, según las reivindicaciones 13 a 15, para su utilización en un método para inhibir la

secreción de IL-8 en una célula de mamífero. 15

24. Composición farmacéutica, según las reivindicaciones 13 a 15, para su utilización, según la reivindicación 23, en la que dicha composición farmacéutica comprende el compuesto

25. Composición farmacéutica, según las reivindicaciones 13 a 15, para su utilización, según la reivindicación 23, en la que dicha célula de mamífero es una célula epitelial de pulmón con FQ.

26. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto que tiene una estructura

y un vehículo farmacéuticamente aceptable para su utilización en un método para tratar fibrosis quística en un mamífero.

27. Composición farmacéutica, según la reivindicación 26, para su utilización en un método para tratar fibrosis quística en un mamífero, en el que dicha composición farmacéutica es administrada por vía oral.

28. Composición farmacéutica, según la reivindicación 26, para su utilización en un método para tratar fibrosis 5 quística en un mamífero, en el que dicha composición farmacéutica es administrada por vía intravascular.

29. Composición farmacéutica, según la reivindicación 26, para su utilización en un método para tratar fibrosis quística en un mamífero, en el que dicha composición farmacéutica es administrada por vía intramuscular.

30. Composición farmacéutica, según la reivindicación 26, para su utilización en un método para tratar fibrosis quística en un mamífero, en el que dicha composición farmacéutica es administrada por vía subcutánea.

31. Composición farmacéutica, según las reivindicaciones 13 a 15, para su utilización en un método para tratar

enfermedad de Alzheimer en un mamífero. 15

32. Composición farmacéutica, según la reivindicación 31, para su utilización en un método para tratar enfermedad de Alzheimer en un mamífero, en la que dicha composición farmacéutica comprende el compuesto

o

33. Método de preparación del compuesto, según la reivindicación 6, que comprende las etapas de: disolver α-metil-2- (4-[2-metilpropil]benceno) acetato de S-8-bromo-n-octilo y piridina en acetona; añadir yoduro de tetrabutilamonio para formar una mezcla de reacción; agitar la mezcla de reacción durante 2 días a 50ºC, y retirar la acetona.

34. Método de preparación del compuesto, según la reivindicación 10, que comprende las etapas de: disolver α-metil-2- (4-[2-metilpropil]benceno) acetato de S-8-bromo-n-octilo y 4-n-propilpiridina en acetona; añadir yoduro de tetrabutilamonio para formar una mezcla de reacción; agitar la mezcla de reacción durante 2 días a 50ºC, y

retirar la acetona.