Cinacalcet y tumores neuroblásticos.

La presente invención pertenece al campo de la terapia de tumores pediátricos o del desarrollo.

En concreto, se refiere al uso del activador alostérico del receptor sensor de calcio, cinacalcet, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de tumores neuroblásticos, en particular para el tratamiento de neuroblastomas, ganglioneuroblastomas y ganglioneuromas.

Cinacalcet y tumores neuroblásticos

Campo de la invención

La presente invención pertenece al campo de los tumores pediátricos o del desarrollo. En concreto, se refiere al uso del activador alostérico del receptor sensor de calcio, cinacalcet, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de tumores neuroblásticos.

Antecedentes de la invención

Se conocen como tumores del desarrollo aquellos que se manifiestan principalmente durante la edad pediátrica o que únicamente se manifiestan en esta etapa. Por esta razón a veces se les denomina también tumores pediátricos. En el contexto de la presente invención se usará indistintamente el término tumor del desarrollo o tumor pediátrico.

Dentro del grupo de los tumores del desarrollo están los neuroblastomas (NB) , ganglioneuroblastomas (GNB) y ganglioneuromas (GN) , que conforman el grupo de los tumores neuroblásticos (TN) . Los TN son los tumores sólidos extracraneales más frecuentes de la infancia y se desarrollan a partir de células de la cresta neural ya comprometidas en la formación del sistema nervioso periférico, por lo que se localizan en la médula suprarrenal o en los ganglios nerviosos de la cadena simpática paravertebral. La mayoría de los NB localizados, GNB y GN presentan índices de supervivencia excelentes, pero los NB metastásicos, pese a ser sometidos a terapias intensivas multimodales, tienen aún hoy día índices de supervivencia que rondan el 40%.

Los TN son un grupo de tumores muy heterogéneo desde el punto de vista clínico, anatomopatológico, genético y biológico. Las bases biológicas responsables de la diversidad clínica de los TN se conocen sólo parcialmente, pero se hallan sin duda tras las diferentes formas de respuesta de los tumores a los protocolos de tratamiento. Entre ellas, destacan las alteraciones de la ploidía, las translocaciones desequilibradas, las deleciones o ganancias de regiones cromosómicas recurrentes y la amplificación del oncogén MYCN. Estas alteraciones genético-moleculares, aunque cruciales para el comportamiento biológico de los TN, apenas pueden ser modificadas terapéuticamente. Antes de que se describieran muchas de ellas, se sabía que los TN más diferenciados y con mayor proporción de componente estromal tipo Schwann (NB en diferenciación, GNB y GN) se asociaban a mejor pronóstico que los NB indiferenciados. Se han descubierto algunas de las vías moleculares responsables de los procesos de diferenciación celular en TN. Estas rutas son de gran importancia terapéutica ya que son modulables farmacológicamente. Así, por ejemplo, el ácido retinoico induce diferenciación en líneas celulares de NB y en los tumores de los pacientes, mejorando la supervivencia global de un subgrupo de ellos. Algunos NB son resistentes a la acción de este fármaco, pero la falta de un conocimiento detallado de los mecanismos moleculares responsables de la diferenciación de los TN dificulta el diseño de nuevos agentes diferenciadores que puedan beneficiar a un mayor número de pacientes.

El gen del receptor sensor de calcio (CASR) fue clonado en 1993 a partir de células paratiroideas bovinas y forma parte de la familia C de la superfamilia de receptores acoplados a proteínas G (GPCR) , junto a ocho receptores del glutamato, dos receptores GABA-B, algunos receptores del gusto y el sensor de aminoácidos GPRC6A. Esta familia de receptores detecta señales de iones, aminoácidos y nutrientes, entre otros, y las transmiten al medio intracelular. Todos ellos comparten una estructura similar que se compone de un gran dominio extracelular amino-terminal, siete hélices transmembrana y una cola intracelular carboxilo-terminal. En el Ca2+

caso de CASR, su principal función es detectar las fluctuaciones del extracelular y regular consecuentemente la secreción de hormona paratiroidea (PTH) en las glándulas paratiroides y de calcitonina en las células C del tiroides, hormonas encargadas de normalizar la calcemia. En el contexto de las paratiroides, la activación de CASR por el calcio se traduce en una disminución de la regulación y producción de la hormona paratiroidea (PTH) , lo que a su vez disminuirá la concentración plasmática de calcio para mantenerla dentro de un estrecho margen (1, 1-1, 3 mM) .

Se ha hallado expresión de CASR en distintas neoplasias con la particularidad de que se le atribuyen funciones muy distintas, incluso contrapuestas, en diferentes contextos tumorales. Así, por ejemplo, se ha descrito que la activación de CASR promueve proliferación y metástasis en carcinoma de próstata, mientras que los datos parecen apoyar que participa en los procesos de diferenciación en carcinoma de colon.

Existen agonistas directos de CASR (o agonistas de tipo 1) y activadores alostéricos de CASR (o agonistas de tipo 2) . Los primeros, como son Ca2+, Mg2+, Gd3+, neomicina, L-aminoácidos, activan CASR mediante interacción directa con el dominio extracelular del mismo. En cambio, los activadores alostéricos no activan al receptor por sí mismos sino que alteran su estructura tridimensional, de manera que se torna más sensible al estímulo del calcio. El cinacalcet es un activador alostérico del receptor sensor de calcio. En la patente US 5.688.938 se describen varios agonistas de CASR, como NPS R-467 y NPS R-568, siendo NPS R-568 (referido también como R-568) el más activo. Asimismo, la patente US 6.296.833 describe el uso de agonistas o antagonistas del calcio para el tratamiento de cáncer. En la presente solicitud se describe el uso de cinacalcet para la preparación de un medicamento para el tratamiento de tumores neuroblásticos. Sorprendentemente el uso de cinacalcet resulta en importantes ventajas ya que es capaz de inducir apoptosis de células tumorales a menor concentración que otros agonistas de CASR.

Objeto de la invención

La presente invención se refiere al uso de cinacalcet para la preparación de un medicamento para el tratamiento de tumores neuroblásticos, en particular para el tratamiento de neuroblastomas, ganglioneuroblastomas y ganglioneuromas.

Breve descripción de las figuras

Figura 1. A) Morfología de células SK-N-LP con (paneles inferiores) o sin (paneles superiores) sobre-expresión de CASR tras 16 horas sometidas a deprivación de suero y posterior exposición a 3 mM CaCl2 durante 24 y 48 horas. B) Análisis de viabilidad celular en la línea celular SK-N-LP, con sobre-expresión de CASR (barra negra) o sin sobre-expresión de CASR (barra vacía) , tras 16 horas de deprivación de suero y exposición posterior a 0, 5 mM, 1, 4 mM o 3 mM CaCl2 durante 48 horas. C) Análisis mediante Western blot de la activación de caspasa 3 y clivaje de PARP en células SK-N-LP nativas (wild type, WT) y en células SK-N-LP con sobre-expresión de CASR (CASR) tras ser expuestas durante 24 h (dos primeros carriles) y 48 h (dos últimos carriles) al modelo in vitro descrito en el apartado A.

Figura 2. Viabilidad celular de líneas celulares nativas de neuroblastoma tratadas in vitro con cinacalcet o con NPS R-568 durante 72 horas. Se representa el porcentaje de viabilidad respecto al control frente a la concentración (Conc.) en μM de cinacalcet (circulo) o R-568 (cuadrado) . Las líneas celulares analizadas son las siguientes: LAN-1 (Fig. 2A) , SK-N-LP (Fig. 2B) , SK-N-JD (Fig. 2C) , SK-N-BE (2) c (Fig. 2D) , LA1-5s (Fig. 2E) , LA155n (Fig. 2F) y SK-N-AS (Fig. 2G) .

Figura 3. Examen morfológico de xenoimplantes generados a partir de las líneas celulares LAN-1 (Fig. 3A, 3C, 3E) y SK-N-LP (Fig. 3B, 3D, 3F) tratados con cinacalcet (Fig. 3C-3F) o no (Fig. 3A, 3B) . Se muestran especímenes en los que el cinacalcet produjo mayoritariamente muerte celular (Fig. 3C, 3D) o citodiferenciación (Fig. 3E, 3F) .

Descripción detallada de la invención

La presente invención se refiere en un aspecto al uso de cinacalcet para la preparación de un medicamento para el tratamiento de tumores neuroblásticos. En una realización particular, se refiere al uso de cinacalcet para la preparación de un medicamento para el tratamiento de neuroblastomas. En otra realización particular, se refiere al uso de cinacalcet para la preparación de un medicamento para el tratamiento de ganglioneuroblastomas. En otra realización particular, se refiere al uso de cinacalcet para la preparación de un medicamento para el tratamiento de ganglioneuromas.

En otro aspecto, la presente invención se refiere a cinacalcet para uso en el tratamiento de tumores neuroblásticos, en particular para uso en el tratamiento de neuroblastomas. Otra realización... [Seguir leyendo]