Composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de células genéticamente modificadas que contienen una construcción genética que expresa un inhibidor de TGFß eficaz para reducir la expresión de TGFß,

en la que dichas células genéticamente modificadas son células de cáncer de pulmón

Células genéticamente modificadas que expresan un inhibidor de TGF-beta, siendo las células células de cáncer de pulmón.

Antecedentes de la invención

Campo de la invención

La presente invención se refiere a composiciones que comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de células genéticamente modificadas que contienen una construcción genética que expresa un inhibidor de TGF1 eficaz para reducir la expresión de TGF1, en las que las células genéticamente modificadas son células de cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) o de cáncer de pulmón de células pequeñas (SCLC) , y a usos relacionados.

Descripción de la técnica relacionada El cáncer de pulmón sigue siendo el cáncer más prevalente en el mundo occidental, representando el 30% de todas las muertes relacionadas con el cáncer (Ramanathan y Belani, 1997) . El pronóstico actual para pacientes con cáncer de pulmón es malo. La tasa de curación global se estima en tan sólo el 13%. Se esperan aproximadamente 180.000 nuevos casos de cáncer de pulmón en los Estados Unidos en 1999. La mayoría de estos pacientes morirán debido a su enfermedad, esperándose 160.000 muertes por cáncer de pulmón a nivel nacional en 1999.

Existen dos subdivisiones importantes del cáncer de pulmón: cáncer de pulmón 1) de células no pequeñas (NSCLC) y 2) de células pequeñas (SCLC) . Los enfoques de tratamiento y la historia natural difieren para estas dos enfermedades. La mayoría de casos (80%) de cáncer de pulmón en los Estados Unidos son NSCLC. Aunque se han producido avances en el entendimiento de factores de pronóstico y clínicos importantes tanto para NSCLC como para SCLC en los últimos 20 años, ha habido mejoras mínimas en los resultados terapéuticos. La única opción curativa para pacientes con NSCLC es terapia local (extirpación quirúrgica o irradiación local) en pacientes con enfermedad en estadio temprano (I y II) cuando el tumor está aún localizado. Sin embargo, en el diagnóstico la mayoría de pacientes con NSCLC presentan enfermedad avanzada, que no puede curarse mediante cirugía sola. En estadios avanzados de la enfermedad, la irradiación y/o quimioterapia sistémica pueden producir respuestas objetivas u alivio de síntomas, sin embargo, ofrecen sólo mejoras modestas en la supervivencia. La mediana de supervivencia de pacientes con enfermedad no resecable es de 6-12 meses. Las tasas de supervivencia a dos años para los estadios IIIB y IV de NSCLC son del 10, 8 y el 5, 4 por ciento respectivamente. Asimismo, las tasas de supervivencia a cinco años son del 3, 9 y el 1, 3 por ciento. Recientemente, varios fármacos nuevos están disponibles para el tratamiento de NSCLC incluyendo paclitaxel (Taxol) , docetaxel (Taxotere) , topotecán, irinotecán, vinorelbina y gemcitabina. Aunque estos fármacos son mejoras con respecto a agentes quimioterápicos anteriores (etopósido, cisplatino y carboplatino) , la tasa de curación global sigue siendo baja.

El SCLC es un cáncer muy agresivo que se metastatiza tempranamente y a menudo, y tiene una mediana de supervivencia desde el diagnóstico de sólo dos a cuatro meses. Las formas de tratamiento localizado, tales como resección quirúrgica o radioterapia, muy rara vez producen supervivencia a largo plazo debido a la propensión de este cáncer a metástasis distante. Con la quimioterapia, la supervivencia puede prolongarse al menos de cuatro o cinco veces la tasa de supervivencia media para pacientes a los que no se les administra terapia, sin embargo, la supervivencia global a cinco años se mantiene en sólo el 5-10%.

Puesto que las modalidades terapéuticas actuales no mejoran significativamente la esperanza de vida en los estadios de pacientes con NSCLC o SCLC, se justifica la exploración de nuevos enfoques terapéuticos para estos pacientes.

El documento WO 96/002143 proporciona un método para prevenir o reducir la gravedad de un cáncer en un sujeto estimulando la respuesta inmunitaria del sujeto contra el cáncer. El documento WO 96/25178 proporciona un enfoque para tratar la fibrosis tisular que resulta de la acumulación inducida por TGF-1 de matriz extracelular.

Sumario de la invención

Los pacientes que portan tumores de diferente origen histológico tienen niveles elevados de factores de crecimiento transformante 1 (TGF1) . Los TGF1 son factores de crecimiento que están asociados con la inmunosupresión. La supresión del sistema inmunitario de los pacientes da como resultado su incapacidad para reconocer y destruir tumores cuando aparecen por primera vez. Además, la supresión de la inmunidad de los pacientes los hace susceptibles a infecciones frecuentes. La inyección de células tumorales modificadas mediante ingeniería genética para bloquear su producción de TGF1 convierte a las células genéticamente modificadas en vacunas potentes que se reconocen por y pueden activar el sistema inmunitario contra el tumor. Activación del sistema inmunitario provoca posteriormente el reconocimiento y control de los tumores no modificados, originales en los organismos huésped. Este fenómeno se aplica en modelos tumorales animales y en ensayos clínicos en seres humanos. Por tanto, se propone usar este enfoque en pacientes con estadios de cánceres de pulmón de células no pequeñas y de células pequeñas.

Descripción detallada de la realización preferida

Los cánceres de pulmón representan el 30% de todas las muertes debidas a cáncer en los Estados Unidos (Ramanathan y Belani, 1997) . La tasa de curación global para cáncer de pulmón es del 13% y el pronóstico actual para pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) y cáncer de pulmón de células pequeñas (SCLC) sigue siendo malo.

Se ha documentado que pacientes con crecimiento tumoral progresivo tienen una función inmunitaria alterada (Jakowlew et al. 1995, Ransohoff et al. 1991; Holladay et al. 1992a; Holladay et al. 1992b) . Esta alteración, comúnmente caracterizada como hiposensibilidad inmunitaria marcada, no se restringe únicamente a la inmunidad específica de tumor, sino que a su vez, a menudo se observa por todo el sistema inmunitario. La alteración es especialmente evidente en el compartimiento de células T o mediado por células y se caracteriza por linfopenia de células T y receptividad de células T alterada a estímulos tanto específicos de tumor como no específicos de tumor (Ransohoff et al. 1991) . Un modo por el que los tumores pueden escapar de la vigilancia inmunitaria es expresando niveles inferiores de moléculas de MHC de clase I y clase II. Otros tumores pueden escapar aumentando la expresión de moléculas inmunosupresoras, tales como los TGF1. Es común observar tumores que utilizan una combinación de estos mecanismos.

La terapia génica ha recibido considerable atención en los últimos años. La vacunación con células tumorales diseñadas para aumentar la presentación de antígenos tumorales e inducir inmunidad antitumoral específica ha producido resultados prometedores pero limitados (Holladay et al. 1992) . Los avances en el entendimiento de la biología del cáncer y los desarrollos en las tecnologías de vectores están haciendo progresar el potencial terapéutico de enfoques de vacunas tumorales. Ahora es posible modificar genéticamente células tumorales para vacunación para que expresen genes supresores de tumores específicos, moduladores inmunitarios, genes sensibles a fármacos y fragmentos génicos antisentido (Huber et al. 1991; Culver et al. 1992; Trojan et al. 1992; Dranoff et al. 1993; Ram et al. 1993; Trojan et al. 1993; Swisher et al. 1999) . En estudios clínicos y preclínicos particulares se demuestra el potencial de los enfoques de terapia génica en el tratamiento del cáncer de pulmón. Modelos de cáncer de pulmón preclínicos han mostrado regresión de tumores establecidos e inmunogenicidad potenciada usando una línea de cáncer de pulmón alogénica genéticamente modificada para que exprese la citocina GM-CSF y un gen sensible a fármacos, timidina cinasa del virus del herpes simple mezclada con células dendríticas derivadas de la médula ósea singénica (Miller et al. 1998) . Resultados preliminares de los ensayos clínicos de fase I en pacientes usando terapia génica retroviral muestra que la terapia génica se tolera bien y no tiene toxicidad (Swisher et al. 1998) .

Los factores de crecimiento transformante beta (TGF1) son una familia de proteínas multifuncionales que regulan el crecimiento y la función de muchos tipos de células normales y neoplásicas (Sporn et al. 1986; Massague 1987; Border y Rouslahti 1992; Jachimczak... [Seguir leyendo]

1. Composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de células genéticamente modificadas que contienen una construcción genética que expresa un inhibidor de TGF1 eficaz para reducir la expresión de TGF1, en la que dichas células genéticamente modificadas son células de cáncer de pulmón.

2. Composición que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de células genéticamente modificadas que contienen una construcción genética que expresa un inhibidor de TGF1 eficaz para reducir la expresión de TGF1, en la que dichas células genéticamente modificadas son células de cáncer de pulmón, para su uso en la prolongación de la supervivencia de un sujeto que tiene cáncer de pulmón.

3. Uso de una composición que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de células genéticamente modificadas que contienen una construcción genética que expresa un inhibidor de TGF1 eficaz para reducir la expresión de TGF1, en el que dichas células genéticamente modificadas son células de cáncer de pulmón para la preparación de un medicamento para prolongar la supervivencia de un sujeto que tiene cáncer de pulmón.

4. Composición farmacéutica según la reivindicación 1, composición según la reivindicación 2 o uso según la reivindicación 3, en los que dichas células de cáncer de pulmón son células de cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) o células de cáncer de pulmón de células pequeñas (SCLC) .

5. Composición farmacéutica según la reivindicación 1 ó 4, composición según la reivindicación 2 ó 4 o uso según la reivindicación 3 ó 4, en los que dicho TGF1 es TGF1-1 o TGF1-2.

6. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1, 4 y 5, composición según una cualquiera de las reivindicaciones 2, 4 y 5 o uso según una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 5, en los que dichas células genéticamente modificadas son células autólogas, células alogénicas o mezclas de células autólogas y alogénicas.

7. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 4 a 6, composición según una cualquiera de las reivindicaciones 2 y 4 a 6 o uso según una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 6, en los que dichas células genéticamente modificadas expresan además una o mas citocinas que tienen efectos inmunoestimuladores.

8. Composición farmacéutica, composición o uso según la reivindicación 7, en los que dichas una o mas citocinas se selecciona del grupo que consiste en interleucina 1, interleucina 2, interleucina 3, interleucina 4, interleucina 5, interleucina 6, interleucina 7, interleucina 8, interleucina 9, interleucina 10, interleucina 11, interleucina 12, interleucina 15, interferón alfa, interferón gamma, factor de necrosis tumoral alfa, factor de crecimiento transformante beta, factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos y factor estimulante de colonias de granulocitos.

9. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 4 a 8, composición según una cualquiera de las reivindicaciones 2 y 4 a 8 o uso según una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 8, en los que dicho inhibidor de TGF1 es un antisentido, una ribozima, un mutante negativo dominante o un anticuerpo.

10. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 4 a 9, composición según una cualquiera de las reivindicaciones 2 y 4 a 9 o uso según una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 9, en los que dicho inhibidor de TGF1 es un antisentido que tiene la secuencia de SEQ ID NO: 1.

11. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 4 a 10, composición según una cualquiera de las reivindicaciones 2 y 4 a 10 o uso según una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 10, en los que dicho inhibidor de TGF1 impide la interacción entre la proteína Smad y el receptor de TGF1.

12. Composición farmacéutica según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 4 a 11, composición según una cualquiera de las reivindicaciones 2 y 4 a 11 o uso según una cualquiera de las reivindicaciones 3 a 11, en los que dicha composición se proporciona en forma farmacéutica unitaria.