Un anticuerpo de IL-9 que comprende:

(a) una región de determinación de complementariedad (CDR) 1 del dominio variable pesado (VH) que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO:

26; y una VH CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:2; y una VH CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:3; y una VL CDR 1 que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:62; y una VL CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:65; y una VL CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:20; o

(b) un dominio VH que comprende una secuencia de aminoácidos idéntica en al menos un 90% a la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:27; y un dominio VL que comprende una secuencia de aminoácidos que es idéntica en al menos un 90% a la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:28; donde el anticuerpo se une de forma inmunoespecífica a un polipéptido de IL-9 humano con alta afinidad, donde la alta afinidad se caracteriza por:

(i) una constante de velocidad de asociación (kon) de al menos 105 M-1s-1; y una constante de velocidad de disociación (koff) de menos de 2 x 10-4s-1; o (ii) una constante de disociación (Kd) de menos de 10-9 M donde la alta afinidad se mide por Biacore.

Anticuerpos de IL-9 recombinantes y usos de los mismos

1. CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención proporciona anticuerpos que se unen de forma inmunoespecífica A un polipéptido IL-9 y composiciones que comprenden dichos anticuerpos. La invención también proporciona protocolos terapéuticos y profilácticos para prevenir, tratar, controlar, y/o mejorar diversos trastornos o uno o más síntomas de los mismos, comprendiendo dichos protocolos la administración de anticuerpos que se unen de manera inmunoespecífica a un polipéptido IL-9 exclusivamente o en combinación con otras terapias. En particular, la presente invención proporciona métodos para prevenir, tratar, controlar, y/o mejorar síntomas asociados a un trastorno inflamatorio (p.ej., el asma) o una infección respiratoria, comprendiendo dichos métodos la administración a un sujeto humano de una cantidad efectiva de uno o más anticuerpos del mismo que se unen de forma inmunoespecífica a un polipéptido IL-9. La presente invención proporciona también composiciones farmacéuticas que comprenden anticuerpos o fragmentos de los mismos que se unen de forma inmunoespecífica a un polipéptido de IL-9 para la prevención, tratamiento, control, y/o mejora de diversos trastornos. La invención proporciona además métodos para detectar o diagnosticar la expresión de IL-9 o trastornos asociados con una expresión de IL-9 aberrante utilizando composiciones que comprenden anticuerpos o fragmentos de los mismos que se unen de manera inmunoespecífica a un polipéptido IL-9. La presente invención hacer referencia además a artículos de fabricación y kits que comprenden anticuerpos que se unen de forma inmunoespecífica a un polipéptido IL-9 para su uso en la prevención, control, tratamiento, y/o mejora de diversos trastornos.

2. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

2.1 TRASTORNOS AUTOINMUNES

Los trastornos autoinmunes se causan cuando el sistema inmunitario del cuerpo, que debe defender el cuerpo frente a bacterias, virus, y cualquier otro producto extraño, falla y produce anticuerpos contra tejido, células y órganos sanos. Los anticuerpos, las células T y los macrófagos proporcionan una protección beneficiosa, pero también pueden producir respuestas inmunológicas perjudiciales o mortales.

Los mecanismos principales por los que los autoanticuerpos pueden producir una enfermedad autoinmune son la destrucción lítica dependiente del complemento de la célula diana, opsonización, formación de inmunocomplejos, bloqueo de sitios receptores para ligandos fisiológicos, y estimulación de los receptores de la superficie celular. El autoanticuerpo puede unirse a los receptores de la superficie celular y bien inhibir o estimular la función especializada de la célula (Paul, W. E. Ed., 1989, Fundamental Immunology, Raven Press, New York, Chapter31, p. 839) .

Las enfermedades autoinmunes pueden ser específicas de un órgano o sistémicas y son provocadas por diferentes mecanismos patogénicos. La autoinmunización específica de un órgano se caracteriza por la tolerancia y supresión dentro del compartimento de células T, la expresión aberrante de antígenos del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) , mimetismo antigénico y variaciones alélicas en genes del MHC. Las enfermedades autoinmunes sistémicas incluyen la activación policlonal de células B y anomalías de las células T inmunorreguladoras, receptores de células T y genes del MHC. Los ejemplos de enfermedades autoinmunes específicas de un órgano son la diabetes, enfermedad de Hashimoto, insuficiencia suprarrenal autoinmune, aplasia eritrocitaria pura, esclerosis múltiple y carditis reumatoide. Las enfermedades autoinmunes sistémicas representativas son el lupus eritematoso sistémico, artritis reumatoide, inflamación crónica, dermatomiositis, esclerodermia y polimiositis asociada al síndrome de Sjogren.

El tratamiento actual de las enfermedades autoinmunes implica la administración de agentes inmunosupresores como cortisona, derivados de la aspirina, hidroxicloroquina, metotrexato, azatioprina y ciclofosfamida y combinaciones de los mismos. Sin embargo, el dilema al que nos enfrentamos cuando se administran agentes inmunosupresores es que cuanto más eficazmente se trata la enfermedad autoinmune, más indefenso queda el paciente al ataque de infecciones. Por ello, existe la necesidad de un tratamiento eficaz contra las enfermedades autoinmunes que no ponga en peligro el sistema inmunitario del paciente.

2.2 TRASTORNOS INFLAMATORIOS

La inflamación juega un papel fundamental en las defensas del huésped y la progresión de las enfermedades inmunomediadas. La respuesta inflamatoria se inicia por una lesión del tejido (p.ej., traumatismo, isquemia, y partículas extrañas) e infección por una compleja cascada de eventos, incluyendo mediadores químicos (p.ej., citocinas y postaglandinas) y células inflamatorias (p.ej., leucocitos) . La respuesta inflamatoria se caracteriza por un flujo sanguíneo aumentado, permeabilidad capilar aumentada, e influjo de células fagocíticas. Estos eventos provocan hinchazón, enrojecimiento, calor, y formación de pus en el lugar de la lesión o infección.

Una delicada interacción equilibrada entre los elementos inmunes celulares y humorales en la respuesta inflamatoria permite la eliminación de los agentes perjudiciales y el inicio de la reparación del tejido dañado. Cuando esta interacción delicadamente equilibrada se altera, la respuesta inflamatoria puede tener como resultado un daño considerable del tejido normal y puede ser más perjudicial que la lesión o infección original que provocó la reacción inflamatoria inicial. En estos casos de respuestas inflamatorias descontroladas es necesaria la intervención clínica para evitar el daño de los tejidos y la disfunción de órganos. Las enfermedades y trastornos como la artritis reumatoide, osteoartritis, enfermedad de Crohn, psoriasis, enfermedad intestinal inflamatoria, asma, y alergias se caracterizan por la inflamación.

Las terapias actuales para trastornos inflamatorios incluyen medicamentos sintomáticos y agentes inmunosupresores para controlar los síntomas. Por ejemplo, medicamentos antiinflamatorios no esteroideos (AINEs

o NSAIDs, por sus siglas en inglés) como la aspirina, ibuprofeno, fenoprofeno, naproxeno, tolmetina, sulindac, meclofenamato sódico, piroxicam, flurbiprofeno, diclofenaco, oxaprozina, nabumetona, etodolac, y ketoprofeno que tienen efectos analgésicos y antiinflamatorios se utilizan para tratar los trastornos inflamatorios. Sin embargo, se cree que los AINEs no son capaces de alterar la evolución de la enfermedad, (Tierney et al. (eds.) , Current Medical Diagnosis & Treatment, 37 ed., Appleton & Lange (1998) , p793) . Además, los AINEs causan con frecuencia efectos secundarios gastrointestinales, afectan al tracto intestinal inferior provocando perforación o agravando la enfermedad inflamatoria intestinal, producen toxicidad renal y prolongan el tiempo de hemorragia. Los corticosteroides son otra clase de fármacos que se utilizan comúnmente para controlar los síntomas inflamatorios. Los corticosteroides, al igual que los AINEs, no alteran la evolución natural de la enfermedad, y de ese modo, las manifestaciones clínicas de la enfermedad activa reaparecen de forma común cuando se interrumpe la administración del medicamento. El grave problema de las reacciones negativas resultantes de la terapia de corticosteroides prolongada (p.ej., osteoporosis, aumento del riesgo de infección, aumento del apetito, hipertensión, edema, úlcera péptica, y psicosis) limita enormemente su uso prolongado.

También se utilizan comúnmente pequeñas dosis de agentes inmunosupresores, como los agentes citotóxicos, para el tratamiento de trastornos inflamatorios. Por ejemplo, el metotrexato, un antagonista del ácido fólico, se utiliza a menudo en el tratamiento de la psoriasis, artritis reumatoide y otras enfermedades inflamatorias. El metotrexato, como otros agentes citotóxicos, provoca con frecuencia estomatitis, eritema, alopecia, náuseas, vómitos, diarrea, y daño a los órganos principales como el riñón y el hígado. El uso prolongado de agentes inmunosupresores normalmente deja al paciente sin defensas frente a las infecciones.

Se buscan constantemente nuevas terapias para los trastornos inflamatorios. En particular, se busca constantemente cualquier nuevo tratamiento que reduzca la dosis y/o frecuencia de administración de agentes que se utilizan actualmente, o que sea capaz de aumentar la eficacia de un tratamiento utilizado en la actualidad.... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo de IL-9 que comprende:

(a) una región de determinación de complementariedad (CDR) 1 del dominio variable pesado (VH) que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en la SEQ ID NO:26; y una VH CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:2; y una VH CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:3; y una VL CDR 1 que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:62; y una VL CDR2 que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:65; y una VL CDR3 que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:20; o

(b) un dominio VH que comprende una secuencia de aminoácidos idéntica en al menos un 90% a la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:27; y un dominio VL que comprende una secuencia de aminoácidos que es idéntica en al menos un 90% a la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:28;

donde el anticuerpo se une de forma inmunoespecífica a un polipéptido de IL-9 humano con alta afinidad, donde la alta afinidad se caracteriza por:

(i) una constante de velocidad de asociación (kon) de al menos 105 M-1s-1; y una constante de velocidad de disociación (koff) de menos de 2 x 10-4s-1; o (ii) una constante de disociación (Kd) de menos de 10-9 M

donde la alta afinidad se mide por Biacore.

2. El anticuerpo de IL-9 según la reivindicación 1 que comprende:

un VH que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 27 y un dominio VL que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO:28.

3. El anticuerpo de IL-9 de cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, en el que el anticuerpo es un anticuerpo humano o humanizado.

4. El anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 3, en el que el anticuerpo se conjuga a un marcador o un agente terapéutico.

5. Una composición farmacéutica que comrpende el anticuerpo de IL-9 de cualquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 4, y un portador farmacéuticamente aceptable.

6. El uso de una cantidad profiláctica o terapéuticamente efectiva del anticuerpo de IL-9 de cualquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 4 para la fabricación de un medicamento para prevenir, tratar y/o mejorar un trastorno inflamatorio, estando adaptado dicho medicamento para su administración a un sujeto que lo necesite.

7. El uso de la reivindicación 6, en el que el trastorno inflamatorio es asma, una alergia o artritis.

8. El uso de la reivindicación 6 comprendiendo además una dosis de una cantidad profiláctica o terapéuticamente efectiva de uno o más agentes profilácticos o terapéuticos distintos del anticuerpo de IL

9.

9. El uso de la reivindicación 8, en el que al menos uno de los agentes profilácticos o terapéuticos es un agente antiangiogénico, un antagonista de TNF-α, un agente inmunomodulador o un agente antiinflamatorio.

10. El uso de la reivindicación 9, en el que el agente antiangiogénico es un antagonista de la integrina alfav beta3.

11. El uso de la reivindicación 9, en el que el agente inmunomodulador es siplizumab o un anticuerpo anti-Epha2.

12. El uso de la reivindicación 6, en el que el anticuerpo de IL-9 está adaptado para su administración parenteral, intranasal u oral.

13. Un método in vitro de diagnóstico, pronóstico o vigilancia de un trastorno o enfermedad caracterizado por la expresión y/o actividad aberrante de un polipéptido de IL-9 o la expresión y/o actividad aberrante de un IL-9R que comprende:

el análisis del nivel de IL-9 en las células o en una muestra de tejido de un sujeto usando el anticuerpo de IL-9 de cualquiera de las reivindicaciones 1-4; y comparar el nivel analizado de IL-9 con una muestra biológica normal, por la cual un aumento o disminución en el nivel analizado de IL-9 en comparación con la muestra biológica normal de IL-9 es indicativo de dicho trastorno o enfermedad.

14. Un kit que comprende el anticuerpo de cualquiera de las reivindicaciones 1-4 e instrucciones para el uso, en uno o más recipientes.

15. Un artículo de fabricación que comprende un material de envasado y un agente farmacéutico contenido en dicho material de envasado, en el que dicho agente farmacéutico comprende el anticuerpo de IL-9 de cualquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 4 y un portador farmacéuticamente aceptable.

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