Uso de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3,

o de una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 4-5, en la fabricación de medicamento para tratar o disminuir la gravedad de una enfermedad o afección seleccionada de trastornos alérgicos, trastornos proliferativos, trastornos autoinmunes, afecciones asociadas con el trasplante de órganos, trastornos inflamatorios, trastornos mediados inmunológicamente o trastornos óseos destructivos; cáncer, enfermedad de Alzheimer, reestenosis, angiogénesis, glomerulonefritis, citomegalovirus, VIH, herpes, psoriasis, aterosclerosis, alopecia, una enfermedad autoinmune, una infección vírica, un trastorno neurodegenerativo, un trastorno asociado con la apoptosis de timocitos o un trastorno proliferativo; trastornos hematopoyéticos, en particular, leucemia mielógena aguda (LMA), leucemia promielocítica aguda (LPA) y leucemia linfocítica aguda (LLA); respuestas inmunes tales como reacciones alérgicas o de hipersensibilidad tipo I, asma, enfermedades autoinmunes tales como rechazo de trasplantes, enfermedad de injerto contra huésped, artritis reumatoide, esclerosis lateral amiotrófica y esclerosis múltiple, trastornos neurodegenerativos tales como esclerosis lateral amiotrófica familiar (ELAF), así como en tumores malignos sólidos y hematológicos tales como leucemias y linfomas; cáncer pancreático, de próstata o de ovario

CAMPO TÉCNICO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a inhibidores de proteínas quinasas. La invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos de la invención y el uso de las composiciones en la fabricación de un medicamento para tratar diversos trastornos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

A la búsqueda de nuevos agentes terapéuticos se ha contribuido enormemente en los últimos años por un mejor entendimiento de la estructura de enzimas y otras biomoléculas asociadas con enfermedades. Una clase importante de enzimas que han sido objeto de un estudio exhaustivo son las proteínas quinasas.

Las proteínas quinasas constituyen una gran familia de enzimas estructuralmente relacionadas que son responsables del control de una diversidad de procesos de transducción de señales dentro de la célula. (Véase Hardie, G. y Hanks, S. The Protein Kinase Facts Book, I y II, Academic Press, San Diego, CA: 1995). Se cree que las proteínas quinasas han evolucionado a partir de un gen ancestral común debido a la conservación de su estructura y función catalítica. Casi todas las quinasas contienen un dominio catalítico de 250-300 aminoácidos similar. Las quinasas pueden clasificarse en familias por los sustratos que fosforilan (por ejemplo, proteína-tirosina, proteína-serina/treonina, lípidos, etc.). Se han identificado motivos de secuencia que generalmente corresponden a cada una de estas familias de quinasas (Véase, por ejemplo, Hanks, S. K., Hunter, T., FASEB J. 1995, 9, 576-596; Knighton y col., Science 1991, 253, 407-414; Hiles y col., Cell 1992, 70, 419-429; Kunz y col., Cell 1993, 73, 585-596; Garcia-Bustos y col., EMBO J. 1994, 13, 2352-2361).

En general, las proteínas quinasas median la señalización intracelular efectuando una transferencia de fosforilo de un nucleósido trifosfato a un aceptor proteico que está implicado en una ruta de señalización. Estos acontecimientos de fosforilación actúan como interruptores de encendido/apagado moleculares que pueden modular o regular la función biológica de la proteína diana. Estos acontecimientos de fosforilación se desencadenan en última instancia en respuesta a una diversidad de estímulos extracelulares y de otro tipo. Los ejemplos de dichos estímulos incluyen señales de agresiones ambientales y químicas (por ejemplo, choque osmótico, choque térmico, radiación ultravioleta, endotoxina bacteriana y H2O2), citocinas (por ejemplo, interleucina-1 (IL-1) y factor de necrosis tumoral α (TNF-α)) y factores de crecimiento (por ejemplo, factor estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos (GM-CSF) y factor de crecimiento de fibroblastos (FGF)). Un estímulo extracelular puede afectar a una o más respuestas celulares relacionadas con el crecimiento celular, migración, diferenciación, secreción de hormonas, activación de factores de transcripción, contracción muscular, metabolismo de la glucosa, control de la síntesis proteica y regulación del ciclo celular.

Muchas enfermedades están asociadas con respuestas celulares anormales desencadenadas por acontecimientos mediados por proteínas quinasas, como se han descrito anteriormente. Estas enfermedades incluyen, pero sin limitación, enfermedades autoinmunes, enfermedades inflamatorias, enfermedades óseas, enfermedades metabólicas, enfermedades neurológicas y neurodegenerativas, cáncer, enfermedades cardiovasculares, alergias y asma, enfermedad de Alzheimer y enfermedades relacionadas con hormonas. Por consiguiente, se ha realizado un esfuerzo sustancial en la química médica para encontrar inhibidores de proteínas quinasas que sean eficaces como agentes terapéuticos.

Una familia de tirosina quinasas receptoras de tipo III, incluyendo Flt3, c-Kit, receptor de PDGF y c-Fms, desempeña un papel importante en el mantenimiento, crecimiento y desarrollo de células hematopoyéticas y no hematopoyéticas. [Scheijen, B, Griffin JD, Oncogene, 2002, 21, 3314-3333 y Reilly, JT, British Journal of Haematology, 2002, 116, 744-757]. FLT-3 y c-Kit regulan el mantenimiento de conjuntos de células madre/progenitores tempranos, así como el desarrollo de células linfoides y mieloides maduras [Lyman, S, Jacobsen, S, Blood, 1998, 91, 1101-1134]. Ambos receptores contienen un dominio quinasa intrínseco que se activa tras la dimerización mediada por ligando de los receptores. Tras la activación, el dominio quinasa induce la autofosforilación del receptor, así como la fosforilación de diversas proteínas citoplasmáticas que ayudan a propagar la señal de activación que conduce al crecimiento, la diferenciación y la supervivencia. Algunos de los reguladores aguas abajo de la señalización de receptores de FLT-3 y c-Kit incluyen PLCγ, PI3-quinasa, Grb-2, SHIP y quinasas relacionadas con Src [Scheijen, B, Griffin JD, Oncogene, 2002, 21, 3314-3333]. Se ha demostrado que ambas tirosina quinasas receptoras desempeñan un papel en una diversidad de tumores malignos hematopoyéticos y no hematopoyéticos. Las mutaciones que inducen la activación independiente de ligando de FLT-3 y c-Kit se han implicado en la leucemia mielógena aguda (LMA), leucemia linfocítica aguda (LLA), mastocitosis y tumor del estroma gastrointestinal (TEGI). Estas mutaciones incluyen cambios de un solo aminoácido en el domino quinasa o duplicaciones en tándem internas, mutaciones puntuales o deleciones en fase de lectura de la región yuxtamembrana de los receptores. Además de mutaciones activantes, la estimulación dependiente de ligando (autocrina o paracrina) de FLT-3 o c-Kit de tipo silvestre sobreexpresadas puede contribuir al fenotipo maligno [Scheijen, B, Griffin JD, Oncogene, 2002, 21, 3314-3333].

c-fms codifica el receptor del factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF-1R) que se expresa predominantemente en el linaje de monocitos/macrófagos [Dai, XM y col.,

Blood, 2002, 99, 111-120]. El MCSF-1R y su ligando regulan el crecimiento y la diferenciación del linaje de macrófagos. Como los otros miembros de la familia, el MCSF-1R contiene un dominio quinasa intrínseco que se activa tras la dimerización inducida por ligando del receptor. El MCSF-1R también se expresa en células no hematopoyéticas incluyendo células epiteliales de glándula mamaria y neuronas. Las mutaciones en este receptor están potencialmente ligadas a leucemias mieloides, y su expresión está correlacionada con carcinomas de mama, ovario y endometrio metastásicos [Reilly, JT, British Journal of Haematology, 2002, 116, 744757 y Kacinski, BM, Mol. Reprod y Devel., 1997, 46, 71-74]. Otra indicación posible para antagonistas de MCSF-1R es la osteoporosis [Teitelbaum, S, Science 2000, 289, 1504-1508,

El receptor de PDGF (PDGFR) tiene dos subunidades PDGFR-α y PDGFR-β, que pueden formar homo-o heterodímeros tras la unión del ligando. Existen varios ligandos de PDGF: AB, BB, CC y DD. El PDGFR se expresa en células madre tempranas, mastocitos, células mieloides, células mesenquimatosas y células musculares lisas [Scheijen, B, Griffin JD, Oncogene, 2002, 21, 3314-3333]. Sólo el PDGFR-β se ha implicado en leucemias mieloides — habitualmente como un compañero de translocación con Tel, proteína de interacción con huntingtina (HIP1) o Rabaptina 5. Recientemente se demostró que existen mutaciones de activación en el dominio quinasa de PDGFR-α en tumores del estroma gastrointestinal (TEGI) [Heinrich, MC y col., Sciencexpress, 2003].

Son quinasas dependientes de ciclina (CDK) serina/treonina proteínas quinasas que consisten en un lóbulo amino-terminal rico en lámina β y un lóbulo carboxi-terminal más grande que es en gran medida α-helicoidal. Las CDK presentan los 11 subdominios compartidos por todas las proteínas quinasas y varían en masa molécula de 33 a 44 kD. Esta familia de quinasas, que incluye a CDK1, CKD2, CDK4, y CDK6, requieren la fosforilación en el resto correspondiente al Thr160 de CDK2 para ser totalmente activas [Meijer, L., Drug Resistance Updates 2000, 3, 83-88].

Cada complejo de CDK se forma a partir de una subunidad de ciclina reguladora (por ejemplo, ciclina A, B1, B2, D1, D2, D3 y E) y una subunidad quinasa catalítica (por ejemplo, CDK1, CDK2, CDK4, CDK5 y CDK6). Cada pareja de quinasa/ciclina diferente funciona regulando las fases diferentes y específicas del ciclo celular conocidas como fases G1, S, G2 y M [Nigg, E., Nature Reviews 2001, 2, 21-32; Flatt, P., Pietenpol, J., Drug Metabolism Reviews 2000, 32, 283-305].

Las CDK se han implicado en trastornos de la proliferación celular, particularmente en el cáncer. La proliferación...

1. Un compuesto de fórmula (II):

**(Ver fórmula)**

5 en la que X es N; Y es NR°u O; n es 0; m es 0; p es 0; R1 es -N(H)R2; R2 es hidrógeno; R3 es 2-piridilo; R5 es hidrógeno o -CN; en la que cada aparición independiente de R° se selecciona entre hidrógeno, alifático C1-6 opcionalmente sustituido, un anillo heteroarilo o heterocíclico de 5-6 miembros, sin sustituir (con la condición de que un átomo de nitrógeno en el anillo heterocíclico esté opcionalmente sustituido con -R+ o -C(O)R+, en los que R+ es (alquilo C1-6), preferentemente (alquilo C1-4), fenilo, -O(Ph) o -CH2(Ph), o, no obstante de la definición anterior, dos apariciones independientes de R°, en el mismo sustituyente o en sustituyentes diferentes, tomados junto con el átomo o átomos a los que está unido cada grupo R°, forman un anillo heterociclilo, arilo

o heteroarilo de 5-8 miembros o un anillo cicloalquilo de 3-8 miembros que tiene 0-3 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre; en la que cada aparición independiente de R° se selecciona entre hidrógeno, alifático C1-6 opcionalmente sustituido, un anillo heteroarilo o heterocíclico de 5-6 miembros, sin sustituir, fenilo, -O(Ph) o -CH2(Ph), o, no obstante de la definición anterior, dos apariciones independientes de R°, en el mismo sustituyente o en sustituyentes diferentes, tomados junto con el átomo o átomos a los que está unido cada grupo R°, forman un anillo heterociclilo, arilo

o heteroarilo de 5-8 miembros o un anillo cicloalquilo de 3-8 miembros que tiene 0-3 30 heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno o azufre; el grupo alifático de R° está opcionalmente sustituido con NH2, NH(alifático C1-4), N(alifático C1-4)2, halógeno, alifático C1-4, OH, O(alifático C1-4), NO2, CN, CO(2H, CO2(alifático C1-4), O(haloalifático C1-4) o halo(alifático C1-4), en los que cada uno de los grupos alifáticos C1-4 anteriores está sin sustituir; cada R* se selecciona independientemente entre hidrógeno o un alifático C1-6 opcionalmente sustituido con NH2, NH(alifático C1-4), N(alifático C1-4)2, halógeno, alifático C1-4, OH, O(alifático C1-4), NO2, CN, CO2H, CO2(alifático C1-4), O(haloalifático C1-4) o halo(alifático C1-4), en los que cada uno de los grupos alifáticos C1-4 anteriores está sin sustituir; y R es hidrógeno o un grupo alifático C1-6, opcionalmente sustituido con =O, =S, -NH2, NH(alifático C1-4), N(alifático C1-4)2, halógeno, alifático C1-4, OH, O(alifático C1-4), NO2, CN, CO2H, CO2(alifático C1-4), O(haloalifático C1-4) o halo(alifático C1-4), en los que cada uno de los grupos alifáticos C1-4 anteriores está sin sustituir.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la fórmula (I-b) o (I-c):

**(Ver fórmula)**

en las que dicho compuesto se selecciona entre el grupo que consiste en:

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, seleccionándose dicho compuesto entre el grupo que consiste en:

4. Una composición farmacéutica que comprende:

un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo, adyuvante o excipiente farmacéuticamente aceptable.

5. La composición de la reivindicación 4, que comprende además un agente terapéutico adicional seleccionado de un agente quimioterápico o antiproliferativo, un tratamiento para la Enfermedad de Alzheimer, un tratamiento para la Enfermedad de Parkinson, un agente para tratar la esclerosis múltiple (EM), un tratamiento para el asma, un agente para tratar la esquizofrenia, un agente antiinflamatorio, un agente inmunomodulador o inmunosupresor, un factor neurotrófico, un agente para tratar una enfermedad cardiovascular, un agente para tratar trastornos óseos destructivos, un agente para tratar una enfermedad hepática, un agente para tratar una trastorno sanguíneo o un agente para tratar un trastorno de inmunodeficiencia.

6. Un procedimiento in vitro de inhibición de la actividad quinasa de FLT-3 en una muestra

**(Ver fórmula)**

biológica, que comprende la etapa de poner en contacto dicha muestra biológica con:

a) una composición de acuerdo con la reivindicación 4; o

b) un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, o una sal

farmacéuticamente aceptable del mismo.

7. Una composición de acuerdo con la reivindicación 4, o un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en la inhibición de la actividad quinasa de FLT-3 en un paciente.

8. Una composición de acuerdo con la reivindicación 4; o un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, para su uso en el tratamiento o disminución de la gravedad de una enfermedad o afección seleccionada de trastornos alérgicos, trastornos proliferativos, trastornos autoinmunes, afecciones asociadas con el trasplante de órganos, trastornos inflamatorios, trastornos mediados inmunológicamente o trastornos óseos destructivos.

9. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, o una composición de acuerdo con la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 8, para su uso de forma concurrente con, antes de o posteriormente a un agente terapéutico adicional seleccionado de un agente quimioterápico o antiproliferativo, un tratamiento para la Enfermedad de Alzheimer, un tratamiento para la Enfermedad de Parkinson, un agente para

tratar la esclerosis múltiple (EM), un tratamiento para el asma, un agente para tratar la esquizofrenia, un agente antiinflamatorio, un agente inmunomodulador o inmunosupresor, un factor neurotrófico, un agente para tratar una enfermedad cardiovascular, un agente para tratar trastornos óseos destructivos, un agente para tratar una enfermedad hepática, un agente para tratar una trastorno sanguíneo o un agente para tratar un trastorno de inmunodeficiencia.

10. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, o una composición de acuerdo con la reivindicación 4, para su uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que la enfermedad se selecciona de cáncer, enfermedad de Alzheimer, reestenosis, angiogénesis, glomerulonefritis, citomegalovirus, VIH, herpes, psoriasis, aterosclerosis, alopecia, una enfermedad autoinmune, una infección vírica, un trastorno neurodegenerativo, un trastorno asociado con la apoptosis de timocitos o un trastorno proliferativo; trastornos hematopoyéticos, en particular, leucemia mielógena aguda (LMA), leucemia promielocítica aguda (LPA) y leucemia linfocítica aguda (LLA); respuestas inmunes tales como reacciones alérgicas o de hipersensibilidad tipo I, asma, enfermedades autoinmunes tales como rechazo de trasplantes, enfermedad de injerto contra huésped, artritis reumatoide, esclerosis lateral amiotrófica y esclerosis múltiple, trastornos neurodegenerativos tales como esclerosis lateral amiotrófica familiar (ELAF), así como en tumores malignos sólidos y hematológicos tales como leucemias y linfomas; en el que el cáncer es cáncer pancreático, de próstata o de ovario.

11. Uso de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, o de una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 4-5, en la fabricación de medicamento para tratar o disminuir la gravedad de una enfermedad o afección seleccionada de trastornos alérgicos, trastornos proliferativos, trastornos autoinmunes, afecciones asociadas con el trasplante de órganos, trastornos inflamatorios, trastornos mediados inmunológicamente o trastornos óseos destructivos; cáncer, enfermedad de Alzheimer, reestenosis, angiogénesis, glomerulonefritis, citomegalovirus, VIH, herpes, psoriasis, aterosclerosis, alopecia, una enfermedad autoinmune, una infección vírica, un trastorno neurodegenerativo, un trastorno asociado con la apoptosis de timocitos o un trastorno proliferativo; trastornos hematopoyéticos, en particular, leucemia mielógena aguda (LMA), leucemia promielocítica aguda (LPA) y leucemia linfocítica aguda (LLA); respuestas inmunes tales como reacciones alérgicas o de hipersensibilidad tipo I, asma, enfermedades autoinmunes tales como rechazo de trasplantes, enfermedad de injerto contra

huésped, artritis reumatoide, esclerosis lateral amiotrófica y esclerosis múltiple, trastornos neurodegenerativos tales como esclerosis lateral amiotrófica familiar (ELAF), así como en tumores malignos sólidos y hematológicos tales como leucemias y linfomas; cáncer pancreático, de próstata o de ovario.