Un péptido enlazado a un anticuerpo o a una porción de un anticuerpo,

en donde el péptido es un fragmento de sRAGE que comprende los aminoácidos 1 -30 del dominio V de sRAGE de ocurrencia natural, y en donde la porción del anticuerpo es un fragmento Fab o un fragmento Fc

SITIO DE ENLAZAMIENTO DEL LIGANDO DE RAGE Y USOS DEL MISMO

Esta solicitud reivindica la prioridad de la solicitud estadounidense con serial No. 08/948.131.

La invención divulgada aquí contó con el apoyo del gobierno a través de las Subvenciones del USPHS No. AG00690, AG00603, HL56881 del Department of Health and Human Services. Por lo tanto, el Gobierno de los Estados Unidos tiene ciertos derechos en esta invención. Antecedentes de la Invención

A través de esta solicitud, se referencian diferentes publicaciones por medio del autor y la fecha. Las citaciones completas de estas publicaciones pueden encontrarse enlistadas alfabéticamente al final de las especificaciones inmediatamente después de la sección de Procedimientos Experimentales y antes de la sección de las reivindicaciones. La divulgación de estas publicaciones representa el estado del arte tal como lo conocen aquellas personas calificadas en ella a partir de la fecha de la invención descrita y reivindicada allí.

La cardiopatía isquémica es la principal causa de morbilidad y de mortalidad en la población en general, pero especialmente en pacientes con diabetes. La prevalencia de la enfermedad de las arterias coronarias es tan alta como del 55% en pacientes adultos con diabetes (Robertson y Strong, 1968). En realidad, los datos del Estudio Framingham del Corazón demuestran que la mortalidad de la enfermedad cardiovascular en diabetes no dependiente de insulina (NIDDM) es más del doble en hombres diabéticos y más el cuádruple en mujeres diabéticas cuando se compara con individuos de control no diabéticos (Kannel y McGee, 1979). Además de una mayor prevalencia, los estudios han mostrado que la aterosclerosis en pacientes diabéticos es claramente más acelerada y extendida. En una serie de autopsias, por ejemplo, se encontró que los pacientes con diabetes se enfermaron más severamente de la arteria coronaria descendente anterior izquierda (Waller y colaboradores, 1980), una incidencia mayor de enfermedad en dos y tres vasos (Crall y Roberts, 1978), y un mayor carácter difuso de la distribución de las lesiones ateroscleróticas (Hamby y colaboradores, 1976). Estos hallazgos fueron confirmados por angiografía coronaria en pacientes sintomáticos (Pyorala y colaboradores, 1978).

Las razones para la aterosclerosis acelerada en el ámbito de la diabetes son numerosas. Sin embargo, incluso después de la corrección por dislipidemia, hipertensión y obesidad, los estudios de análisis de múltiples variables han indicado que los pacientes diabéticos tienen un mayor riesgo de enfermedad cardiovascular con relación a individuos no diabéticos (Kannel y McGee, 1979). Por ejemplo, en el Nurses' Health Study de 1.500 individuos diabéticos entre un total de 115.000 mujeres, la incidencia de enfermedad cardiovascular fue 5 veces mayor en los individuos diabéticos independientemente de sus niveles de colesterol (Manson y colaboradores, 1991). Estos datos sugieren que los factores específicos para la población diabética juegan un papel importante.

Las características patológicas de la enfermedad de Alzheimer (AD) son acumulaciones intracelulares y extracelulares de proteínas, cuyo progreso está estrechamente relacionado con una eventual disfunción neuronal y demencia clínica (para comentarios ver Goedert, 1993; Haass y colaboradores, 1994; Kosik, 1994; Trojanowski y colaboradores, 1994; Wischik, 1989). El péptido β amiloide (Aβ), que es un componente principal de depósitos extracelulares en AD, tanto en placas seniles/difusas como en la vasculatura cerebral, influye activamente sobre las funciones cerebrales como lo indican varias líneas de evidencia: El Aβ ha demostrado que promueve el crecimiento de las neuritas, genera intermediaros reactivos de oxígeno (ROI), induce estrés oxidativo celular, conduce a citotoxicidad neuronal, y promueve activación microglial (Behl y colaboradores, 1994; Davis y colaboradores, 1992; Hensley, y colaboradores, 1994; Koh, y colaboradores, 1990; Koo y colaboradores, 1993; Loo y colaboradores, 1993; Meda y colaboradores, 1995; Pike y colaboradores, 1993; Yankner y colaboradores, 1990). Para que el Aβ induzca estos efectos celulares múltiples, las superficies de las células pueden contener una(s) proteína(s) de enlazamiento que acoplan al Aβ. En este contexto, diferentes proteínas asociadas a la célula, así como proteoglicanos sulfatados, pueden interactuar con Aβ. Estos incluyen: al receptor de la sustancia P, al receptor del complejo serpina enzima (SEC), apolipoproteína E, apolipoproteína J (clusterina), transtiretina, antiquimotripsina, proteína precursora β amiloide, y sulfonatos/sulfatos de heparina (Abraham y colaboradores. 1985; Fraser y colaboradores, 1992; Fraser y colaboradores, 1993; Ghisc y colaboradores, 1993; Joslin y colaboradores, 1991; Kimura y colaboradores, 1993; Kisilevsky y colaboradores, 1995; Strittmatter y colaboradores, 1993a; Strittmatter y colaboradores, 1993b; Schwarzman y colaboradores, 1994; Snow y colaboradores, 1994 ; Yankner y colaboradores, 1990). De estos, el receptor de la sustancia P y el receptor de SEC pueden actuar como receptores superficiales de células neuronales para el Aβ, aunque se carece de evidencia directa de esto (Fraser y colaboradores, 1993; Joslin y colaboradores, 1991; Kimura y colaboradores, 1993; Yankner y colaboradores, 1990). En realidad, el papel de los receptores de sustancia es controversial, y no se sabe si Aβ interactúa únicamente con el receptor, o si se requieren también coestimuladores (Calligaro y colaboradores, 1993; Kimura y colaboradores, 1993; Mitsuhashi y colaboradores, 1991) y el receptor de SEC no ha sido caracterizado completamente aún. El péptido β amiloide (Aβ) es central para la patología de la enfermedad de Alzheimer (AD), especialmente debido a sus efectos neurotóxicos que involucran la inducción de estrés oxidativo celular.

Resumen de la Invención

La presente invención proporciona un péptido enlazado a un anticuerpo o una porción de un anticuerpo, en donde el péptido es un fragmento de sRAGE que contiene 1 -30 aminoácidos del dominio V de sRAGE de ocurrencia natural, y en done la porción del anticuerpo es un fragmento Fab

o un fragmento Fc. La invención también proporciona una composición farmacéutica que contiene dicho péptido. La invención también está dirigida a dicho péptido para inhibir una interacción entre péptido β amiloide y un receptor para los productos finales de glicación avanzada sobre la superficie de una célula en un individuo, y también para inhibir (a) la degeneración de una neuronal; (b) la formación de una fibrilla de péptido β amiloide sobre una célula; (c) la formación extracelular de un péptido amiloide en una fibrilla; (d) para inhibir la reunión de péptido β amiloide sobre la superficie de una célula; (e) la infiltración de una célula microglial en placas seniles; (f) la activación de una célula microglial por un péptido β amiloide; o (g) activación de un gen NF-κB en una célula, en un individuo. La invención también prevé dicho péptido para el tratamiento de un individuo con una condición enfermiza asociada con una interacción entre péptido β amiloide y un receptor para un producto final de glicación avanzada sobre la superficie de una célula en un individuo, en donde la condición enfermiza es diabetes, enfermedad de Alzheimer, senilidad, falla renal, aterosclerosis hiperlipidémica, citotoxicidad neuronal, síndrome de Down, demencia asociada con un traumatismo craneal, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, amiloidosis, una enfermedad autoinmune, inflamación, un tumor, cáncer, impotencia masculina, cicatrización de heridas, enfermedad periodontal, neuropatía, retinopatía, nefropatía o degeneración neuronal.

La presente descripción divulga un péptido aislado que tiene una secuencia de aminoácidos correspondiente a la secuencia de aminoácidos de un dominio V de un receptor para un producto final de glicación avanzada (RAGE). La presente descripción también divulga un péptido aislado que tiene una secuencia de aminoácidos A-Q-N-I-TA-R-I-G-E-P-L-V-L-K-C-K-G-A-P-K-K-P-P-Q-R-L-E-WK (Seq. I.D. No. 1). La presente descripción divulga una composición farmacéutica que contiene una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido aislado que tiene una secuencia de aminoácidos correspondiente a la secuencia de aminoácidos de un dominio V del RAGE y un portador farmacéuticamente aceptable. La presente descripción también divulga un método para inhibir la interacción...

1. Un péptido enlazado a un anticuerpo o a una porción de un anticuerpo, en donde el péptido es un fragmento de sRAGE que comprende los aminoácidos 1 -30 del dominio V de sRAGE de ocurrencia natural, y en donde la porción del anticuerpo es un fragmento Fab o un fragmento Fc.

2. El péptido enlazado a un anticuerpo o a una porción de un anticuerpo de acuerdo a la reivindicación 1, en donde el péptido comprende un dominio “V” de sRAGE de ocurrencia natural.

3. El péptido enlazado a un anticuerpo o a una porción de un anticuerpo de acuerdo a la reivindicación 1, en donde el sRAGE es un sRAGE humano, de ratón, de rata o de bovino.

4. El péptido de la reivindicación 1, en donde el péptido está enlazado a un anticuerpo.

5. El péptido de la reivindicación 1, en donde el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal.

6. El péptido de la reivindicación 1, en donde la porción del anticuerpo es un fragmento Fab.

7. El péptido de la reivindicación 1, en donde la porción del anticuerpo es un fragmento Fc.

8. Una composición farmacéutica que contiene el péptido de cualquiera de las reivindicaciones 1 -7 y un portador farmacéuticamente aceptable.

9. La composición farmacéutica de la reivindicación 8, en donde el portador es un diluyente, un aerosol, un portador tópico, una solución acuosa, una solución no acuosa, un polímero o un portador sólido.

10. La composición farmacéutica de la reivindicación 9, en donde el portador es una solución acuosa.

11. El péptido de cualquiera de las reivindicaciones 1 -7 para inhibir una interacción entre el péptido beta amiloide y un receptor el producto final de glicación avanzada sobre la superficie de una célula en un individuo.

12. El péptido de la reivindicación 11 para inhibir dicha interacción, en donde la célula es una célula neuronal, una célula endotelial, una célula glial, una célula microglial, una célula de músculo liso, una célula somática, una célula de médula ósea, una célula de hígado, una célula intestinal, una célula germinal, un miocito, un fagocito mononuclear, una célula tumoral, una linfocito, una célula mesangial, una célula epitelial de la retina, una célula vascular de la retina, una célula ganglionar o una célula madre.

13. El péptido de la reivindicación 11 para inhibir dicha interacción, en donde la célula es una célula normal, una célula activada, una célula neoplásica, una célula enferma, o una célula infectada.

14. El péptido de cualquiera de las reivindicaciones 1 -7 para inhibir:

(a) la degeneración de una célula neuronal;

(b) la formación de una fibrilla de péptido beta amiloide sobre una célula:

(c) la disposición extracelular de un péptido beta amiloide en una fibrilla;

(d) la agregación de péptido beta amiloide sobre la superficie de una célula;

(e) la infiltración de una célula microglial en placas seniles;

(f) la activación de una célula microglial por medio de un péptido beta amiloide; o

(g) la activación de u gen NF-κB en una célula en un individuo.

15. El péptido de cualquiera de las reivindicaciones 1 -7 para tratar un individuo con una condición enfermiza asociada con una interacción entre péptido beta amiloide y un receptor para un producto final de glicación avanzada sobre la superficie de una célula en un individuo, en donde la condición enfermiza es diabetes, enfermedad de Alzheimer, senilidad,

falla renal, aterosclerosis hiperlipidémica, citotoxicidad neuronal, síndrome de Down, demencia asociada con un traumatismo craneal, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple, amiloidosis, una enfermedad autoinmune, inflamación, un tumor, cáncer, impotencia masculina, cicatrización de heridas, enfermedad periodontal, neuropatía, retinopatía, nefropatía o degeneración neuronal.

16. El péptido de la reivindicación 15, en donde la condición enfermiza está asociada con degeneración de una célula neuronal.

17. El péptido de la reivindicación 15, en donde la condición enfermiza está asociada con la activación de una célula microglial por medio de un péptido beta amiloide.