Compuesto de fórmula (I) **Fórmula**

Antecedentes de la invención

El óxido nítrico (NO) es una molécula altamente reactiva implicada en numerosos procesos fisiológicos y patológicos. El papel del NO en la vasodilatación, neurotransmisión e inmunidad es complejo en muchos aspectos (Tarr 2006). Esta molécula se conoce también como el principal protagonista en respuestas inmunitarias antitumorales no especificas (Roshni 2003). Sin embargo, estudios recientes muestran que la interacción con células cancerosas es más compleja de lo que se creía que era antes. El NO puede inhibir, pero también promover, metástasis y expansión tumorales (Tarr 2006, Lechner 2005). El desenlace de las interacciones tumor-NO depende de la fuente de NO, el tipo de célula expuesta, la localización del NO dentro de la célula, la duración de la exposición a NO y la presencia de otras especies de radicales libres con las cuales el NO puede interaccionar (Tarr 2006). En general, el NO producido por las células NK y los macrófagos del huésped media la respuesta antitumoral (Roshni 2003). Por el contrario, se atribuye el papel protumorigénico del NO al potencial intrínseco de las células tumorales para generar esta molécula y por consiguiente autorregular su propio crecimiento (Lechner 2005). El NO influye directamente en el crecimiento de células tumorales a través de la donación de electrones y la reacción con metales de transición tales como hierro, zinc y cobre y por tanto modifica la actividad del factor transcripcional y enzimática. A través de la generación de nuevos radicales, el NO media indirectamente la destrucción adicional de componentes celulares (Li 2005, Tarr 2006, Lechner 2005).

Varios agentes antitumorales activos están disponibles actualmente; sin embargo, el diseño de fármacos contra el cáncer todavía es un gran desafío para numerosos científicos. La búsqueda tiene como objetivo hallar sustancias con eficacia mejorada, efectos secundarios reducidos y vías de administración adecuadas. Un enfoque terapéutico novedoso de interés particular en la prevención y/o el tratamiento del cáncer está representado por fármacos antiinflamatorios no esteroideos donadores de NO (NO-AINE).

Los NO-AINE consisten en AINE a los que está unido de manera covalente un grupo donador de NO a través de un espaciador alifático o aromático (véase Rigas y Kashfi 2004). Aunque estos fármacos comparten algunas propiedades farmacológicas con sus compuestos originales, los datos actuales sugieren que su modificación estructural es responsable de la potencia aumentada y la toxicidad reducida (Keeble 2002).

Los NO-AINE son eficaces en la enfermedad de Alzheimer y en enfermedades cardiovasculares, reumatológicas y pulmonares(Del Soldato et al 1999). La combinación de la propiedad de inhibición de la ciclooxigenasa de los AINE con el potencial tumoricida del NO hace que estos fármacos sean un candidato perfecto para el tratamiento de enfermedades malignas (véase Rigas y Kashfi 2004).

Se ha demostrado que diferentes NO-AINE afectan al crecimiento de células cancerosas tanto in vitro como in vivo. Estos fármacos tienen un fuerte potencial proapoptótico y antiproliferativo frente a células cancerosas de vejiga humana, colon, próstata, pulmón, pancreáticas y de lengua y líneas celulares de leucemia (Kashfi et al 2003, Yeh 2004, Huguenin 2005, Huguenin 2004a, Huguenin 2004b, Gao 2005, Nath 2004, Spiegel 2005). Además, NO-aspirina y NO-indometacina son eficaces frente a la cancerogénesis gastrointestinal en ratas y ratones (Bak 1998, Williams 2004, Rao). La aspirina donadora de NO previno el cáncer pancreático en un modelo de tumor de hámster (Ouyang 2006). Los mecanismos exactos responsables de la acción de estos fármacos aún no se entienden por completo, pero se cree que las posibles dianas son NF-B, ciclooxigenasa y NO-sintasa inducible (Rigas rew 2004).

Recientemente se ha mostrado que un compuesto de isoxazolina, el ácido (S,R)-3-fenil-4,5-dihidro-5-isoxazolacético (VGX-1027) tiene fuertes propiedades inmunomoduladoras. VGX-1027 protege a los ratones frente a los efectos letales de LPS a través de la inhibición de la síntesis de TNF-a de los macrófagos y/o las células T (Stojanovic et al en impresión). Además, la administración de VGX-1027 a ratones NOD con formas aceleradas o espontáneas de diabetes o con diabetes inmunoinflamatoria inducida con múltiples dosis bajas de estreptozotocina, reduce significativamente la evolución de la diabetes (Stosic-Grujicic et al 2006).

El documento WO 2006/097273 da a conocer derivados del ácido 4,5-dihidro-3-fenil-5-isoxazol-acético para el tratamiento de enfermedades inmunoinflamatorias, cáncer, isquemia-reperfusión, hepatitis.

El documento WO 95/24398 da a conocer 3-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxifenil]-4,5-dihidro-N-hidroxi-5isoxazolacetamida para el tratamiento de enfermedades inflamatorias y SIDA.

Descripción de la invención

La presente invención se refiere a un compuesto de isoxazolina de fórmula (I) también denominado a continuación en el presente documento (GIT27-NO), que puede sintetizarse según el siguiente esquema.

**(Ver fórmula)**

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5 El compuesto (I) demostró ser eficaz como agente antiviral y antitumoral y en la prevención y el tratamiento de úlcera gástrica en modelos de animales. Por tanto, puede usarse para la preparación de composiciones farmacéuticas antivirales y antitumorales así como para composiciones diseñadas para tratar úlceras gastrointestinales, choque hemorrágico y daño de órganos asociado con isquemia-reperfusión que pueden prepararse con excipientes y/o vehículos y según procedimientos conocidos por los expertos en la técnica. Las composiciones farmacéuticas, composiciones parenterales, orales y tópicas, así como colirios para el tratamiento de infecciones virales del ojo.

El objeto de la presente invención es también un método para el tratamiento de patologías tumorales e infecciones virales que comprende la administración de una cantidad eficaz de compuesto (II); la dosis y el momento de 15 administración los determinará el médico según las necesidades del paciente.

que también puede liberar NO y ha demostrado ser eficaz como agente antiviral y antitumoral. 20 La invención se ilustrará ahora en mayor detalle en la siguiente sección experimental.

SECCIÓN EXPERIMENTAL QUÍMICA

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Se llevó a cabo esta reacción según el procedimiento dado a conocer en: Tetronic acids and derivatives; Part VI. A convenient synthesis of new 4-oxo-2-phenyl-2H-4,6-dihydrofuro[3,4-d]triazole and 4-oxo-4,6-dihydrofuro[3,4c]furazan systems. Parick Pollet, Suzanne Gelin. Synthesis 1979, 977-979.

Se añadió en porciones nitrito de sodio (6,9 g, 100 mmoles) a una disolución con agitación de ácido tetrónico (10 g, 100 mmoles) en HCl 3 M (60 ml). Se agitó la disolución de color púrpura durante 15 min. a temperatura ambiente y luego se añadió gota a gota a una disolución con agitación vigorosa de clorhidrato de hidroxilamina (13,9 g, 200 mmoles) en agua (150 ml). La coloración púrpura se desvaneció gradualmente a temperatura ambiente y precipitó

**(Ver fórmula)**

Se llevó a cabo esta reacción según el procedimiento dado a conocer en el documento DE4401150A1.

En una mezcla de 3,4-bis[hidroxilimino]-2-oxotetrahidrofurano (5,5 g, 38,2 mmoles), CH2Cl2 (60 ml) y metanol (21 ml) se añadió Pb(OAc)4 (16,9 g, 38,2 mmoles) a 5-10°C. Tras agitar a temperatura ambiente durante 2 h, se añadió trietilamina (5 ml, 38,2 mmoles) y se agitó durante 30 min. más. Se añadió CH2Cl2 (150 ml) y se lavó con agua la mezcla. Se secó con Na2SO4 el extracto de CH2Cl2 y se concentró a vacío. Se agitó el residuo con acetato de isopropilo y se filtró y se recristalizó el filtrado en acetato de isopropilo produciendo éster 4-hidroximetil-2-oxifurazan3-carboximetílico (1 g, 15%). 1H-RMN (300 MHz, C3D6O)  3,94 (3H, s), 4,85 (2H, s). 13C-RMN (75 MHz, C3D6O)  52,6, 56,2, 107,9, 156,9, 157,8.

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A éster 4-hidroximetil-2-oxifurazan-3-carboximetílico (611 mg, 3,51 mmoles) se le añadió amoniaco 2 M en MeOH (25 ml). Se agitó la disolución durante 2 h a temperatura ambiente. Se concentró a vacío la mezcla de reacción produciendo amida del ácido 4-hidroxi-2-oxifurazan-3-carboxílico (551 mg, 98%). 1H-RMN (300 MHz, C3D6O)  4,80 (2H, s). 13C-RMN (75 MHz, C3D6O)  56,1, 111,3, 157,1, 158,8.

**(Ver fórmula)**

1. Compuesto de fórmula (I)

2. Compuesto de fórmula (II)

3. Composiciones farmacéuticas que contienen el compuesto según la reivindicación o 2 en mezcla con vehículos y/o excipientes adecuados.

**(Ver fórmula)**

10 4. Compuesto de fórmula I para el tratamiento de tumores.

5. Compuesto de fórmula I para el tratamiento de infecciones virales.

6. Compuesto de fórmula I para el tratamiento de acontecimientos inmunoinflamatorios del hígado tales como 15 los que se producen durante hepatitis B y C aguda o crónica así como hepatitis autoinmunitaria.

7. Compuesto de fórmula I para el tratamiento de úlcera gástrica, choque hemorrágico y varios estados asociados con daño tisular durante isquemia-reperfusión y estados asociados.