Un antagonista de los receptores del secretagogo de la hormona del crecimiento (GHS-R) para uso en la reducción del nivel de glucosa en sangre

Técnica anterior [0001] En Japón, la rápida occidentalización de la dieta ha dado lugar a una “era de saciedad”. Además, con la propagación de una civilización mecanizada tipificada por el automóvil, un número cada vez mayor de Japoneses se encuentran en un estado de inactividad física crónica. Dado este entorno social, la población diabética en Japón ha aumentado recientemente a ritmos asombrosos a aproximadamente cinco o seis millones, incluyendo los pacientes potenciales.[0002] La diabetes mellitus se clasifica en dos tipos principales, el tipo I (diabetes mellitus insulinodependiente, o DMID) y el tipo II (diabetes mellitus no insulino-dependiente, o DMNID). La diabetes de tipo I aparece más comúnmente en menores; en esta enfermedad, los islotes de Langerhans del páncreas, que son responsables de la secreción de insulina, son destruidos por infecciones víricas u otras y se vuelven totalmente incapaces de segregar insulina. La diabetes de tipo II aparece predominantemente en personas de mediana edad y en los ancianos; casi todos (aproximadamente un 95%) los diabéticos en Japón quedan incluidos en esta clasificación. Las personas predispuestas a la diabetes debido a una tendencia a una insuficiente secreción de insulina desarrollarán la enfermedad como consecuencia de la inhibición fisiológica de la acción de la insulina, tal como por ingestión de un exceso de calorías, inactividad física, obesidad, estrés y envejecimiento.[0003] La diabetes mellitus está estrechamente relacionada con la obesidad y un estudio muestra que aproximadamente dos tercios de los pacientes con DMNID o bien son obesos ahora o bien experimentaron obesidad en el pasado. De hecho, se ha visto que la acción reductora de la glucosa en sangre de la insulina es baja en personas obesas. [0004] La obesidad tiene cada vez mayor prevalencia y es un importante problema de salud en todo el mundo, particularmente en las sociedades desarrolladas. En los EE.UU., más de la mitad de todos los adultos tienen actualmente sobrepeso. Allison et al. informaron que aproximadamente 280.000 muertes en EE.UU. en 1991 eran atribuibles a la obesidad (Allison DB et al., JAMA, 282: 1530-1538, 1991). Se sabe que la fisiopatología de la obesidad es una ingestión prolongada y excesiva de nutrientes en relación al gasto. Se ha visto que una “dieta occidental” que tiene un alto contenido en grasa va asociada a un mayor riesgo de obesidad.[0005] La clave para la regulación del peso corporal es el equilibrio entre la ingestión de alimento y el consumo energético y un desequilibrio entre los dos causa o bien obesidad o bien delgadez. La leptina fue descubierta por vez primera en 1994 y desde entonces se vio que era crítica para la regulación del peso corporal como señal de adiposidad. Se han descubierto también una gran cantidad de nuevos péptidos que se localizan secuencia abajo de la cascada de la leptina y que están implicados en la regulación del apetito. En particular, ha quedado claro que grupos de neuropéptidos derivados del hipotálamo que se consideró previamente que tenían funciones independientes desempeñan papeles individuales secuencia abajo de la cascada de la leptina y que se produce un íntimo intercambio de información entre esos grupos de neuropéptidos. [0006] Entre esos neuropéptidos, el neuropéptido Y (NPY), las orexinas, la motilina, la hormona concentradora de la melanina (HCM) y la proteína relacionada con el agouti (AGRP) son conocidos como substancias incrementadoras del apetito. Se conocen como substancias supresoras del apetito la hormona estimuladora de α-melanocitos (αMSH), el factor liberador de corticotropina (CRF), el transcripto regulado por cocaína y anfetamina (CART) y la colecistoquinina (CCK). Se considera que estos péptidos están implicados en el mecanismo fisiológico de control del apetito y que también afectan a la homeostasis energética.[0007] La hormona del crecimiento es segregada por el lóbulo anterior de la hipófisis; su secreción está controlada de un modo ingenioso, ya que es estimulada por la hormona liberadora de la hormona de crecimiento (GHRH) procedente del hipotálamo y suprimida por la somatostatina, Se ha visto recientemente que existe un mecanismo regulador de la secreción de GH a través de una ruta diferente a la que implica a la GHRH y a la somatostatina. Se han investigado los detalles de este mecanismo de regulación de la secreción de GH a través de una ruta diferente mediante estudios sobre el secretagogo de la hormona de crecimiento (GHS), que es un compuesto sintético que tiene la actividad de promover la secreción de GH. El GHS actúa a través de una ruta diferente a la GHRH. Para resumirlo, la GHRH activa el receptor de GHRH para elevar la concentración intracelular de AMPc, mientras que el GHS activa un receptor diferente del receptor de GHRH para elevar la concentración intracelular de ion Ca++ mediada por el sistema IP3 intracelular. Se identificó la estructura de GHS-R, el receptor sobre el que actúa el GHS, por la clonación de expresión en 1996 (Howard A.D. et al., Science, 273: 974-977, 1996). El GHS-R es un receptor acoplado a proteína G típico que tiene siete dominios de expansión de transmembrana y que se expresa predominantemente en el hipotálamo y en la glándula pituitaria. [0008] Además, la existencia del receptor que se une al GHS, que es un compuesto sintético que no se encuentra de forma natural en los organismos vivos, ha inducido a los científicos a buscar ligandos endógenos que activen el GHS-R al unirse a él. Como resultado, se purificó la grelina a partir del estómago de rata y se identificó como un ligando específico para GHS-R (Kojima M. et al., Nature, 402: 655-660, 1999). [0009] La grelina es un péptido de 28-aminoácidos, con una modificación n-octanoílo sobre la Ser 3 (serina del 3º residuo de aminoácido). La grelina humana difiere de la grelina de rata en dos residuos de aminoácido. A continuación se muestran las fórmulas estructurales de la grelina de rata y de la humana:

Rata

**(Ver fórmula)**

15 [0010] La grelina químicamente sintetizada presente en una cantidad del orden nanomolar tiene la actividad de elevación del Ca++ intracelular en células CHO en las que se expresa GHS-R, así como la actividad de liberación de hormona del crecimiento en un cultivo primario de células de la glándula pituitaria. La grelina también eleva la hormona del crecimiento en la sangre en ratas in vivo. El ARNm de la grelina se expresa altamente en el estómago y la grelina está también presente en la sangre. El GHS-R está presente en el hipotálamo, el corazón, el pulmón, el páncreas, el intestino delgado y el tejido adiposo (ibid. Kojima et al.). Además, se ha descrito que la grelina estimula la alimentación (Wren et al., Endocrinology, 141(11): 4325-4328, 2000). Los presentes inventores vieron con anterioridad que la grelina mostraba una marcada acción promotora del apetito a través del receptor NPY e Y1 y propusieron que la grelina sería útil como agente terapéutico para enfermedades que muestran un síntoma de hipoalimentación (PCT/JP02/00765).DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN [0011] Según la presente invención, se proporciona un antagonista de los receptores del secretagogo de la hormona del crecimiento (GHS-R) para uso en la reducción del nivel de glucosa en sangre. Breve descripción de los dibujos

La Fig. 1A muestra las secuencias de aminoácidos de la grelina humana y de la motilina humana y la Fig. 1B muestra las secuencias de aminoácidos de un receptor de grelina humana y de un receptor de motilina humana, indicándose con asteriscos los mismos aminoácidos. La Fig. 2 muestra el efecto de la grelina administrada IP sobre el peso corporal bajo una dieta de alto contenido en grasas. La Fig. 3 muestra el efecto de la grelina administrada IP sobre la masa grasa del epidídimo bajo una dieta de alto contenido en grasas. La Fig. 4 muestra la expresión del ARNm de la leptina, de la adiponectina y de la resistina en WAT tras la administración IP de grelina, valorada por análisis Northern blot. La Fig. 5 muestra la expresión del ARNm de la grelina bajo una dieta de alto contenido en grasas, valorada por análisis Northern blot. La Fig. 6 muestra el efecto de [D-Lys-3]-GHRP-6 administrado IP sobre la ingestión de alimento. La Fig. 7 muestra el efecto de [D-Lys-3]-GHRP-6 administrado ICV sobre la ingestión de alimento. La Fig. 8 muestra el efecto de la administración simultánea de grelina (IP) y [D-Lys-3]-GHRP-6 (ICV) sobre la ingestión de alimento. La Fig. 9 muestra el efecto de [D-Lys-3]-GHRP-6 administrado IP sobre la velocidad de vaciado gástrico. La Fig. 10 muestra el efecto de [D-Arg-1, D-Phe-5, D-Trp-7, 9, Leu-11]substancia P administrada IP sobre la ingestión...

. Un antagonista de los receptores del se

cretagogo de la hormona del crecimiento (GHS-R) para uso

en la reducción del nivel de glucosa en sangre.2. El antagonista GHS-R según la reivindicación 1, seleccionado entre el grupo consistente en un antagonista de los análogos de grelina, [D-Lys-3]-GHRP-6 y [D-Arg-1, D-Phe-5, D-Trp-7, 9, Leu-11]substancia P.

3. El antagonista GHS-R según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, formulado para ser administrado central o periféricamente.