LACTOBACILLI PROBIÓTICOS FELINOS.

La presente invención se refiere al campo de los microorganismos probióticos, más concretamente a bacterias del ácido láctico probióticas de felinos y métodos de utilización. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN ES 2 367 518 T3 Los mecanismos de defensa para proteger al tracto gastrointestinal (GI) de los mamíferos de la colonización por bacterias son extremadamente complejos. El tracto GI de la mayoría de los mamíferos es colonizado por microflora natural y por microorganismos patógenos invasivos. En un estado de salud, esta microflora en competencia está en un estado de equilibrio. La modificación del equilibrio de la microflora intestinal puede conducir a muchos trastornos GI, o bien prevenirlos, tanto en humanos como en otras especies de mamíferos, tales como animales de compañía, incluyendo gatos, perros y conejos. El bienestar de los animales de compañía está estrechamente relacionado con su alimentación y salud GI, y el mantenimiento del equilibrio de la microflora intestinal puede mejorar la salud de estos animales de compañía. La cantidad y la composición de la microflora intestinal tiende a ser estable, si bien la edad y la dieta la puede modificar. Se considera que la acidez gástrica, la bilis, el movimiento peristáltico intestinal y la inmunidad local son factores importantes de la regulación de la flora bacteriana en el intestino delgado de los seres humanos y de otros diversos mamíferos. Con frecuencia, los trastornos CI de animales de compañía, incluidos los observados en felinos, están vinculados a una sobrepoblación bacteriana y a la producción de enterotoxinas por bacterias patógenas. Estos factores afectan al equilibrio de la microflora intestinal y pueden producir inflamaciones y enfermedades autoinmunes. Durante los últimos años la investigación ha comenzado a descubrir algunas cepas valiosas de bacterias y su empleo potencial como agentes probióticos. Los probióticos son preparados de bacterias, viables o muertas, con constituyentes tales como proteínas o carbohidratos, o bien fracciones purificadas de fermentos bacterianos que estimulan la salud de los mamíferos preservando la microflora natural del tracto GI y reforzando los controles de enfermedades autoinmunes. Hay quienes creen que las bacterias probióticas son más eficaces si se obtienen de las especies que se pretenden tratar, o bien de especies estrechamente relacionadas con las mismas. Por ello, para su uso en animales de compañía, son necesarias cepas probióticas obtenidas de animales de compañía, diferentes de las que se obtienen de los humanos. En WO 01/90311 se describen microorganismos probióticos aislados de muestras fecales obtenidas de gatos con actividad probiótica. Sin embargo, dichas bacterias se obtuvieron de muestras fecales y pueden no formar parte de la microflora intestinal natural presente en la parte superior del tracto GI. El American Journal of Veterinary Research; vol. 32, de 9 Septiembre 1971, páginas 1399-1405, también describe la microflora en el tracto alimentario de los gatos. Se puede encontrar alguna información adicional en The Journal of Nutrition, Ag. 2004, vol. 38, 8 Supl.; páginas 2022S-2026S. En The Veterinary Clinics of North America; Small Animal Practice, Mar 1999, vol. 29; páginas 523-550 se publica un estudio sobre la sobrepoblación bacteriana del intestino delgado. En WO 03/010298 describe ciertas bacterias probióticas originarias del tracto gastrointestinal humano. En US-2003/0190309 se refiere a nuevos probióticos para su uso en alimentos de animales de compañía. El artículo de G.W. Osbaldiston y otros en Am. J. Vet. Res., vol 32, n.° 9, Septiembre 1971, páginas 1399-1405, se refiere a un estudio de la microflora del tracto alimentario de los gatos. El artículo de R. A. Rastall en Am. Soc. Nut. Sci., vol 134, n.° 8, Agosto 2004, páginas 2022 - 2026 se refiere a un estudio de bacterias en el intestino. El artículo de Johnston K.L. en Veterinary clinics of North-America: Small animal practice, vol. 29, n.° 2, Marzo 1999, páginas 523-550, se refiere a la sobrepoblación bacteriana en el intestino delgado. En W003/010298 se refiere a las cepas de un Lactobacillus Salivarus probiótico. En consecuencia, existe la necesidad de disponer de cepas de bacterias que se puedan obtener por aislamiento de la microflora intestinal natural presente en la parte superior del tracto GI que estén especialmente adaptadas a los gatos, y que hayan sido seleccionadas por sus propiedades probióticas y su capacidad para sobrevivir el procesado, e incorporar dichas cepas a composiciones adecuadas para su uso. 2 SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a una cepa de bacterias del ácido láctico del género Lactobacilli obtenible por aislamiento de tracto gastrointestinal de felinos extirpado y lavado, con actividad probiótica, en donde dicha cepa se selecciona del grupo formado por Lactobacillus salivarius ss. Salicinius NCIMB 41287 (AHF 122A), Lactobacillus animalis NCIMB 41288 (AHF 223C), Lactobacillus reuteri NCIMB 41289 (AHF 5119); mutantes de los mismos y mezclas de los mismos. Además, la presente invención está orientada a proporcionar usos de bacterias de ácido láctico obtenibles por aislamiento de tracto gastrointestinal de felinos extirpado y lavado, para mantener y mejorar la salud de animales de compañía, y composiciones que comprenden las bacterias de ácido láctico. Estas características y otras características, aspectos y ventajas de la presente invención resultarán evidentes para los expertos en la técnica después de leer el presente ejemplo. Secuencias SEQ. n.° 1 16s-23s secuencia de nucleótidos del espaciador intergénico de Lactobacillus salivarius subsp. Salicinius, NCIMB 41287 SEQ. n.° 2 16s-23s secuencia de nucleótidos del espaciador intergénico de Lactobacillus animalis, NCIMB 41288 SEQ. n.° 3 16s-23s secuencia de nucleótidos del espaciador intergénico de Lactobacillus reuteri, NCIMB 41289 SEQ. n.° 4 Izquierda 16s-23s PCR secuencia de cebador para secuenciación. SEQ. n.° 5 Derecha 16s-23s PCR secuencia de cebador para secuenciación. Números de depósito bacteriano La tabla siguiente indica las especies de Lactobacillus y números de cepas de las cepas que son ejemplos de la presente invención. Las cepas bacterianas están depositadas en el organismo National Collections of Industrial Food and Marine Bacteria (NCIMB), Aberdeen, Reino Unido. Cepa Número de depósito Secuencia 16s-23s Lactobacillus salivarius subsp. salicinius NCIMB 41287 SEQ. n.° 1 Lactobacillus animalis NCIMB 41288 SEQ. n.° 2 Lactobacillus reuteri NCIMB 41289 SEQ. n.° 3 DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN ES 2 367 518 T3 Todos los pesos, medidas y concentraciones de la presente memoria están medidos a 25 °C en la composición en su totalidad, salvo que se indique lo contrario. Salvo que se indique lo contrario, todos los porcentajes de composiciones referidas en la presente memoria son porcentajes en peso y todas las relaciones son relaciones en peso. Salvo que se indique lo contrario, todos los pesos moleculares son pesos moleculares promedios en peso. Excepto en los casos en los que se detallan los valores de medición reales de ejemplos específicos, los valores numéricos a los que se hace referencia en la presente memoria deberán considerarse acompañados por la palabra aproximadamente. En la siguiente descripción la abreviatura UFC (unidades formadoras de colonias) designa el número de células bacterianas obtenido por recuento microbiano sobre placas de agar, del modo generalmente entendido en la técnica. Tal como se emplea en la presente memoria, el término mutantes del mismo incluye cepas bacterianas derivadas que comprenden mutaciones de ADN en otras secuencias de ADN del genoma bacteriano, excluyendo la secuencia intergénica 16s-23s. Tal como se emplea en la presente memoria, el término mutaciones de ADN incluye mutaciones naturales o inducidas que comprenden, como mínimo, alteraciones únicas de base incluyendo supresiones, inserciones, transversiones, y otras modificaciones del ADN conocidas por los expertos en la técnica, incluyendo modificaciones genéticas introducidas en un nucleótido precursor o secuencia de aminoácidos mientras se mantiene, como mínimo, un 50% de homología respecto a la secuencia precursora. Preferiblemente, la secuencia que comprende la mutación o mutaciones de ADN tiene, respecto a la secuencia parental, una homología de, 3 como mínimo, 60%, más preferiblemente, como mínimo 75%, aún más preferiblemente 85%. Tal como se utiliza en la presente memoria, la homología de secuencias se puede determinar empleando técnicas estándar conocidas por los expertos en la técnica. Por ejemplo, la homología se puede determinar empleando el programa BLAST de algoritmo de homología en línea públicamente disponible en http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/. Tal como se utiliza... [Seguir leyendo]

1. Una cepa de bacterias de ácido láctico del género Lactobacilli obtenible por aislamiento a partir de tracto gastrointestinal felino extirpado y lavado, que posee actividad probiótica, en el que dicha cepa se selecciona del grupo que consiste en Lactobacillus salivarius ss salicinius NCIMB 41287 (AHF 122A), Lactobacillus animalis NCIMB 41288 (AHF 223C), Lactobacillus reuteri NCIMB 41289 (AHF 5119), mutantes de las mismas y mezclas de las mismas. 2. La cepa según la reivindicación 1, con capacidad de sobrevivir y colonizar el tracto gastrointestinal de un animal de compañía, en donde el animal de compañía es un gato. 3. La cepa según la reivindicación 2, que tiene un crecimiento de al menos 33% cuando se cultiva en presencia de 0,5% de sales biliares felinas. 4. La cepa según la reivindicación 2, capaz de conservar la viabilidad después de 1 hora a pH 2,5. 5. La cepa según la reivindicación 1, en la que la cepa bacteriana de ácido láctico tiene una secuencia de ADN en la región de espaciador 16s-23s seleccionada de la SEQ. n.° 1, SEQ. n.° 2, o SEQ. n.° 3. 6. La cepa según la reivindicación 1, en la que el mutante es un mutante natural, genéticamente modificado o inducido. 7. La cepa de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, para su uso a fin de mantener o mejorar la salud de un animal de compañía, en donde el animal de compañía es un gato. 8. La cepa para su uso según la reivindicación 7, para la regulación o mejora del sistema inmunitario de animales de compañía, para tratar o prevenir enfermedades autoinmunes en animales de compañía, para tratar o prevenir inflamaciones en animales de compañía, para mantener o mejorar la salud del sistema de la piel y/o pelaje de animales de compañía, para tratar o prevenir la enfermedad atópica de la piel en animales de compañía, para mejorar o reducir los efectos del envejecimiento en animales de compañía, para prevenir una pérdida de peso durante y después de una infección en animales de compañía, y para aumentar la digestión de fibras en animales de compañía. 9. La cepa para su uso según la reivindicación 7, para tratar o prevenir infecciones gastrointestinales en animales de compañía. 10. La cepa para su uso según la reivindicación 9, para mejorar la ecología microbiana de animales de compañía. 11. La cepa para su uso según la reivindicación 10, que comprende la reducción de los niveles de bacterias patógenas en las heces de animales de compañía, en donde dichas bacterias patógenas se seleccionan del grupo que consiste en Clostridia, Escherichia, Salmonella, y mezclas de las mismas. 12. La cepa para su uso según la reivindicación 8, para tratar o prevenir dolencias del tracto urinario de animales de compañía, en donde dicha dolencia del tracto urinario comprende una infección del tracto urinario o en donde dicha dolencia del tracto urinario comprende cálculos del tracto urinario. 13. La cepa para su uso según la reivindicación 12, en la que dichos probióticos Lactobacilli aumentan la degradación del ácido oxálico in vitro. 14. La cepa para su uso según la reivindicación 13, para reducir los niveles de estrés en animales de compañía, en donde dichos niveles de estrés se miden determinando el nivel de las hormonas de estrés seleccionadas del grupo que consiste en epinefrina, norepinefrina, dopamina, cortisol, proteína C-reactiva, y mezclas de las mismas. 15. La cepa para su uso según cualquiera de las reivindicaciones 7 a 14, en la que la cepa está en una forma de dosificación oral para un animal en una cantidad desde 1,0E+04 hasta 1,0E+12 UFC/animal por día. 16. Una composición que comprende una cepa de bacterias de ácido láctico, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6. 17. La composición según la reivindicación 16, en la que dicha composición es un alimento para un animal de compañía, en donde la composición es un alimento húmedo para animales o un alimento seco para animales. 18. La composición según la reivindicación 17, en la que la composición es un alimento para gatos. 19. La composición según la reivindicación 17, en la que la composición está en una forma seleccionada del grupo que consiste en croquetas, golosinas masticables y galletas. 20. La composición según la reivindicación 17, en la que dicha composición es un suplemento alimenticio para animales de compañía. 21 ES 2 367 518 T3 21. La composición según la reivindicación 20, en la que la composición está en forma de una salsa de carne, yogur, queso u otro producto lácteo. 22. La composición según la reivindicación 20, en la que la composición está en una forma seleccionada del grupo que consiste en cápsulas, comprimidos y pastillas. 5 23. La composición según la reivindicación 16, que comprende al menos 0,001% o de aproximadamente 1,0E+04 UFC/g a aproximadamente 1,0E+12 UFC/g de la bacteria de ácido láctico. 24. La composición según la reivindicación 16, en la que las bacterias de ácido láctico, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, están en forma de células viables. 25. La composición según la reivindicación 16, en la que las bacterias de ácido láctico, según cualquiera de las 10 reivindicaciones 1 a 6, están en forma de células no viables o de fracciones activas constituyentes de las mismas. 26. Uso de bacterias de ácido láctico del género Lactobacilli obtenibles por aislamiento de tracto gastrointestinal felino, extirpado y lavado, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, para reducir los olores asociados a las heces o a la orina de un animal de compañía. 27. Uso según la reivindicación 26, en donde el olor está asociado a una caja de arena higiénica de un animal 15 de compañía. 22