COMPOSICIÓN DE VACUNA PARA VACUNBAR A LOS PERROS CONTRA LA ENFERMEDAD RESPIRATORIA INFECCIOSA CANINA (ERIC).

Una composición de vacuna para la vacunación de perros que comprende:

un agente capaz de elevar una respuesta inmune contra Streptococcus equi sub species zooepidemicus (S. zooepidemicus) en un perro, donde dicho agente se compone de S. zooepidemicus inactivado o atenuado o un fragmento inmunológico de S. zooepidemicus, o un ácido nucleico que codifica dicho fragmento; y un agente capaz de elevar una respuesta inmune contra Micoplasma cynos (M. cynos) en un perro, donde dicho agente se compone de M. cynos atenuado o inactivado, o un fragmeno inmunológico de M. cynos, o un ácido nucleico que codifica dicho fragmento

La presente invención trata de una composición de vacuna y en particular en una composición de vacuna para el uso contra enfermedades respiratorias infecciosas caninas.

La enfermedad respiratoria infecciosa canina (ERIC) es una enfermedad altamente contagiosa común en los perros de casa y en condiciones donde existe multitud de ellos como en centros de reacogida, de internamiento y 5 centros de entrenamiento. Muchos perros sufren sólo de una tos suave y se recuperan después de un corto tiempo, sin embargo en algunos casos puede desarrollarse una bronconeumonía (Appel y Binn, 1987). ERIC es raramente mortal pero puede retrasar la reacogida de perros en centros de rescate y puede causar el trastorno en perreras de entrenamiento con un coste de tratamiento considerable.

La patogénesis de ERIC se considera que puede ser multifactorial, involucrando muchos virus y bacterias. 10 Los agentes infecciosos que se consideran que son los mayores causantes patógenos de ERIC son los parainfluenzavirus caninos (CPIV)-(Binn et al, 1967), adenovirus canino tipo 2 (CAV-2) (Ditchfield et al, 1962), y herpesvirus canino (CHV) (Karpas et al, 1968 a y 1986b), coronavirus respiratorio canino (CRCV) (WO 2004/011651 (The Royal Veterinary Collage) y Erles et al, 2003) y la bacteria Bordetella Bronchiseptica (B. bronchiseptica) (Bemis et al, 1977a Keil et al, 1998). 15

Estos virus y bacterias han sido frecuentemente aislados durante los brotes y han sido mostrados para causar los síntomas respiratorios o lesiones de pulmón en infecciones experimentales (Appel y Percil 1970, Swango et al, 1970, Karpas et al, 1986b).

También, reovirus humanos y especies micoplasmáticas han sido aisladas de perros con síntomas de ERIC (Lou y Wenner 1963, Randolph et al, 1993). Además, factores como el estrés pueden ser importantes. 20

B. bronchiseptica fue descubierta como un agente primario etiologico en la enfermedad respiratoria “tos de las perreras” (Bemis et al, 1977b y Thompson et al, 1976). Ello predispone que los perros sean influenciados por otros agentes respiratorios y frecuentemente existe al mismo tiempo con ellos. La tos de las perreras puede reproducirse por un cambio virulento de B. bronchiseptica. Además, los factores medioambientales tales como frío, aire, y alta humedad, típicas condiciones en perreras, incrementan la susceptibilidad a la enfermedad (Ejlis et al, 25 2001). Los antibióticos son generalmente reconocidos como agentes pobres para tratar la enfermedad primaria (Ellis et al, 2001). En contraste, la inmunopropilaxis para B. bronchiseptica proporciona una eficacia relativa media para ayudar al control de esta enfermedad.

Los síntomas externos de la infección de B. bronchiseptica es una tos seca, violenta, la cual es agravada por la actividad o excitación. La tos ocurre en paroxismos, seguida de arcadas para intentar limpiar pequeñas 30 cantidades de mocos de la garganta. La temperatura corporal puede ser elevada a medida que tiene lugar una invasión secundaria bacteriana. Como la tos de las perreras es altamente contagiosa, la enfermedad puede ser rápidamente transmitida a perros susceptibles y produce una severa tos. Los más importantes signos salen al principio de dos a cinco días después de la infección, pero puede continuar en periodos ampliados. El stress, particularmente en condiciones medioambientales adversas, podría causar una recaída durante etapas posteriores 35 de la enfermedad.

La tos de las perreras es típicamente una condición de vías respiratorias superiores y caracterizadas por secreción nasal y tos. Mientras que la tos de las perreras implica cambios en las vías respiratorias superiores, la patología ERIC indica que está involucrada en los daños al pulmón y, el algunos casos, bronconeumonía. La tos de las perreras es un síndrome más suave que ERIC y no tiene el ancho rango de patología descrita en ERIC. ERIC es 40 también distinguido por un incremento en la severidad y mortalidad.

ERIC es un síndrome en perros que se presenta con signos respiratorios en un rango que va desde una enfermedad suave hasta la muerte. Se caracteriza por involucrar en la enfermedad las vías respiratorias superiores e inferiores con una progresión de patología desde inflamatoria hasta exudativa, edematosa y algunas veces hemorrágica que puede extenderse dentro del tejido pulmonar. ERIC puede también ocurrir en ausencia B. 45 bronchiseptica, y en efecto algunos perros contraen ERIC al tiempo que no tienenes B. bronchiseptica detectable, la cual indica que la tos de las perreras y ERIC son distintas infecciones.

Nosotros también hemos confirmado la asociación de B. bronchiseptica con las enfermedades respiratorias mientras que se concluye que otros agentes están involucrados en las enfermedades respiratorias (Chalker et al, 2003). 50

Nosotros ahora hemos demostrado que el Streptococcus equisug especies zooepidemicus (vea ejemplo 1), Micoplasma cynos (vea ejemplo 2), y un Chlamydophila (vea ejemplo 3), están asociados con ERIC. Como todos los perros en nuestro estudio de población fueron vacunados contra CPIV y CAV-2, no teníamos nuevos datos para apoyar la implicación de estos virus en el ERIC. Sin embargo hemos encontrado un incremento en la prevalencia del herpesvirus canino en peros con síntomas de respiración graves (vea ejemplo 4). 55

El Streptococcus equi sub especies zooepidemicus (S. zooepidemicus) es un patógeno oportunista el cual es aislado frecuentemente de una variedad de animales huéspedes, no solo de caballos. Es a menudo encontrado como un comensal de las vías respiratorias superiores en la extensión de las mucosas de mamíferos (Timoney el al, 1998; Quinn et al, 1999) y ha sido asociado con múltiples síndromes de enfermedades incluyendo la enfermedad de

las vías respiratorias inferiores, neumonía de potro y cervicitis en caballos (Chanter, 1997; Biberstein y Hirsh, 1999), neumonía en llamas (Biberstein y Hirsh, 1999), septicaemia y artritis en cerdos (Timoney, 1987), mastitis en vacas y cabras (Timoney et al, 1988), septicaemina en aves de corral, pericarditis y neumonía en ovejas (Timoney, 1987), limphadenitis en cobayas (Quinn el al, 1999), glomerulonefritis en humanos (Balter el al, 2000) y meningitis en humanos (Ural et al, 2003). En perros, la S. zooepidemicus ha sido asociada con infecciones cruzadas y septicaemia 5 (Quinn et al, 1999) y neumonía hemorrágica necrótica aguda (Garnett el al, 1982).

Aunque los perros en sus últimas etapas de neumonía hemorrágica estreptococica (NHE) comparte algunas características histológicas con perros con ERIC, este no es el caso en sus etapas iniciales (vea Chalker et al, 2003) y los trombos sépticos están presentes en NHE (Garnett el al, 1982). NHE tiene una rápida aparición que era mortal en la mayoría de los casos sin signos clínicos, donde el ERIC solo lo vimos como una aparición lenta con amplio 10 rango de signos clínicos desde mucosidad nasal, tos, estornudos, arcadas, inapetencia, neumonía y bronconeumonía.

Mycoplasma cynos (M. cynos) ha estado asociada con la infección del conducto urinario canino (Jang et al, 1984). Ello ha sido identificado en los pulmones de un perro con el moquillo (Rosendal, 1978), y la inoculación endobronquial de M. cynos fue encontrada para inducir neumonía en perros (Rosendal & Vinther, 1977). 15

El moquillo canino descrito por Rosendal (1978) es una compleja enfermedad seguida de una infección con el virus de moquillo canino, varias especies de mycoplasma y la bacteria Pseudomonas. Esto es una combinación poderosa de desafíos microbianos y, no sorprendentemente, resulta en neumonía. La proporción de la patología se debe al Mycoplasma spp, y no fue claro. Posteriormente al desafío con m. cynos fue caracterizado sin ninguna señal de enfermedad en los perros aunque algunas lesiones inflamatorias locales pequeñas fueron halladas en 4 de cada 20 5 perros inoculados. La significancia de M. cynos en este síndrome fue, como Rosendal lo planteó, “dificultad para evaluar”.

Las especies de Chlamydophila asociadas con ERIC están muy relacionadas con Chlamydophila abortus (C.abortus) por comparación de la secuencia de 218 nucleótidos en los 23 genes de ARNr. La secuencia de nucleótidos de esta región en estas especies de Chlamidophila (SEQ ID NO: 1) es idéntica en más del 99% para el 25 C.abortus, 98.6% idéntico para el Chlamydophila psittaci y 96.3% idéntico para el Chlamydophila felis.

La especie de Chlamydophila fue identificada en la tráquea y los pulmones de... [Seguir leyendo]

1. Una composición de vacuna para la vacunación de perros que comprende:

un agente capaz de elevar una respuesta inmune contra Streptococcus equi sub species zooepidemicus (S. zooepidemicus) en un perro, donde dicho agente se compone de S. zooepidemicus inactivado o atenuado o un fragmento inmunológico de S. zooepidemicus, o un ácido nucleico que codifica dicho fragmento; y

un agente capaz de elevar una respuesta inmune contra Micoplasma cynos (M. cynos) en un perro, donde 5 dicho agente se compone de M. cynos atenuado o inactivado, o un fragmeno inmunológico de M. cynos, o un ácido nucleico que codifica dicho fragmento.

2. Una composición de vacuna según la reivindicación 1 y un portador farmacéuticamente aceptable, diluyente o adyuvante.

3. Una composición de vacuna según la reivindicación 1 o 2 que comprende además un agente capaz de 10 elevar la respuesta inmune en un perro contra coronavirus respiratoria canina (CRCV), donde dicho agente se compone de CRCV inactivado o atenuado, o un fragmento inmunológico del mismo, o un ácido nucleico que codifica dicho fragmento inmunológico.

4. Una composición de vacuna según la reivindicación 3, donde el fragmento inmunológico de CRCV se compone de la proteína Spike o la proteína hemoglutinina-estereasa (HE), o una porción inmunogénica 15 de la proteina Spike o HE.

5. Una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 1-4 que comprende además un agente capaz de elevar la respuesta inmune de un perro contra el virus de parainfluenza canino (CPIV), donde dicho agente se compone de CPIV inactivado o atenuado, o un fragmento inmunológico del mismo, o un ácido nucleico que codifica dicho fragmento inmunogénico. 20

6. Una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 1-4 que comprende además un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra adenovirus tipo 2 canino (CAV-2), donde dicho agente se compone de CAV-2 atenuado o inactivado, o un fragmento inmunológico del mismo, o un ácido nucleico que codifica dicho fragmento inmunológico.

7. Una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 1-4 que comprende además un 25 agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra herpesvirus canino (CHV), donde dicho agente se compone de CHV atenuado o inactivado, o un fragmento inmunológico del mismo, o un ácido nucleico que codifica dicho fragmento inmunológico.

8. Una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 1-4, que además comprende un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra Bordetella bronchiseptica (B. 30 bronchiseptica), donde dicho agente se compone de B. bronchiseptica atenuada o inactivada, o un fragmento inmunogénico del mismo, o un ácido nucleico que codifica dicho fragmento inmunogénico.

9. El uso de un agente capaz de elevar la respuesta inmune contra S. zooepidemicus en un perro y un agente capaz de elevar una respuesta inmune contra M. cynos en un perro, como se definió en la reivindicación 1, en la preparación de un medicamento para la profilaxis o tratamiento de enfermedad 35 respiratoria infecciosa canina (ERIC) en un perro.

10. El uso de un agente capaz de elevar la respuesta inmune contra S. epidemicus en un perro y un agente capaz de elevar la respuesta inmune contra M. cynos en un perro, como se definió en la reivindicación 1, en la preparación de un medicamento para estimular una respuesta inmune contra S. zooepidemicus y dicho M. cynos en un perro. 40

11. El uso según a las reivindicaciones 9 o 10 donde el medicamento además comprende uno o más cualesquiera de:

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra CRCV;

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra CPIV;

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra CAV-2; 45

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra CHV;

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra B. bronchiseptica como se definió en la cualquiera de las reivindicaciones 3-8.

12. Una composición que contiene un agente capaz de elevar la respuesta inmune contra S. zooepidemicus en un perro y un agente capaz de elevar una respuesta inmune contra M. cynos en un perro, como se 50 definió en la reivindicación 1, para el uso como medicamento.

13. Una composición según la reivindicación 12 para su uso como un medicamento veterinario.

14. Una composición según la reivindicación 13 para su uso como un medicamento veterinario canino.

15. Una composición para uso según cualquiera de las reivindicaciones 12-14 que comprende además una cualquiera o más de:

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra CRCV;

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra CPIV; 5

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra CAV-2;

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra CHV;

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra B. bronchiseptica, como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 3-8.

16. Un kit de partes para una composición de vacunas, comprendiendo: 10

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra S. zooepidemicus como se definió en la reivindicación 1; y

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra M. cynos como se definió e la reivindicación 1, y, opcionalmente, un portador farmacéuticamente aceptable, diluyente o adyuvante.

17. El kit según la reivindicación 16, que comprende además una cualquiera o más de: 15

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra CRCV;

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra CPIV;

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra CAV-2;

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra CHV; y

un agente capaz de elevar la respuesta inmune en un perro contra B. bronchiseptica, como se definió en cualquiera 20 de las reivindicaciones 3-8.