Método de determinación de la presencia y/o cantidad de moléculas diana.

Método para el análisis de células individuales en una muestra de sangre mediante la determinación de la presencia y/o cantidad de una o más moléculas diana en una pluralidad de células,

que comprende:

(i) inmovilizar dicha pluralidad de células sobre un sustrato sólido, en el que las células se inmovilizan en forma de una monocapa y están preferiblemente separadas entre sí;

(ii) determinar la posición de las células inmovilizadas individuales sobre el sustrato sólido;

(iii) medir la autofluorescencia de las células inmovilizadas individuales;

(iv) poner en contacto las células inmovilizadas con un primer reactivo de detección que comprende (a) un resto que reconoce y se une de manera específica a una primera molécula diana y (b) una etiqueta fluorescente en condiciones que permiten la unión del reactivo de detección a la primera molécula diana;

(v) medir la fluorescencia de la etiqueta fluorescente del reactivo de detección unido a la primera molécula diana para las células inmovilizadas individuales;

(vi) determinar la presencia y/o cantidad de la primera molécula diana en las células inmovilizadas individuales comparando la fluorescencia medida en la etapa (v) con la fluorescencia medida en la etapa (iii) célula a célula;

(vii) opcionalmente repetir las etapas (iv) a (vi) con un reactivo de detección segundo o adicional que comprende (a) un resto que reconoce y se une de manera específica a una molécula diana segunda o adicional y (b) una etiqueta fluorescente.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E16189483.

Solicitante: Canopy Biosciences, LLC.

Inventor/es: HENNIG,CHRISTIAN.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • G01N15/10 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 15/00 Investigación de características de partículas; Investigación de la permeabilidad, del volumen de los poros o del área superficial efectiva de los materiales porosos (identificación de microorganismos C12Q). › Investigación de partículas individuales.
  • G01N33/543 G01N […] › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › con un soporte insoluble para la inmovilización de compuestos inmunoquímicos.
  • G01N33/569 G01N 33/00 […] › para microorganismos, p. ej. protozoarios, bacterias, virus.

PDF original: ES-2822929_T3.pdf

 

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