USO DE COMPUESTOS DE DIPIRIDINIO PARA TRATAR UNA ENFERMEDAD CARACTERIZADA POR CELULAS PROLIFERATIVAS QUE CONTIENEN OXIDO NITRICO SINTASA.

El uso de un compuesto de dipiridinio en la fabricación de un medicamento para tratar un paciente con una enfermedad caracterizada por células patológicamente proliferativas que contienen óxido nítrico sintasa y seleccionada de reestenosis,

hiperplasia prostática benigna e hipertensión pulmonar

Uso de compuestos de dipiridinio para tratar una enfermedad caracterizada por células proliferativas que contienen óxido nítrico sintasa.

La invención se refiere al tratamiento de trastornos caracterizados por células patológicamente proliferativas que contienen óxido nítrico sintasa.

El documento DE-C-19.724.185 da a conocer que ciertos derivados de 4,4-dipiridinio, que están sustituidos en ambos átomos de nitrógeno de anillo por los mismos o diferentes grupos fenoxialquilo, inhiben el crecimiento de tumores y metástasis.

El paracuat es un herbicida que daña los pulmones, el hígado y los riñones y produce toxicidad mediante ciclación rédox con diaforasas celulares, elevando así los niveles intracelulares de superóxido (O₂^-). Se ha mostrado que la óxido nítrico sintasa (NOS) participa en el daño pulmonar inducido por paracuat. La teoría actual mantiene que el óxido nítrico (NO) generado por la NOS reacciona con el O₂^- generado por el paracuat produciendo el peroxinitrito tóxico.

Jaworski et al. (Free Rad. Res. Coms., 18 (3), 1993, 139-145) han notificado experimentos in vitro que establecen que el efecto tóxico del paracuat sobre células de melanoma SK23 (humanas) y B16 (de ratón) y d ovario de hámster chino (CHO) es debido al superóxido y que muestran que el paracuat aumenta la resistencia a la radiación de las estirpes celulares SK23 y CHO, pero no B16. Se sugiere que el efecto radioprotector es ejercido por la inducción de enzimas antioxidantes. Sin embargo, se concluye que, debido a que se usaron altas dosis de paracuat y tratamientos prolongados, el superóxido se acumula en la célula y la elevada defensa enzimática puede no ser suficiente para contrarrestar su efecto nocivo.

Se ha descubierto ahora que la "teoría actual" es incorrecta y que la NOS funciona más bien como diaforasa de paracuat. En otras palabras, el paracuat acepta electrones de la óxido nítrico sintasa, tras de lo cual el paracuat reducido genera O₂^- tóxico y evita que la NOS ceda electrones a la arginina e inhibe así la producción de NO, resultando así el agotamiento de NO. Esto está generalizado para compuestos con un potencial rédox mayor que la óxido nítrico sintasa. Los compuestos causan la generación de O₂^-, inhiben la óxido nítrico sintasa y destruyen células que incluyen NOS mediante la combinación de O₂^- elevado y de privar a las células del NO que necesitan.

Según un primer aspecto de la presente invención, se proporciona el uso de un compuesto de dipiridinio en la fabricación de un medicamento para tratar un paciente con una enfermedad caracterizada por células patológicamente proliferativas que contienen óxido nítrico sintasa y seleccionada de reestenosis, hipertrofia prostática benigna e hipertensión pulmonar, y el compuesto de dipiridinio para dicho uso. Según un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona el uso de un compuesto de dipiridinio seleccionado de paracuat, dicuat y lucigenina en la fabricación de un medicamento para tratar un paciente con un tumor de gran malignidad en el que las células patológicamente proliferativas contienen óxido nítrico sintasa, y el compuesto de dipiridinio para dicho uso. En una realización, se administra también un agente que induce la expresión de óxido nítrico sintasa.

El término "paciente" se usa en la presente memoria para indicar mamíferos, incluyendo un ser humano.

En los dibujos adjuntos:

La Fig. 1(a) es una gráfica de la concentración de paracuat frente a la oxidación de NADPH y muestra los resultados del ejemplo de antecedente 1;

la Fig. 1(b) es una gráfica de la concentración de paracuat frente a nitrito y nitrato totales y muestra los resultados del ejemplo de antecedente 1;

la Fig. 1(c) es una gráfica del tiempo frente a la reducción anaeróbica de paracuat en términos de análisis espectrofotométrico a 600 nm y muestra los resultados del ejemplo de antecedente 1;

la Fig. 1(d) es una representación de Hanes de la actividad de paracuat reductasa de NOS1 de rata y muestra los resultados del ejemplo de antecedente 1;

la Fig. 2(a) es una gráfica del efecto del éster metílico de L-nitroarginina (L-NAME) y L-N-metilarginina (L-NMMA) sobre la oxidación de NADPH en presencia o ausencia de paracuat y muestra los resultados del ejemplo de antecedente 2;

la Fig. 2(b) es una gráfica del efecto de L-NAME y L-NMMA sobre el porcentaje de liberación de lactato deshidrogenasa (LDH) en presencia de paracuat y muestra los resultados del ejemplo de antecedente 2;

la Fig. 3(a) es una gráfica del logaritmo de la concentración de acetilcolina frente al porcentaje de contracción inicial en presencia de éster metílico de L-nitroarginina (L-NAME) o en ausencia de paracuat o en presencia de concentraciones crecientes de paracuat y muestra los resultados del ejemplo de antecedente 3;

la Fig. 3(b) es una gráfica del logaritmo de la concentración de NO frente al porcentaje de contracción inicial en presencia o ausencia de paracuat y muestra los resultados del ejemplo de antecedente 3;

la Fig. 4(a) es una gráfica del efecto de una mezcla de interferón ? y lipopolisacárido (Cytomix) sobre el porcentaje de liberación de LDH, en presencia o ausencia de paracuat, de células RAW y muestra los resultados del ejemplo de antecedente 4;

la Fig. 4(b) es una gráfica del efecto de Cytomix sobre la producción de nitrito más nitrato total de células RAW en presencia o ausencia de paracuat y muestra los resultados del ejemplo de antecedente 4;

la Fig. 4(c) es una gráfica de la concentración de NONOato de N,N-dietil-3-metilbenzamida (DETA) frente al porcentaje de liberación de LDH en presencia y ausencia de paracuat y muestra los resultados del ejemplo de antecedente 4;

la Fig. 4(d) es una gráfica de la concentración de NONOato de DETA frente a la concentración de nitrato más nitrito total en presencia y ausencia de paracuat y muestra los resultados del ejemplo de antecedente 4; y

la Fig. 5 es una gráfica del efecto de paracuat, Cytomix, NONOato y combinaciones de los mismos sobre la relación de aconitasa/fumarasa (evidencia de generación de superóxido).

En la explotación de la presente invención, se trata un paciente con una enfermedad caracterizada por células patológicamente proliferativas que contienen óxido nítrico sintasa administrando a dicho paciente una cantidad terapéuticamente eficaz (concretamente una cantidad eficaz para destruir células patológicamente proliferativas) del compuesto de dipiridinio y, en una alternativa, se administra también un agente que induce la expresión de óxido nítrico sintasa. Las células patológicamente proliferativas en el segundo aspecto de la invención son aquellas de tumores de gran malignidad (concretamente, tumores que son resistentes a agentes terapéuticos convencionales), por ejemplo, en sarcoma de Kaposi, cáncer de mama, melanoma, cáncer de pulmón, carcinomas escamosos incluyendo carcinomas de cabeza y cuello y adenocarcinoma, células leucémicas y tumores sólidos. En el primer aspecto de la invención, las células patológicamente proliferativas son aquellas de reestenosis, hipertrofia prostática benigna o hipertensión pulmonar. Los agentes que inducen la óxido nítrico sintasa incluyen agentes que alteran genéticamente las células patológicamente proliferativas (por ejemplo, transgenes o vectores víricos que contienen ADN que expresa óxido nítrico sintasa (NOS)), liposomas que contienen NOS, paracuat, citocinas, tamoxifeno, inhibidores de HMG CoA reductasa y estrógeno (para estimular la sobreexpresión de NOS). La inducción de óxido nítrico sintasa se lleva a cabo preferiblemente antes de la administración de los compuestos de dipiridinio cuando el agente con que se cuenta para inducir la óxido nítrico sintasa no es paracuat o se usa además de paracuat. El paracuat puede usarse para inducir la óxido nítrico sintasa y como compuesto de dipiridinio. Las citocinas adecuadas incluyen interferones, factor de necrosis tumoral e interleucinas. Las mismas dosificaciones y vías de administración usadas para citocinas para otros trastornos discutidos en el documento WO-A-0128568 (EP-A-1244460) son útiles aquí. En general, las dosificaciones de citocinas oscilan de 1 ng a 100 mg. La dosificación de tamoxifeno es de 10^-7 a 10^-4 M y la vía de administración es oral. Los inhibidores de HMG CoA...

1. El uso de un compuesto de dipiridinio en la fabricación de un medicamento para tratar un paciente con una enfermedad caracterizada por células patológicamente proliferativas que contienen óxido nítrico sintasa y seleccionada de reestenosis, hiperplasia prostática benigna e hipertensión pulmonar.

2. El uso de un compuesto de dipiridinio seleccionado de paracuat, dicuat y lucigenina en la fabricación de un medicamento para tratar un paciente con un tumor de gran malignidad en el que las células patológicamente proliferativas contienen óxido nítrico sintasa.

3. Un uso de la reivindicación 2, en el que el tumor de gran malignidad se selecciona de sarcoma de Kaposi, cáncer de mama, melanoma, cáncer de pulmón, carcinomas escamosos incluyendo carcinomas de cabeza y cuello y adenocarcinoma, células leucémicas y tumores sólidos.

4. Un uso de la reivindicación 1, en el que el compuesto de dipiridinio se selecciona de paracuat, dicuat y lucigenina.

5. Un uso de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el compuesto de dipiridinio es paracuat.

6. Un uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el compuesto de dipiridinio es dicuat o lucigenina.

7. Un uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el compuesto de dipiridinio no tiene un sustituyente acilamino.

8. Un uso de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el medicamento comprende adicionalmente un agente que induce la expresión de óxido nítrico sintasa.

9. Un uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que el medicamento es para uso con un agente que induce la expresión de óxido nítrico sintasa.

10. Un uso de la reivindicación 8 en el que dicho agente se selecciona de transgenes o vectores víricos que contienen ADN que expresa óxido nítrico sintasa (NOS), liposomas que contienen NOS, citocinas, tamoxifeno, inhibidores de HMG CoA reductasa y estrógeno.

11. Un uso de la reivindicación 9, en el que dicho agente se selecciona de transgenes o vectores víricos que contienen ADN que expresa óxido nítrico sintasa (NOS), liposomas que contienen NOS, paracuat, citocinas, tamoxifeno, inhibidores de HMG CoA reductasa y estrógeno.

12. Un uso de la reivindicación 9 o la reivindicación 11, en el que el medicamento es para administración después de dicho agente y el agente no es paracuat.

13. Un compuesto de dipiridinio para uso en el tratamiento de un paciente con una enfermedad caracterizada por células patológicamente proliferativas que contienen óxido nítrico sintasa y seleccionada de reestenosis, hiperplasia prostática benigna e hipertensión pulmonar.

14. Un compuesto de dipiridinio seleccionado de paracuat, dicuat y lucigenina para uso en el tratamiento de un paciente con un tumor de gran malignidad en el que las células patológicamente proliferativas contienen óxido nítrico sintasa.

15. Un compuesto de la reivindicación 14, en el que el tumor de gran malignidad se selecciona de sarcoma de Kaposi, cáncer de mama, melanoma, cáncer de pulmón, carcinomas escamosos incluyendo carcinomas de cabeza y cuello y adenocarcinoma, células leucémicas y tumores sólidos.

16. Un compuesto de la reivindicación 13, en el que el compuesto de dipiridinio se selecciona de paracuat, dicuat y lucigenina.

17. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 13 a 16, en el que el compuesto de dipiridinio es como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7 y/o el compuesto se usa con un agente como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 8 a 12.