USO DE CICLOLIGNANOS ESPECIFICOS.

El uso de un compuesto de la fórmula I ** ver fórmula**en la que R1,

que puede ser igual o diferente, es OH o OCH3, n es 0, 1 ó 2, R2 es OH, y R3 y R4 juntos son un éter o una lactona, y en la que los carbonos de las posiciones 9 y 9'' tienen una configuración cis y los enlaces 8-9 y 8''-9'' son enlaces beta, para la preparación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de un sarcoma de Ewing, glioblastoma, carcinoma de próstata, carcinoma de mama, cáncer gástrico, carcinoma pancreático, cáncer ovárico y carcinoma endometrial

Uso de ciclolignanos específicos.

La presente invención se refiere al uso de ciclolignanos específicos que inhiben el receptor del factor de crecimiento similar a la insulina 1, el IGF-1R, para el tratamiento de tipos de cáncer específicos, dependientes de IGF-1R.

Antecedentes de la invención

El receptor del factor de crecimiento similar a la insulina 1 (IGF-1R) desempeña un papel importante en la proliferación, la protección contra la apoptosis y la transformación de las células malignas. El IGF-1R es importante también para el mantenimiento del fenotipo maligno de las células tumorales, y está implicado en la protección de las células tumorales frente a la terapia antitumoral. En contraste, el IGF-1R no parece ser un requerimiento absoluto para el crecimiento celular normal.

El IGF-1R consiste en dos subunidades a extracelulares idénticas que son responsables de la unión del ligando, y dos subunidades ß idénticas con un dominio transmembrana y un dominio de tirosina quinasa intracelular. La interacción ligando-receptor da como resultado la fosforilación de los residuos de tirosina del dominio de tirosina quinasa, que se extiende desde el aminoácido 973 hasta el aminoácido 1229 de la subunidad ß. Los sitios principales de fosforilación son las tirosinasa agrupadas en las posiciones 1131, 1135 y 1136 (LeRoith, D., et al., Endocr Rev, abril de 1995; 16(2), 143-63). Tras la autofosforilación, la quinasa del receptor fosforila proteínas intracelulares, como el sustrato del receptor de insulina 1 y Shc, que activan las rutas de señalización de la fosfatidilinositol-3 quinasa y de la proteína quinasa activada por mitógenos, respectivamente.

Basándose en el papel central del IGF-1R en las células malignas, se hace más y más evidente que IGF-1R es un objetivo para la terapia del cáncer (Baserga, R., et al., Endocrine Vol. 7, nº 1, 99-102, agosto de 1997). Una estrategia para interferir en la actividad de IGF-1R es inducir la inhibición selectiva de la tirosina quinasa de IGF-1R. Sin embargo, hoy en día no hay disponibles inhibidores selectivos de IGF-1R.

Los fármacos que contienen el ciclolignano notablemente tóxico podofilotoxina se han usado durante siglos, y sus propiedades antineoplásicas han atraído un interés particular. Los efectos secundarios indeseados de la podofilotoxina han evitado, sin embargo, su uso como fármaco antineoplásico. El mecanismo de la citotoxicidad de la podofilotoxina se ha atribuido a su unión a la ß-tubulina, que conduce a la inhibición del ensamblaje de los microtúbulos y la detención de la mitosis. Se ha demostrado que es necesaria la conformación trans del anillo de lactona de la podofilotoxina para la unión a la ß-tubulina. En contraste, su estereoisómero picropodofilotoxina, que tiene una configuración cis en el anillo de lactona, tiene un efecto inhibidor 50 veces menor sobre la polimerización de los microtúbulos, y una DL50 35 veces mayor en ratas. Debido al bajo efecto anti-microtúbulo de la picropodofilotoxina, este compuesto ha atraído poco interés. Durante las últimas décadas, el interés principal sobre los derivados de podofilotoxina ha concernido al etopósido, que es un derivado de etiliden glucósido de 4'-desmetil-epi-podofilotoxina. El etopósido, que no tiene efecto sobre los microtúbulos, es un inhibidor de la topoisomerasa II, y actualmente se usa como tal en la terapia del cáncer.

Estado de la técnica

Varios inhibidores sintéticos de tirosina quinasas, es decir, tirfostinas, han sido estudiados por Párrizas, M., et al., Endocrinology 1997, Vol. 138, Nº 4, 1427-1433. El IGF-1R es un miembro de la familia de receptores de tirosina quinasa, que también incluye los receptores de insulina, de factor de crecimiento epidérmico (EGF), de factor de crecimiento nervioso (NGF), y de factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF). Todas las tirfostinas activas en el IGF-1R tienen una reacción cruzada con el receptor de insulina, aunque dos de ellas mostraron una preferencia moderada por IGF-1R. Por lo tanto, se propuso que podría ser posible diseñar y sintetizar moléculas pequeñas capaces de discriminar entre ellos.

Los inhibidores competitivos por el sustrato de la quinasa del receptor de IGF-1 se discuten en Blum, G., et al. en Biochemistry 2000, 39, 15705-15712. Se informa de varios compuestos ejemplares como inhibidores de la quinasa de IGF-1R aislada. La búsqueda de estos compuestos estuvo asistida por el conocimiento de la estructura tridimensional del dominio de quinasa del receptor de insulina, que es homólogo en un 84% respecto del dominio de quinasa del IGF-1R. El inhibidor más potente hallado fue tirfostina AG 538, con una CI50 de 400 nM. Sin embargo, dicho inhibidor bloqueó también la quinasa del receptor de insulina.

Kanter-Lewensohn, L., et al., Mol Cell Endocr 165 (2000), 131-137, investigaron si el efecto citotóxico de tamoxifeno (TAM) sobre las células de melanoma podría depender de la interferencia con la expresión o la función del receptor del factor de crecimiento similar a la insulina 1. Se descubrió que, aunque TAM no tuvo un efecto intenso sobre la unión de IGF-1 y la expresión de IGF-1R en la superficie celular, TAM bloqueó de manera eficaz la fosforilación de tirosinas de la subunidad ß de IGF-1R.

The Chemistry of Podophyllum, de J. L. Hartwell et al., Fortschritte der Chemie organischer Naturstoffe 15, 1958, 83-166, proporciona una visión de conjunto de la podofilotoxina y de los diferentes derivados de la misma, derivados comercialmente de dos especies de plantas, Podophyllum peltatum y Podophyllum emodi.

En general, se ha considerado que la picropodofilina es biológicamente inactiva, Ayres, D. C., y Loike, J. D., Lignans. Chemical, biological and clinical properties. Cambridge University Press, Cambridge, 1990.

Objetivos de la invención

El objetivo de la invención es hallar métodos nuevos para el tratamiento de tipos de cáncer específicos, dependientes de IGF-1R, por medio de una inhibición de la tirosina quinasa del receptor del factor de crecimiento similar a la insulina 1.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 muestra un modelo informático de un péptido de 12 aminoácidos que comprende las tirosinas 1131, 1135 y 1136 del receptor de IGF-1.

La Figura 2A muestra las fórmulas estructurales de los compuestos picropodofilina y podofilotoxina.

La Figura 3 es un diagrama que muestra el efecto de la picropodofilina sobre la fosforilación de tirosinas de diferentes receptores.

La Figura 4 es un diagrama que muestra el efecto de la picropodofilina sobre la autofosforilación de IGF-1R.

Las Figuras 5A y 5B son diagramas que muestran el efecto de respuesta a dosis de la picropodofilina sobre la viabilidad de 4 líneas celulares diferentes. La Figura 5A muestra el efecto sobre una línea de células de melanoma, FM 55, y una línea de células de sarcoma, RD-ES, respectivamente, y la Figura 5B muestra el efecto sobre dos líneas celulares manipuladas, R- y P6.

La Figura 6A es un diagrama que muestra el efecto de la picropodofilina sobre el peso tumoral en ratones.

Descripción de la invención

Se analizó la estructura tridimensional de una secuencia de 12 aminoácidos del dominio de tirosina de IGF-1R, que incluía los residuos de tirosina de las posiciones 1131, 1135 y 1136, mediante el uso de un programa informático para hallar compuestos que tuvieran la capacidad de imitar los residuos de tirosina e interferir en la fosforilación de los mismos. Así se descubrió, al usar un péptido de 12 aminoácidos, que dos de las tres tirosinas claves, es decir, 1135 y 1136, que se tienen que autofosforilar en IGF-1R para la activación, podían llegar a situarse a 0,95 nm (9,5 Å) entre sí, y que el ángulo aparente entre estos grupos era de alrededor de 60º. La configuración de dicha secuencia se muestra en la Figura 1. Esta corta distancia no se ha observado para las tirosinas correspondientes en el receptor de insulina. La Figura 1 representa también la estructura espacial de podofilotoxina y picropodofilina.

La modelización molecular demostró que una molécula inhibidora podría consistir en dos anillos de benceno separados por un solo átomo de carbono. Cuando se probó con un puente de dos carbonos, la distancia entre los sustituyentes de los anillos de benceno fue demasiado grande, alrededor de 1,3 nm (13 Å).

Los sustituyentes que correspondían a los grupos hidroxilo...

1. El uso de un compuesto de la fórmula I

en la que R₁, que puede ser igual o diferente, es OH o OCH₃, n es 0, 1 ó 2, R₂ es OH, y R₃ y R₄ juntos son un éter o una lactona, y en la que los carbonos de las posiciones 9 y 9' tienen una configuración cis y los enlaces 8-9 y 8'-9' son enlaces beta, para la preparación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de un sarcoma de Ewing, glioblastoma, carcinoma de próstata, carcinoma de mama, cáncer gástrico, carcinoma pancreático, cáncer ovárico y carcinoma endometrial.

2. El uso según la reivindicación 1 de un compuesto en el que el anillo de benceno está en posición a.

3. El uso según la reivindicación 1 ó 2 de un compuesto que tiene la fórmula II.

en la que R₂ se define como en la fórmula I, que es picropodofilina.

4. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que el nivel plasmático del compuesto se mantiene a una concentración de 0,05-5,0 µM.

5. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en el que el compuesto se usa en combinación con un citostático.

6. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-5 para la preparación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de un sarcoma de Ewing.

7. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-5 para la preparación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de un glioblastoma.

8. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-5 para la preparación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de un carcinoma de próstata.

9. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-5 para la preparación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de un carcinoma de mama.

10. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-5 para la preparación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de un cáncer gástrico.

11. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-5 para la preparación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de un carcinoma pancreático.

12. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-5 para la preparación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de un cáncer ovárico.

13. El uso según cualquiera de las reivindicaciones 1-5 para la preparación de un medicamento para la profilaxis o el tratamiento de un carcinoma endometrial.