Preparación de celulasa que comprende uno o más agentes tensioactivos no iónicos junto con la(s) proteína(s) (a) y/o (b) tal como se describe a continuación:

a)una proteína que comprende una secuencia de aminoácidos tal como se muestra en cualquiera de las SEQ ID NOS: 1 a 6, y

b)una proteína que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene un 80% o más de homología con la secuencia de aminoácidos tal como se muestran en cualquiera de las SEQ ID NOS: 1 a 6, y que tiene actividad endoglucanasa,

caracterizada porque el o los agentes tensioactivos no iónicos son los únicos agentes tensioactivos presentes

Preparación de celulasa que contiene agentes tensioactivos no iónicos y procedimiento para tratar fibras.

Campo de la técnica

La presente invención se refiere a una preparación de celulasa que comprende uno o más agentes tensioactivos no iónicos mediante los cuales se mejora la actividad de la endoglucanasa, a un detergente que comprende la preparación de celulasa, así como a un procedimiento para tratar tejidos donde se emplea la preparación de celulasa.

Antecedentes de la técnica

La celulasa posee tres tipos de actividades enzimáticas: la actividad de la celobiohidrolasa, que hidroliza las regiones cristalinas sólidas de la celulosa a partir del extremo no reducido de una forma exo para generar la celobiosa; la actividad endoglucanasa, que hidroliza las regiones amorfas de la celulosa de forma endo para convertir las moléculas de celulosa en moléculas de bajo peso molecular y para generar diversos tipos de celooligosacáridos; y la actividad ß-glucosidasa, que descompone la celobiosa o el celooligosacárido en glucosa. De entre las enzimas, cuando la endoglucanasa ejerce una gran actividad, la celulasa se utiliza ventajosamente para tratar tejidos.

Para conferir ciertas propiedades deseadas a un tejido que contiene celulosa, convencionalmente el tejido se trata con celulasa. Por ejemplo, en la industria textil, se lleva a cabo el tratamiento con celulasa para mejorar el tacto y el aspecto del tejido que contiene celulosa o para conferir un aspecto de lavado a la piedra al tejido de color que contiene celulosa, proporcionando así al tejido una variación localizada de colores (Patente EP Nº 307.564).

Es conocido que, debido al lavado repetido, en los tejidos de color que contienen celulosa se forman pelusas y esto difumina el color del tejido coloreado. Un detergente que contiene celulosa elimina estas pelusas y hace que el color del tejido sea nítido (clarificación del color) (Patente EP Nº 220.016) y, por tanto, en el mercado, principalmente en Europa y Estados Unidos, actualmente se pueden encontrar detergentes que contienen celulasa.

En dicho procesamiento textil se utiliza esencialmente celulasa procedente de hongos de la putrefacción de la madera, tales como Trichoderma y Humicola. Tal celulasa se utiliza en forma de una mezcla que comprende múltiples componentes de celulasa y que se obtiene mediante el procesamiento de un filtrado de un cultivo de microorganismos que tienen actividad celulolítica. Recientemente, sin embargo, con el fin de mejorar el coste, se ha utilizado una preparación de celulasa obtenida mediante aislamiento de los componentes de la celulasa, solamente la endoglucanasa que actúa en gran medida en el tratamiento de los tejidos, y que la mejora genéticamente. Ejemplos de dicha endoglucanasa de alta actividad incluyen: EGV (Publicación de Patente JP (Traducción PCT) Nº 5-509223) y NCE4 (WO 98/03640), procedente de Humicola insolens, que actúa rotundamente sobre los tejidos de algodón; RCE I, RCE II y RCE III derivadas de Rhizopus oryzae, que actúa fuertemente sobre los tejidos de lyocell; MCE I y MCE II procedentes de Mucor circinelloides; y PCE I procedente de Phycomyces nitens (WO 00/24879).

Con el fin de mejorar los efectos de la celulasa, también se ha intentado utilizar de forma combinada aditivos. Por ejemplo, la Publicación de Patente JP (Traducción PCT) Nº 5-507615 describe un polímero soluble en agua, tal como polivinilpirrolidona, alcohol polivinílico y poliacrilamida, que intensifica los efectos de la celulasa procedente de Humicola insolens y mejora su actividad de eliminar pelusas en tejidos coloreados. Además, se sabe que la actividad CMCasa en la solución de cultivo de Trichoderma viride mejora con la adición de Tween 20 (Ooshima, H., y col., Biotechnology and Bioengineering).

Sin embargo, las celulasas utilizadas con los propósitos descritos anteriormente son todas muy caras. Por tanto, con el fin de lograr su aplicación en el ámbito industrial, se desea otra mejora de la actividad endoglucanasa de modo que los efectos anteriores de la celulasa puedan ejercerse de forma más eficaz.

Descripción de la invención

Es por tanto el objeto de la presente invención proporcionar una preparación de celulasa que tenga una actividad mejorada de la endoglucanasa, que se pueda utilizar con el propósito de poder llevar a cabo de manera eficaz y económica un tratamiento de los tejidos para mejorar los tejidos que contienen celulosa, tal como la eliminación de pelusas.

Como resultado de profundos estudios dirigidos al objeto anteriormente mencionado, los presentes inventores han descubierto que un agente tensioactivo no iónico intensifica los efectos de las endoglucanasas derivadas de Zigomicetos tales como RCE I, MCE I y PCE I, a velocidades mucho más altas que las endoglucanasas derivadas de Trichoderma o Humicola, llegando así a la presente invención.

Esto es, la presente invención se refiere a los siguientes puntos (1) a (3):

[1] Preparación de celulasa

La preparación de celulasa de la presente invención comprende endoglucanasa(s) procedente(s) de Zigomicetos y uno o más agentes tensioactivos no iónicos.

En la presente invención, se utiliza el término endoglucanasa en el sentido de endo-1,4-ß-glucanasa EC3.2.1.4, y ésta posee la actividad de hidrolizar los enlaces ß-1,4-glucopiranosil del ß-1,4-glucano.

Las endoglucanasas procedentes de Zigomicetos utilizadas en la presente invención incluyen endoglucanasas derivadas de Rhizopus sp., Phycomyces sp. o Mucor sp., específicamente proteínas RCE I, RCE II, RCE III, MCE I, MCE II y PCE I que tienen las secuencias de aminoácidos tal como se muestran en las SEQ ID NOS: 1 a 6, respectivamente, que se describen en la WO 00/24879.

RCE I, II y III proceden de la cepa CP96001 de Rhizopus oryzae depositada bajo los términos del Tratado de Budapest con el Instituto Nacional de Ciencia y Tecnología Industrial Avanzada, Institución Administrativa Independiente del Ministerio de Economía, Comercio e Industria, en AIST Tsukuba Central 6, Higashi 1-1-1, Tsukuba, Ibaraki, Japón (código postal 305-8566) [antiguo nombre: Instituto Nacional de Biociencia y Tecnología Humana, Agencia de Ciencia y Tecnología Industrial, antigua dirección: Higashi 1-1-3, Tsukuba, Ibaraki, Japón], con el nº de acceso FERM BP-6889, 21 de abril de 1997. MCE I y II proceden de la cepa CP99001 de Mucor circinelloides, depositada con la misma autoridad depositaria internacional, es decir el Instituto Nacional de Ciencia y Tecnología Industrial Avanzada, Institución Administrativa Independiente del Ministerio de Economía, Comercio e Industria, en AIST Tsukuba Central 6, Higashi 1-1-1, Tsukuba, Ibaraki, Japón (código postal 305-8566) [antiguo nombre: Instituto Nacional de Biociencia y Tecnología Humana, Agencia de Ciencia y Tecnología Industrial, antigua dirección: Higashi 1-1-3, Tsukuba, Ibaraki, Japón], con el nº de acceso FERM BP-6890, 2 de julio de 1999. Además, PCE I procede de la cepa CP99002 de Phycomyces nitens, depositada con la misma autoridad depositaria internacional, con el nº de acceso FERM BP-6891, 2 de julio de 1999.

En la presente invención, las proteínas RCE I, RCE II, RCE III, MCE I, MCE II y PCE I indicadas anteriormente incluyen proteínas modificadas y homólogos de las mismas. El término proteína modificada utilizado aquí se refiere a una proteína que contiene una secuencia de aminoácidos que comprende una adición, inserción, deleción o sustitución de uno o más aminoácidos (por ejemplo, de uno a varias decenas, específicamente de uno a aproximadamente cincuenta, preferentemente de uno a aproximadamente treinta y especialmente de uno a aproximadamente nueve aminoácidos) con respecto a la secuencia de aminoácidos de cada una de...

1. Preparación de celulasa que comprende uno o más agentes tensioactivos no iónicos junto con la(s) proteína(s) (a) y/o (b) tal como se describe a continuación:

caracterizada porque el o los agentes tensioactivos no iónicos son los únicos agentes tensioactivos presentes.

2. Preparación de celulasa que comprende uno o más agentes tensioactivos no iónicos junto con proteína(s) codificada(s) por un gen que comprende el ADN (a) o (b) tal como se describe a continuación:

caracterizada porque el o los agentes tensioactivos no iónicos son los únicos agentes tensioactivos presentes.

3. Preparación de celulasa según la reivindicación 1 que consiste en no o más agentes tensioactivos no iónicos junto con la(s) proteína(s) (a) y/o (b) tal como se describe a continuación:

y opcionalmente excipiente(s) y/o conservante(s).

4. Preparación de celulasa según la reivindicación 2 que consiste en agente(s) tensioactivo(s) no iónico(s) junto con proteína(s) codificadas por un gen que comprende el ADN (a) o (b) tal como se describe a continuación:

y opcionalmente excipiente(s) y/o conservante(s).

5. Preparación de celulasa según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque el agente tensioactivo noiónico es alquil éter de polioxietileno, alquilfenil éter de polioxietileno, polioxietilen éster de ácido monograso, polioxietilensorbitan éster de ácido monograso, sorbitan éster de ácido monograso, polietilenglicol, glicerol éster de ácido monograso, poligicerol éster de ácido graso, alquilglicósido, alquilglicósido ésteres polietoxilados, óxido de alquil dimetil amina, dietanolamidas de ácidos grasos, polioxietilen alquilamina, polímero de tetraetilenglicol con ácido tereftálico, alquil polietilenglicol éter, nonilfenol polietilenglicol éter o éster de ácidos grasos de sacarosa o glucosa.

6. Preparación de celulasa según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 que comprende del 0,1 al 50% en peso de agente(s) tensioactivo(s) no iónico(s).

7. Preparación de celulasa según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, que es un gránulo no pulverulento o un líquido estabilizado.

8. Composición detergente que comprende la preparación de celulasa según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 con componentes detergentes.

9. Procedimiento para tratar tejidos que comprende el tratamiento de tejidos que contienen celulosa con la preparación de celulasa o con la composición detergente según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para mejorar las propiedades de los tejidos.

10. Procedimiento según la reivindicación 9, caracterizado porque la mejora de las propiedades del tejido es la clarificación del color.

11. Procedimiento según la reivindicación 9, caracterizado porque la mejora de las propiedades del tejido es la eliminación de pelusas.

12. Procedimiento según la reivindicación 9, caracterizado porque la mejora de las propiedades del tejido consiste en proporcionar un aspecto y una textura del tipo lavado a la piedra.

13. Procedimiento según la reivindicación 9, caracterizado porque la mejora de las propiedades del tejido es la mejora del tacto y del aspecto.

14. Procedimiento según la reivindicación 9, caracterizado porque la mejora de las propiedades del tejido es la suavización del tejido.

15. Procedimiento según la reivindicación 9, caracterizado porque el(los) agente(s) tensioactivo(s) no iónico(s) está(n) presentes en una concentración de 10 a 10.000 mg/l en un sistema de reacción.

16. Procedimiento según la reivindicación 9, caracterizado porque se lleva a cabo por medio de una etapa de remojo, lavado o enjuague del tejido.