Un compuesto, N-((1R,2S,5R)-5-(isopropil(metil)amino)-2-((S)-2-oxo-3-(6-(trifluorometil)quinazolin-4-ilamino)pirrolidin-1-il)ciclohexil)acetamida,

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo

Moduladores de la actividad del receptor de quimiocina, formas cristalinas y procedimientos.

Campo de la invención

La presente invención proporciona N-((1R,2S,5R)-5-(isopropil(metil)amino)-2-((S)-2-oxo-3-(6-(trifluorometil)quinazolin-4-ilamino)pirrolidin-il)ciclohexil)acetamida o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, que tiene una combinación inesperada de características farmacológicas deseables. También se proporcionan las formas cristalinas de la presente invención. Las composiciones farmacéuticas que contienen las mismas y las mismas para su uso como agentes para el tratamiento de enfermedades inflamatorias, alérgicas, autoinmunes, metabólicas, cáncer y/o enfermedades cardiovasculares también es un objetivo de la presente invención.

Antecedentes de la invención

Las quimiocinas son citoquinas quimiotácticas, de peso molecular 6-15 kDa, que se liberan mediante una gran variedad de células para atraer y activar, entre otros tipos celulares, macrófagos, linfocitos T y B, eosinófilos, basófilos y neutrófilos (revisado en: Charo y Rasonhoff, New Eng. J. Med. 2006, 354, 610-621; Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445 y Rollins, Blood 1997, 90, 909-928). Hay dos clases principales de quimiocinas. CXC y CC, dependiendo de si las dos primeras cisteínas en la secuencia de aminoácidos están separadas mediante un único aminoácido (CXC) o son adyacentes (CC). Las quimiocinas CXC, tales como interleucina-8 (IL-8), la proteína activadora de neutrófilos-2 (NAP-2) y la proteína de actividad estimuladora del crecimiento de melanomas (MGSA) son quimiotácticos primariamente para neutrófilos y linfocitos T, mientras que las quimiocinas CC, tales como RANTES, MIP-1a, MIP-1ß, las proteínas quimiotácticas de monocitos (MCP-1, MCP-2, MCP-3, MCP-4 y MCP-5) y las eotaxinas (-1 y -2) son quimiotácticas para, entre otros tipos celulares, macrófagos, linfocitos T, eosinófilos, células dendríticas, y basófilos. También existen las quimiocinas linfotactina-1, linfotactina-2 (ambas quimiocinas C) y fractalquina (una quimiocina CX₃C) que no se clasifican en ninguna de las subfamilias de quimiocinas principales.

Las quimiocinas se unen a receptores específicos de la superficie celular que pertenecen a la familia de proteínas de siete dominios transmembrana acopladas a proteínas G (revisado en: Horuk, Trends Pharm. Sci. 1994, 15, 159-165) que se denominan "receptores de quimiocinas". En la unión a sus ligandos afines, los receptores de quimiocina transducen una señal intracelular aunque las proteínas G triméricas asociadas, que producen, entre otras respuestas, un rápido aumento en la concentración de calcio intracelular, cambios en la forma celular, expresión aumentada de moléculas de adhesión celular, desgranulación y promoción de la migración celular. Hay al menos diez receptores de quimiocinas humanos que se unen o responden a las quimiocinas CC con los siguientes patrones de características (revisado en Zlotnik y Oshie Immunity 2000, 12, 121): CCR-1 (o "CKR-1" o "CC-CKR-1") [MIP-1a, MCP-3, MCP-4, RANTES] (Ben-Barruch, y col., Cell 1993, 72, 415-425, y Luster, New Eng. J. Med, 1998, 338, 436-445); CCR-2A y CCR-2B (o "CKR-2A7"/"CKR-2B" o "CC-CKR-2A7" "CC-CKR-2B") [MCP-1, MCP-2, MCP-3, MCP-4, MCP-5] (Charo. y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1994, 91, 2752-2756, y Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445); CCR-3 (o "CKR-3" o "CC-CKR-3") [eotaxina-1, eotaxina-2, RANTES, MCP-3, MCP-4] (Combadiere, y col., J. Biol. Chem. 1995, 270, 16491-16494, y Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445); CCR-4 (o "CKR-4" o "CC-CKR-4") [TARC, MDC] (Power, y col., J. Biol. Chem. 1995, 270,19495-19500, y Luster, New Eng. J. Med. 1998, 338, 436-445); CCR-5 (o "CKR-5" o "CC-CKR-5") [MIP-1a, RANTES. MIP-1ß] (Sanson, y col., Biochemistry 1996, 35, 3362-3367); CCR-6 (o "CKR-6" o "CC-CKR-6") [LARC] (Baba, y col., J. Biol. Chem. 1997, 272, 14893-14898); CCR-7 (o "CKR-7" o "CC-CKR-7") [ELC] (Yoshie y col., J. Leukoc. Biol. 1997, 62, 634-644); CCR-8 (o "CKR-8" o "CC-CKR-8") [1-309] (Napolitano y col, J. Immunol, 1996, 157, 2759-2763); CCR-10 (o "CKR-10" o "CC-CKR-10") [MCP-1, MCP-3] (Bonini, y col., DNA y Cell Biol. 1997, 16, 1249-1256); y CCR-11 [MCP-1, MCP-2, y MCP-4] (Schweickert, y col., J. Biol. Chem. 2000, 275, 90550).

Además de los receptores de quimiocinas de mamíferos, los citomegalovirus de mamíferos, los herpesvirus y los poxvirus han mostrado que expresan, en células infectadas, proteínas con las propiedades de unión de los receptores de quimiocinas (revisado en: Wells y Schwartz, Curr. Opin. Biotech. 1997, 8, 741-748). Las quimiocinas CC humanas, tales como RANTES y MCP-3, pueden producir movilización rápida del calcio mediante estos receptores codificados viralmente. La expresión de receptores puede ser permisiva para la infección teniendo en cuenta la subversión de la supervivencia y la respuesta normal del sistema inmune frente a la infección. Adicionalmente, los receptores de quimiocinas humanos, tales como CXCR4, CCR2, CCR3, CCR5 y CCR8, pueden actuar como correceptores para la infección de células de mamíferos mediante microbios como con, por ejemplo, los virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).

Las quimiocinas y sus receptores afines se han implicado como mediadores importantes de los trastornos y enfermedades inflamatorios, infecciosos e inmunorreguladores, incluyendo el asma y las enfermedades alérgicas; así como patologías autoinmunes tales como artritis reumatoide y esclerosis múltiple y enfermedades metabólicas, tales como ateroesclerosis y diabetes (revisado en: Charo y Rasonhoff, New Eng. J. Med. 2006, 354, 610-621; Z. Gao y W. A. Metz, Chem. Rev. 2003, 103, 3733; P. H. Carter, Current Opinion in Chemical Biology, 2002, 6, 510; Trivedi, y col., Ann. Reports Med. Chem. 2000, 35, 191; Sanders y Tarby, Drug Disc. Today 1999, 4, 80; Premack y Schall, Nature Medicine 1996,2,1174). Por ejemplo, la quimiocina quimioatractante de monocitos 1 (MCP-1) y su Receptor 2 de Quimiocina CC (CCR-2) desempeñan una función esencial en la atracción de leucocitos a sitios de inflamación y en la posterior activación de estas células. Cuando la quimiocina MCP-1 se une a CCR-2, esto induce un rápido aumento en la concentración de calcio intracelular, expresión aumentada de moléculas de adhesión celular y la promoción de la migración de leucocitos. La demostración de la importancia de la interacción MCP-1/CCR-2 se ha proporcionado mediante experimentos con ratones modificados genéticamente. Los ratones MCP-1 -/- fueron incapaces de reclutar monocitos en sitios de inflamación después de varios tipos diferentes de desafíos inmunes (Bao Lu, y col., J. Exp. Med. 1998, 187, 601). De la misma manera, los ratones CCR-2-/ no fueron capaces de reclutar monocitos o producir interferón-? cuando se les expuso a varios agentes exógenos; además, los leucocitos de ratones nulos para CCR-2 no migraron en respuesta a MCP-1 (Landin Boring, y col., J. Clin. Invest. 1997, 100, 2552), por tanto demostraron la especificidad de la interacción MCP-1/CCR-2. Otros dos grupos tuvieron resultados equivalentes indicados de manera independiente con diferentes cepas de ratones CCR-2 -/- (William A. Kuziel, y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997, 94, 12053, y Takao Kurihara, y col., J. Exp. Med. 1997, 186, 1757). La viabilidad y generalmente la salud normal de animales MCP-1 -/- y CCR-2 -/- es digna de mención, ya que la alteración de la interacción MCP-1/CCR2 no induce la crisis fisiológica. En conjunto, estos datos conducen a la conclusión de que las moléculas que bloquean las acciones de MCP-1/CCR2 serían útiles en el tratamiento de varios trastornos inflamatorios y autoinmunes (revisado en: M. Feria y F. Diaz-Gonzalez, Exp. Opin. Ther. Patents 2006, 16, 49; y J. Dawson. W. Miltz, y C. Wiessner, C. Exp. Opin. Ther. Targets 2003, 7, 35). Esta hipótesis no se ha validado en varios modelos de enfermedad animales diferentes, como se divulga posteriormente.

Se sabe que MCP-1 está sobreregulado en pacientes con artritis reumatoide (Alisa Koch, y col., J. Clin. Invest. 1992, 90, 772 - 779). Además, varios estudios preclínicos han demostrado en valor terapéutico potencial del antagonismo de la interacción MCP-1/CCR2 en el tratamiento de la artritis reumatoide. Una vacuna de ADN que codifica MCP-1 se mostró recientemente que mejoraba la artritis crónica inducida por poliadyuvantes en ratas (Sawsan Youssef, y col., J. Clin. Invest. 2000, 106, 361). De la misma manera, los síntomas de la enfermedad se podrían controlar mediante la administración directa de anticuerpos para MCP-1 para ratas con artritis inducida por colágeno (Hiroomi Ogata, y col., J. Pathol. 1997, 182, 106) o artritis inducida por la pared celular de estreptococos...

1. Un compuesto, N-((1R,2S,5R)-5-(isopropil(metil)amino)-2-((S)-2-oxo-3-(6-(trifluorometil)quinazolin-4-ilamino)pirrolidin-1-il)ciclohexil)acetamida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Un compuesto de la reivindicación 1 que es una fórmula cristalina de N-((1R,2S,5R)-5-(isopropil(metil)amino)-2-((S)-2-oxo-3-(6-(trifluorometil)quinazolin-4-ilamino)pirrolidin-1-il)ciclohexil)acetamida o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

3. La forma cristalina de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 caracterizada por parámetros de celdilla unitaria sustancialmente iguales a los siguientes:

Dimensiones de la celdilla:

a = 11,8427 (3)

b = 18,1503 (7)

c = 12,7923 (4)

a = 90

ß = 105,362 (2)

? = 90

Grupo espacial P2₁, Moléculas/unidad célula 2

en la que dicho cristal está a una temperatura de aproximadamente +22ºC.

4. La forma cristalina de cualquiera de las reivindicaciones 1-3 caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo comprendiendo tres o más valores de 2? (CuKa ? = 1,541 Å) seleccionado de 7,2, 8,7, 9,7, 12,5, 12,8, 13,3, 16,0, 16,6, 18,2 y 18,8, a una temperatura de aproximadamente 22ºC.

5. La forma cristalina de cualquiera de las reivindicaciones 1-4 además caracterizada por un patrón de difracción de rayos X en polvo comprendiendo cuatro o más valores de 2?(CuKa ? = 1,541 Å) seleccionado de un grupo constituido por 7,2, 8,7, 9,7, 12,5, 12,8, 13,3, 16,0, 16,6, 18,2 y 18,8, a una temperatura de aproximadamente 22ºC.

6. La forma cristalina de cualquiera de las reivindicaciones 1-5 caracterizada por coordienadas atómicos fraccionales sustancialmente como se indica en la Tabla 7.

7. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-6 y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

8. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6 para su uso en terapia.

9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 8 para su uso en el tratamiento de una enfermedad seleccionada de diabetes, obesidad, síndrome metabólico, accidente cerebrovascular, dolor neuropático, cardiomiopatía isquémica, psoriasis, hipertensión, esclerodermia, osteoartritis, aneurisma, fiebre, enfermedad cardiovascular, enfermedad de Crohn, fallo cardiaco congestivo, enfermedades autoinmunes, infección por VIH, demencia asociada a VIH, psoriasis, fibrosis pulmonar idiopática, arteriosclerosis de trasplante, trauma cerebral inducido física o químicamente, enfermedad inflamatoria del intestino, alveolitis, colitis, lupus sistémico eritomatoso, nefritis por suero nemotóxico, glomerulonefritis, asma, esclerosis múltiple, aterosclerosis, vasculitis, placas vulnerables, artritis reumatoide, reestenosis, hiperplasia neointimal venosa, hiperplasia neointimal de inserción de diálisis, hiperplasia intimal de derivación arteriovenosa, trasplante de órganos, neuropatía de aloinjerto crónico y cáncer.

10. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 8 o la reivindicación 9 para su uso en el tratamiento de una enfermedad se selecciona de diabetes, obesidad, enfermedad de Crohn, lupus sistémico eritomatoso, glomerulonefritis, esclerosis múltiple, aterosclerosis, reestenosis y trasplante de órganos.

11. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 8 a 10 para su uso en el tratamiento de una enfermedad seleccionada de esclerosis múltiple, aterosclerosis, enfermedad de Crohn y diabetes.