Se ha descubierto una ruta de transmisión vertical madre-hijo de herpesvirus humanos que permite desarrollar un modelo animal útil para identificar compuestos potencialmente útiles en el tratamiento y/o prevención de infecciones y enfermedades causadas por herpesvirus humanos.

El método para identificar tales compuestos comprende infectar experimentalmente una hembra de un animal no-humano con herpesvirus humanos, antes o después de la administración del compuesto a ensayar, cruzarla con un macho de la misma especie y analizar la presencia de herpesvirus humanos en la progenie y/o determinar el efecto de dicho compuesto sobre la progenie o la madre. Alternativamente, en lugar de a la madre, se pueden administrar los compuestos a ensayar a los descendientes portadores de herpesvirus humanos y analizar el efecto ejercido sobre tales animales

Método para identificar compuestos terapéuticamente útiles para el tratamiento y/o prevención de infecciones y enfermedades causadas por herpesvirus humanos.

Campo de la invención

La invención se relaciona con un método para la identificación de compuestos potencialmente útiles para la prevención y/o el tratamiento de infecciones y enfermedades causadas por herpesvirus humanos que comprende el empleo de un modelo animal desarrollado a partir de la transmisión vertical de herpesvirus humanos en dicho modelo animal.

Antecedentes de la invención

Los herpesvirus son miembros de la familia Herpesviridae. Estos virus son grandes, tienen un genoma DNA de doble cadena (dsDNA) de aproximadamente 80-250 kilobases (kb) y se encuentran en un amplio rango de sistemas hospedadores. Se han aislado unos 100 herpesvirus aproximadamente en distintas especies animales incluida la especie humana.

Hasta la fecha, se han descrito 8 herpesvirus humanos: virus herpes simplex tipo 1 (HSV-1), virus herpes simplex tipo 2 (HSV-2), virus de la varicella zoster (VZV), citomegalovirus (CMV), herpesvirus humano 6 (HHV-6), herpesvirus humano 7 (HHV-7), virus de Epstein-Barr (EBV) y herpesvirus de Kaposi (HHV-8). Estos herpesvirus humanos se agrupan, a su vez, en varias sub-familias. Los miembros de la sub-familia de los alfa-herpesvirus humanos (HSV-1, HSV-2 y VZV) son neurotropos mientras que los miembros de la sub-familia de los gamma-herpesvirus humanos (EBV y HHV-8) son linfotropos. CMV, HHV-6 y HHV-7 pertenecen a la sub-familia de los beta-herpesvirus humanos. Cada uno de dichos herpesvirus humanos está relacionado con una enfermedad humana, por ejemplo, el herpes labial y genital (HSV-1 y HSV-2), varicela (VZV), mononucleosis infecciosa y carcinoma de nasofaringe (EBV), neumonía y retinitis (CMV), exantema súbita (HHV-6 y HHV-7) y sarcoma de Kaposi (HHV-8).

Tras la infección primaria, habitualmente en edad pediátrica, los herpesvirus establecen latencia en las células hospedadoras específicas del individuo infectado y permanecen en él durante el resto de su vida pudiendo originar, en ocasiones, infecciones secundarias. Las infecciones primarias con herpesvirus a menudo difieren en sus manifestaciones clínicas de las infecciones secundarias o recurrentes. Tanto las infecciones primarias como recurrentes de herpesvirus pueden llegar a infectar el sistema nervioso central (SNC) y causar una enfermedad en cualquier momento. De hecho, el HSV-1, un virus neurotropo que infecta aproximadamente al 90% de la población adulta mundial, es el virus más común que infecta tejido nervioso de neonatos, niños y adultos asociado con diversas enfermedades neurológicas y alteraciones neuropatológicas tales como encefalitis humana severa, enfermedad de Alzheimer, demencia del boxeador, demencia asociada al virus de la inmunodeficiencia humana (HIV) y parálisis cerebral. Tras la infección primaria, mediante transporte inverso axonal, el HSV-1 llega al SNC y establece un estado latente. Posteriormente, el virus puede reactivarse en respuesta a distintos estímulos y mediante un transporte anterógrado llega al área de infección primaria, causando lesiones mucocutáneas recurrentes.

Aunque algunas manifestaciones clínicas causadas por los herpesvirus humanos no son malignas, existen patologías que potencialmente comprometen la vida del individuo, tales como la encefalitis y las infecciones generalizadas de neonatos. De hecho, la encefalitis causada por HSV-1 y VZV ha sido ampliamente descrita y tiene una incidencia anual de, aproximadamente, 1 a 4 casos por millón de personas. La ausencia de tratamiento adecuado puede resultar en un desenlace fatal o puede dejar graves secuelas. Por otra parte, la encefalitis neonatal causada por herpesvirus humanos es una enfermedad devastadora que normalmente sucede como consecuencia de la transmisión perinatal del HSV-2. En pacientes inmunocompetentes de más de 3 meses, meningitis, meningoencefalitis y mielitis se han asociado, a menudo, con el HSV-2.

El tratamiento de las infecciones causadas por herpesvirus humanos se realiza típicamente con agentes antivirales, tales como aciclovir, cidofovir, famciclovir, ganciclovir, penciclovir, valaciclovir o foscarnet, siendo el aciclovir el fármaco de elección en la profilaxis y tratamiento de infecciones sistémicas de herpesvirus humanos. No obstante, estos fármacos, en general, tienen una biodisponibilidad relativamente baja y son potencialmente tóxicos.

Aunque se dispone de fármacos antivirales para la profilaxis y tratamiento de las infecciones y enfermedades causadas por herpesvirus humanos, sigue existiendo la necesidad de encontrar nuevos compuestos útiles para el tratamiento y/o prevención de las infecciones causadas por dichos virus. En este sentido, modelos animales susceptibles de ser utilizados en investigaciones relacionadas con herpesvirus humanos constituirían una valiosa herramienta para evaluar compuestos potencialmente útiles en el tratamiento y/o prevención de las infecciones y enfermedades causadas por herpesvirus humanos.

Tang y colaboradores (Tang et al. 2002. Arch. Virol. 147: 1189-95) describen un modelo de ratón de la infección por CMV humano inherente al SNC con el fin de estudiar infecciones congénitas por CMV en humanos en el SNC y proporcionar así investigación básica para la preparación de una vacuna humana para CMV.

Compendio de la invención

Ahora se ha encontrado una nueva ruta de transmisión de herpesvirus humanos que permite desarrollar un modelo animal útil para identificar compuestos potencialmente terapéuticos, en particular, compuestos potencialmente útiles en el tratamiento y/o prevención de infecciones y enfermedades causadas por herpesvirus humanos. En particular, en base a la nueva ruta de transmisión vertical madre-hijo de herpesvirus se ha desarrollado un modelo animal útil para ensayar compuestos con el fin de identificar compuestos potencialmente profilácticos o terapéuticos. Este modelo, que comprende infectar experimentalmente una hembra de un animal no-humano con herpesvirus humanos, antes o después de la administración del compuesto a ensayar, cruzarla con un macho de la misma especie y analizar la presencia de herpesvirus humanos en la progenie y/o determinar el efecto de dicho compuesto sobre la progenie o la madre (hembra de animal no-humano infectada con un herpesvirus humano). Alternativamente, en lugar de a la madre, se pueden administrar los compuestos a ensayar a los descendientes portadores de herpesvirus humanos y analizar el efecto ejercido sobre tales animales.

Un método como el proporcionado por esta invención permite (i) identificar compuestos potencialmente útiles para evitar la transmisión vertical del virus de la madre a la progenie, que podrían ser utilizados como vacunas o como agentes antivirales, así como (ii) evaluar compuestos potencialmente útiles para el tratamiento o prevención de infecciones y enfermedades causadas por herpesvirus humanos y/o para el tratamiento de los síntomas clínicos asociados con tales enfermedades, que podrían ser utilizados, por ejemplo, como agentes antivirales, neuroprotectores, anti-neurodegenerativos, etc.

El modelo animal desarrollado en esta invención, basado en el descubrimiento de la transmisión vertical madre-hijo de herpesvirus humanos, permite replicar de forma consistente y reproducible la infección causada por herpesvirus humanos, en particular, el neurotropismo que presentan algunos herpesvirus humanos, por lo que puede ser utilizado para ensayar compuestos potencialmente terapéuticos para el tratamiento y/o prevención de infecciones y enfermedades causadas por herpesvirus humanos.

Por tanto, en un aspecto, la invención se relaciona con un método para identificar un compuesto potencialmente terapéutico que comprende infectar experimentalmente una hembra de un animal no-humano con herpesvirus humanos, antes o después de la administración del compuesto a ensayar, cruzarla con un macho de su misma especie y analizar la presencia de herpesvirus humanos en la progenie y/o determinar su efecto sobre la progenie.

Un método alternativo para identificar un compuesto potencialmente terapéutico comprende infectar experimentalmente una hembra de un animal no-humano con herpesvirus humanos, cruzarla con un macho de su misma especie, seleccionar los descendientes portadores de herpesvirus humanos, administrar el compuesto a ensayar a dichos descendientes y determinar el efecto producido por el compuesto a ensayar sobre dichos descendientes portadores de herpesvirus humanos.

En otro aspecto, la invención se relaciona con un método...

1. Un método para identificar un compuesto potencialmente terapéutico que comprende las etapas de:

en donde las etapas a) y b) se realizan en cualquier orden.

2. Método según la reivindicación 1, en el que la etapa a) se realiza antes que la etapa b).

3. Método según la reivindicación 1, en el que la etapa b) se realiza antes que la etapa a).

4. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicho animal no-humano es un pez o un mamífero no-humano.

5. Método según la reivindicación 4, en el que dicho mamífero no-humano se selecciona entre un roedor, un primate y un suido.

6. Método según la reivindicación 5, en el que dicho roedor se selecciona entre un ratón, una rata y una cobaya.

7. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicho herpesvirus humano se selecciona entre virus herpes simplex tipo 1 (HSV-1), virus herpes simplex tipo 2 (HSV-2), virus de la varicella zoster (VZV), citomegalovirus (CMV), herpesvirus humano 6 (HHV-6), herpesvirus humano 7 (HHV-7), virus de Epstein-Barr (EBV) y herpesvirus de Kaposi (HHV-8), y sus mezclas.

8. Método según la reivindicación 1, en el que la determinación del efecto del compuesto ensayado sobre dicha progenie infectada con un herpesvirus humano comprende analizar la carga viral y/o llevar a cabo la realización de, al menos, un análisis o estudio seleccionado entre (1) análisis de comportamiento, (2) estudios de imagen, (3) análisis citogenéticos y (4) estudios neuropatológicos.

9. Un método para obtener un animal no-humano portador de herpesvirus humanos que comprende las etapas de:

10. Un método para producir un animal no-humano portador de herpesvirus humanos que comprende las etapas de:

11. Método según la reivindicación 10, en el que dicho segundo animal se selecciona entre un animal MOCK y un animal no-humano portador de herpesvirus humanos.