FRAGMENTOS DE ARNT SINTETASA.

Un procedimiento para purificar un fragmento de ARNt sintetasa,

que comprende realizar una etapa de filtración para la reducción de endotoxinas después de realizar una etapa de aclarado y antes de realizar al menos una de las etapas seleccionadas entre: una etapa de intercambio de tampón; una etapa de concentración; y una etapa de cromatografía de intercambio catiónico, en el que dicha etapa de cromatografía de intercambio catiónico comprende el uso de una resina de intercambio catiónico, en el que dicha resina se selecciona entre: CM Sepharose, SP Sepharose y DEAE Sepharose

Tipo: Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: W05002180IB.

Solicitante: ANGIOSYN, INC.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 235 EAST 42ND STREET,NEW YORK NY 10017.

Inventor/es: GLIDDEN,PAUL,F.

Fecha de Publicación: .

Fecha Concesión Europea: 21 de Octubre de 2009.

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A61K38/53 SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE.A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L;   composiciones a base de jabón C11D). › A61K 38/00 Preparaciones medicinales que contienen péptidos (péptidos que contienen ciclos beta-lactama A61K 31/00; dipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina 2,5-dionas, A61K 31/00; péptidos basados en la ergolina A61K 31/48; que contienen compuestos macromoleculares que tienen unidades aminoácido repartidas estadísticamente A61K 31/74; preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos A61K 39/00; preparaciones medicinales caracterizadas por los ingredientes no activos, p. ej. péptidos como soportes de fármacos, A61K 47/00). › Ligasas (6).
  • C12N9/00L

Clasificación PCT:

  • A61K38/53 A61K 38/00 […] › Ligasas (6).
  • A61P17/02 A61 […] › A61P ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS O DE PREPARACIONES MEDICINALES.A61P 17/00 Medicamentos para el tratamiento de problemas dermatológicos. › para tratar heridas, úlceras, quemaduras, cicatrices, queloides o similares.
  • A61P17/06 A61P 17/00 […] › para el tratamiento de la psoriasis.
  • A61P19/02 A61P […] › A61P 19/00 Medicamentos para el tratamiento de problemas del esqueleto. › para problemas de las articulaciones, p.ej. artritis, artrosis.
  • A61P35/00 A61P […] › Agentes antineoplásicos.
  • A61P7/02 A61P […] › A61P 7/00 Medicamentos para el tratamiento de trastornos de la sangre o del fluido extracelular. › Agentes antitrombóticos; Anticoagulantes; Inhibidores de la agregación plaquetaria.

Clasificación antigua:

  • A61K38/53 A61K 38/00 […] › Ligasas (6).
  • A61P17/02 A61P 17/00 […] › para tratar heridas, úlceras, quemaduras, cicatrices, queloides o similares.
  • A61P17/06 A61P 17/00 […] › para el tratamiento de la psoriasis.
  • A61P19/02 A61P 19/00 […] › para problemas de las articulaciones, p.ej. artritis, artrosis.
  • A61P35/00 A61P […] › Agentes antineoplásicos.
  • A61P7/02 A61P 7/00 […] › Agentes antitrombóticos; Anticoagulantes; Inhibidores de la agregación plaquetaria.

Fragmento de la descripción:

Fragmentos de ARNt sintetasa.

Referencias cruzadas

La presente solicitud es una continuación en parte de la Solicitud de Estados Unidos Nº 11/019.969 presentada el 20 de diciembre de 2004, que es una continuación en parte de la Solicitud de Estados Unidos Nº 10/962.218 presentada el 7 de octubre de 2004; la presente solicitud también es una continuación en parte de la Solicitud de Estados Unidos Nº 10/980.866 presentada el 2 de noviembre de 2004, que es una continuación en parte de la Solicitud de Estados Unidos Nº 10/961.529 presentada el 7 de octubre de 2004; la presente solicitud también reivindica la prioridad de la Solicitud Provisional de Estados Unidos Nº 60/598.019 presentada el 2 de agosto de 2004 y las Solicitudes de Estados Unidos Nº 10/962.171, 10/962.217, 10/962.058, 10/961.528, 10/962.375, 10/962.062, 10/962.218, 10/961.529, 10/961.526 y 10/961.486, todas las cuales se presentaron el 7 de octubre de 2004.

Antecedentes

El crecimiento tisular normal, que se produce durante el desarrollo embrionario, la curación de las heridas y el ciclo menstrual se caracteriza por la dependencia de la formación de nuevos vasos sanguíneos para el suministro de oxígeno y nutrientes, así como la eliminación de los productos de desecho. La angiogénesis es el nombre que se da al desarrollo de nuevos capilares a partir de vasos sanguíneos preexistentes. El alcance de la angiogénesis está determinado por el equilibrio entre los factores proangiogénicos y los factores anti-angiogénicos. Los factores proangiogénicos incluyen, aunque sin limitación, el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF), el factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), interleuquina-8 (IL-8), angiogenina, angiotropina, factor de crecimiento epidérmico (EGF), factor de crecimiento de células endoteliales derivado de plaquetas, factor de crecimiento transformante a (TGF-a), factor de crecimiento transformante ß (TGF-ß) y óxido nítrico. Los factores anti-angiogénicos incluyen, aunque sin limitación, trombospondina, angiostatina y endostatina.

Aunque en la mayoría de los tejidos normales el equilibrio favorece a los factores anti-angiogénicos y está inhibida la angiogénesis, muchas afecciones pueden manifestarse después de un cambio a un fenotipo estimulante de angiogénesis. Tales afecciones angiogénicas incluyen, aunque sin limitación, degeneración macular relacionada con la edad (AMD), cáncer (tanto sólido como hematológico), anormalidades del desarrollo (organogénesis), ceguera diabética, endometriosis, neovascularización ocular, psoriasis, artritis reumatoide (AR), decoloraciones de la piel (por ejemplo, hemangioma, nevus flammeus o nevus simplex) y curación de las heridas.

Es deseable identificar composiciones y procedimientos que modulen o inhiban la angiogénesis.

Sumario de la invención

Composiciones de y procedimientos de purificación para agentes terapéuticos bajos en endotoxinas

La presente invención se refiere a procedimientos para purificar agentes terapéuticos, es decir, Fragmentos de ARNt Sintetasa de modo que estén sustancialmente libres de endotoxinas. También se presentan en el presente documento preparaciones adecuadas para administración terapéutica que comprenden un agente farmacéutico, en las que las preparaciones están sustancialmente libres de endotoxinas. Tales preparaciones se pueden usar en una diversidad de aplicaciones terapéuticas, incluyendo, aunque sin limitación, aplicaciones en la terapia de cánceres, aplicaciones en la terapia de trastornos neovasculares, aplicaciones en la inhibición de la angiogénesis y aplicaciones en la terapia de afecciones oftálmicas.

En una realización, la presente invención se refiere a preparaciones farmacéuticas adecuadas para la administración a un ser humano que comprenden un agente farmacéutico y un vehículo farmacéuticamente aceptable donde la cantidad de endotoxinas en la preparación farmacéutica es menos de aproximadamente 10 unidades de endotoxina por miligramo de agente farmacéutico. En una realización, el agente farmacéutico es un polipéptido.

En otro aspecto, la presente invención se refiere a preparaciones farmacéuticas adecuadas para la administración a un ser humano que comprenden un polipéptido y un vehículo farmacéuticamente aceptable en las que la cantidad de endotoxina en la preparación farmacéutica es menos de aproximadamente 10 unidades de endotoxina por miligramo de polipéptido.

En otro aspecto, la presente descripción se refiere a preparaciones farmacéuticas adecuadas para uso en terapia oncológica o administración oftálmica en un ser humano que comprenden un polipéptido y un vehículo farmacéuticamente aceptable donde la cantidad de endotoxinas en la preparación farmacéutica es menos de aproximadamente 10 unidades de endotoxina por miligramo de polipéptido.

En uno cualquiera de los aspectos mencionados anteriormente, el polipéptido se sintetiza de forma recombinante. En otro de estos aspectos el polipéptido se produce en y se recupera de una célula procariota transformada o su progenie. En otro aspecto, el polipéptido se produce en y se recupera de una célula eucariota transformada o su progenie. En otro aspecto, el polipéptido se produce en y se recupera del citoplasma de la célula eucariota transformada o su progenie. En otro aspecto, el polipéptido puede modular la angiogénesis. En otro aspecto, el polipéptido se puede usar para tratar degeneración macular, retinopatía diabética u otras enfermedades o afecciones asociadas con neovascularización ocular no deseada. En otro aspecto, el polipéptido tiene un punto isoeléctrico de menos de aproximadamente 8,0. En otro aspecto, el polipéptido tiene un punto isoeléctrico entre aproximadamente 5,5 y aproximadamente 8,0. En otro aspecto, el polipéptido tiene un punto isoeléctrico entre aproximadamente 6,0 y aproximadamente 7,5. En otro aspecto, el polipéptido comprende una hendidura hidrófoba y en un perfeccionamiento adicional de este aspecto, el polipéptido tiene también un punto isoeléctrico de menos de aproximadamente 8,0.

El polipéptido es preferiblemente parte de una triptófano ARNt sintetasa. En uno cualquiera de los aspectos mencionados anteriormente, la preparación comprende un T2-TrpRS o un homólogo del mismo.

En una realización, la presente invención se refiere a procedimientos para purificar cualquiera de los polipéptidos o agentes farmacéuticos mencionados anteriormente, que comprenden realizar una etapa de filtración para la reducción de endotoxinas después de realizar una etapa de aclarado y antes de realizar una etapa de intercambio de tampón. Además, la etapa de filtración para la reducción de endotoxinas se puede realizar antes de realizar una etapa de cromatografía de intercambio catiónico. Como alternativa, la etapa de filtración para la reducción de endotoxinas se puede realizar antes de realizar una etapa de concentración.

En otra realización, la presente invención se refiere a procedimientos para purificar cualquiera de los polipéptidos o agentes farmacéuticos mencionados anteriormente, que comprenden realizar una etapa de filtración para la reducción de endotoxinas después de realizar una etapa de aclarado y antes de realizar una etapa de concentración. Además, la etapa de filtración para la reducción de endotoxinas se puede realizar antes de realizar una etapa de cromatografía de intercambio catiónico. Como alternativa, la etapa de filtración para la reducción de endotoxinas se puede realizar antes de realizar una etapa de intercambio de tampón.

En otra realización, la presente invención se refiere a procedimientos para purificar cualquiera de los polipéptidos o agentes farmacéuticos mencionados anteriormente, que comprenden realizar una etapa de filtración para la reducción de endotoxinas después de realizar una etapa de aclarado y antes de realizar una etapa de cromatografía de intercambio catiónico. Como alternativa, la etapa de filtración para la reducción de endotoxinas se puede realizar antes de realizar una etapa de concentración. Como alternativa, la etapa de filtración para la reducción de endotoxinas se puede realizar antes de realizar una etapa de intercambio de tampón.

En otra realización, la presente invención se refiere a procedimientos para purificar cualquiera de los polipéptidos o agentes farmacéuticos mencionados anteriormente en los que se realiza una etapa de filtración para la reducción de endotoxinas antes de realizar una etapa de concentración y antes de realizar una etapa de cromatografía de intercambio catiónico y antes de una...

 


Reivindicaciones:

1. Un procedimiento para purificar un fragmento de ARNt sintetasa, que comprende realizar una etapa de filtración para la reducción de endotoxinas después de realizar una etapa de aclarado y antes de realizar al menos una de las etapas seleccionadas entre: una etapa de intercambio de tampón; una etapa de concentración; y una etapa de cromatografía de intercambio catiónico, en el que dicha etapa de cromatografía de intercambio catiónico comprende el uso de una resina de intercambio catiónico, en el que dicha resina se selecciona entre: CM Sepharose, SP Sepharose y DEAE Sepharose.

2. El procedimiento de la reivindicación 1 en el que dicho procedimiento no incluye el uso de un desnaturalizante.

3. Un procedimiento para purificar un fragmento de ARNt sintetasa que comprende realizar una etapa de filtración para la reducción de endotoxinas después de realizar una etapa de cromatografía de intercambio aniónico en el que dicha etapa de cromatografía de intercambio aniónico comprende el uso de una resina de intercambio aniónico, en el que dicha resina se selecciona entre Q Sepharose, DEAE Sepharose y ANX Sepharose.

4. El procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en el que dicho fragmento de ARNt sintetasa se selecciona entre el grupo constituido por SEC ID Nº: 12, 13, 14, 15, 16, 17, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 48, 49, 50, 51, 52 y 53.


 

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