CONSTRUCCIONES PARA LA EXPRESION CONTROLADA DE GENES RECOMBINANTES EN CELULAS PROCARIOTAS.
Procedimiento de producción de una proteína recombinante de interés cuyo gen se pone bajo el control del promotor Ptrp del operón triptófano,
caracterizado porque comprende las etapas siguientes: a) transformar una célula procariota mediante un vector que contiene una secuencia de ácidos nucleicos que, cuando dicha secuencia de ácidos nucleicos se introduce en dicha célula huésped, modifica el gen que codifica la TnaA triptofanasa de la célula huésped, de tal manera que esta modificación provoca la pérdida de la actividad de triptofanasa de dicha célula huésped, siendo el producto de expresión de dicho gen modificado incapaz de degradar el triptófano en indol, y a la integración de dicha secuencia en el ADN de dicha célula huésped; y, previa, posterior o simultáneamente, introducir en dicha célula procariota todo o parte de la secuencia de un promotor seguido en 3 de una secuencia de ácidos nucleicos que codifica una molécula de naturaleza ribonucleotídica o proteica, y que actúa negativamente sobre el promotor de Ptrp o su producto de transcripción, siendo dicha molécula de naturaleza ribonucleotídica, y que actúa negativamente en el promotor de Ptrp seleccionada entre las secuencias siguientes: siendo dicha molécula de naturaleza proteica, y que actúa negativamente sobre el promotor de Ptrp, elegida de la secuencia que codifica el aporrepresor TrpR del operón triptófano de dicha célula huésped o uno de sus fragmentos biológicamente activos que ha conservado su actividad represora; b) transformar dicha célula procariota mediante un vector que contiene un gen que codifica dicha proteína recombinante de interés; c) cultivar dicha célula transformada en un medio de cultivo que permite la expresión de la proteína recombinante; y d) recuperar la proteína recombinante a partir del medio de cultivo o de dicha célula transformada.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: PIERRE FABRE MEDICAMENT.
Nacionalidad solicitante: Francia.
Dirección: 45, PLACE ABEL GANCE,92100 BOULOGNE-BILLANCOURT.
Inventor/es: CHEVALET, LAURENT, ROBERT, ALAIN, BONNEFOY, JEAN-YVES, NGUYEN, THIEN, NGOC.
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 14 de Abril de 1999.
Fecha Concesión Europea: 25 de Enero de 2006.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N15/71 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Sistemas de expresión que utilizan secuencias reguladoras derivadas del operón trp.
- C12N9/88 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Liasas (4.).
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Finlandia, Chipre, Oficina Europea de Patentes.
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