Fenilpiruvato descarboxilasa modificada genéticamente, procedimientos de preparación y usos de la misma.

Un procedimiento para modificar genéticamente un microorganismo,

que comprende

(A) seleccionar un microorganismo que produce un 2-cetoácido C7-C11; y

(B) insertar una secuencia de ácido nucleico no nativa que codifica al menos uno de:

i. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende la mutación F385L, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

ii. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende la mutación M461C, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

iii. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende la mutación M461V, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

iv. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende la mutación M461L, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

v. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende la mutación F532V y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

vi. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende la mutación F532L, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

vii. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende la mutación Q536G, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

viii. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende la mutación Q536A, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

ix. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende la mutación Q536L, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

x. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende la mutación Q536I, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

xi. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende la mutación Q536V, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

xii. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende las mutaciones F532V y Q536V, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

xiii. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende las mutaciones M380V y M461V, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

xiv. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende las mutaciones F385L y M461V, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

xv. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende las mutaciones F532A y Q536V y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

xvi. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende las mutaciones F532V y Q536A, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

xvii. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende las mutaciones F385L y Q536V, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

xviii. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende las mutaciones M461L y Q536V, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

xix. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende las mutaciones M461A y Q536V, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

xx. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende las mutaciones M461V y F532V, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

xxi. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende las mutaciones F465L y Q536V, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

xxii. una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un 90 por ciento de homología con la SEQ ID 4 y que comprende las mutaciones M461V, F532V y Q536V, y que tiene actividad fenilpiruvato descarboxilasa;

de modo que una fenilpiruvato descarboxilasa no nativa se expresa en el microorganismo.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2015/064879.

Solicitante: Dow Global Technologies LLC.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 2040 DOW CENTER MIDLAND, MI 48674 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: SANGHANI,PARESH C, STOWERS,CHRISTOPHER C, RODRIGUEZ,BRANDON A, SHIUE,ERIC C, GREENWALT,SCOTT A.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N9/88 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.; Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Liasas (4.).
  • C12P5/02 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA.C12P 5/00 Preparación de hidrocarburos. › acíclicos.
  • C12P7/04 C12P […] › C12P 7/00 Preparación de compuestos orgánicos que contienen oxígeno. › acíclicos.
  • C12P7/24 C12P 7/00 […] › que contienen un grupo carbonilo.
  • C12P7/40 C12P 7/00 […] › que contienen un grupo carboxilo.
  • C12P7/64 C12P 7/00 […] › Grasas; Aceites; Ceras de tipo éster; Acidos grasos superiores, es decir, con una cadena lineal de al menos siete átomos de carbono unida a un grupo carboxilo; Aceites o grasas oxidadas.

PDF original: ES-2792853_T3.pdf

 

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