(08/11/2018) Un vector de expresión o una combinación de al menos dos vectores de expresión que comprende: a) un polinucleótido que codifica un receptor de folato mutado como marcador seleccionable, en el que el receptor de folato mutado es un receptor de folato unido a membrana funcional que tiene una disminución de la afinidad de unión al folato en comparación con el receptor de folato de tipo silvestre, en el que el receptor de folato mutado codificado es un receptor de folato mutado alfa que comprende una sustitución de alanina a leucina en la posición estructuralmente correspondiente o por homología de la secuencia de aminoácidos al aminoácido 49 de la secuencia del receptor de folato…

(13/12/2017) Un método in vitro de cribado de células por la expresión de una proteína de interés, comprendiendo dicho método las etapas de: a) transfectar las células mediante un vector de expresión que codifica: (i) una proteína quimérica Puro-DHFR que comprende una secuencia de aminoácidos idéntica al menos en un 95% a la SEQ ID NO: 2, comprendiendo dicha proteína quimérica Puro-DHFR un fragmento funcional de hidrofolato reductasa (DHFR) fusionado a un fragmento de puromicina N-acetil transferasa que confiere resistencia a la puromicina, en donde dicho fragmento de puromicina N-acetil transferasa muestra actividad de puromicina N-acetil transferasa; y dicho fragmento funcional de dihidrofolato reductasa muestra actividad…

(19/07/2017) Un método para producir un polipéptido recombinante de interés que comprende: a) obtener una población de células auxotróficas para un primer metabolito y un segundo metabolito, en el que dicho segundo metabolito es un aminoácido natural; b) introducir en células de dicha población una primera construcción de ácido nucleico que comprende un marcador de selección auxotrófica, en el que dicho marcador de selección auxotrófica comprende una primera secuencia de ácido nucleico que codifica al menos un polipéptido activo en la biosíntesis de dicho primer metabolito, y en el que la expresión de dicho marcador de selección auxotrófica restablece la prototrofia para el primer metabolito; c) introducir…

(20/05/2015) Un método de diseño de una cepa vacunal recombinante de Listeria para expresar un antígeno heterólogo, comprendiendo el procedimiento: poner en contacto una cepa de Listeria auxótrofa para la síntesis de D-alanina que comprende una mutación en un gen D-alanina racemasa y en un gen D-aminoácido transferasa en dicho cromosoma de Listeria con un plásmido, comprendiendo dicho plásmido: una primera secuencia de ácido nucleico que codifica un polipéptido que comprende un antígeno heterólogo, y una segunda secuencia de ácido nucleico que codifica una D-alanina racemasa, en el que dicho plásmido no confiere resistencia antibiótica a dicha cepa vacunal auxótrofa de Listeria, en el que dicha cepa auxótrofa…

(06/05/2015) Un vector plasmídico que contiene: (a) un promotor de la ARN polimerasa, ligado operablemente a un ADN que codifica una molécula de ARN infeccioso; y (b) una cola de poli-A en dirección 3' respecto a dicho ADN donde: (i) la molécula de ARN codifica un virus de la fiebre amarilla (YF) atenuado; y (ii) el promotor de la ARN polimerasa es adecuado para la expresión en células de mamífero.

(14/05/2014) LA INVENCION CONCIERNE A LA PRODUCCION Y APLICACION DE BANCOS DE GENES DE ANTICUERPOS HUMANOS (AK). PARTIENDO DE UNA MEZCLA DE LINFOCITOS-B HUMANOS, SU MRNA SE TRADUCIRA CON LA APLICACION DE OLIGOPRIMERES-DT EN CDNA. A CONTINUACION TIENE LUGAR UNA AMPLIFICACION DE LOS AK-ESPECIFICOS CDNA MEDIANTE LA REACCION DE CADENAS DE POLIMERASO (PCR, POLYMERASE CHAIN REACTION) BAJO LA APLICACION DE LAS CONVENIENTES SECUENCIAS PRIMER DE OLIGONUCLEOTIDAS. MEDIANTE LA EXPRESION DE ESTOS AK-ESPECIFICOS CDNA AMPLIFICADOS EN UN VECTOR DE EXPRESION BACTERIANO, COMO POR EJEMPLO EN SIGUIENTE VECTOR PFMT DESCRITO, EN E.COLI, ESTA ASI UNA BIBLIOTECA DE ANTICUERPOS HUMANOS CON UN EXTENSO REPERTORIO A DISPOSICION PARA EL EXAMEN (SCREENEN) CON ANTIGENOS SELECCIONADOS…

(05/09/2013) LA INVENCION TRATA DE PROCEDIMIENTOS PARA OPTIMIZACION DE LA EXPRESION GENICA EN CELULAS. UN PRIMER ASPECTO TRATA DE UN PROCEDIMIENTO PARA VARIAR LA EXPRESION DE UN GEN DIANA QUE SE ENCUENTRA DE MANERA ENDOGENA EN UNA CELULA EUCARIOTICA MEDIANTE LA INTERRUPCION DE UNA SECUENCIA HETEROLOGA DE CONTROL DE EXPRESION EN EL GENOMA DE LA CELULA MEDIANTE UNA RECOMBINACION HOMOLOGA, ASI COMO LA SEPARACION DEL DNA EXTRAÑO INSERTADO MEDIANTE UNA RECOMBINASA ESPECIFICA DE LUGAR Y SU SUSTITUCION MEDIANTE OTRAS SECUENCIAS HETEROLOGAS DE CONTROL DE EXPRESION Y/O GENES DE AMPLIFICACION. ADEMAS TRATA LA INVENCION DE LA INTRODUCCION DE UNA O VARIAS SECUENCIAS DE ACIDO NUCLEICO, A LAS CUALES SE UNE UNA PROTEINA DE UN ACTIVADOR O UN COMPLEJO DE PROTEINA DE ACTIVADOR, P. E. UN…

(22/05/2013) Procedimiento para producir una proteína, caracterizado por cultivar células transformadas que comprendenuna célula animal que contiene un vector de expresión que contiene un gen de resistencia a inhibidor de síntesis deproteínas de los siguientes (i) o (ii) y un gen estructural de proteína foránea en estado expresable y recoger laproteína foránea expresada, (i) que puede conferir resistencia a cicloheximida como inhibidor de síntesis de proteínas a células animalesderivadas de un mamífero sensible al inhibidor y codifica para una secuencia de aminoácidos tal como se codificapor el ADN de SEQ ID NO: 1, o (ii) que puede conferir resistencia a cicloheximida como inhibidor de síntesis de proteínas a células animalesderivadas de un mamífero sensible al inhibidor y codifica para una proteína homóloga al 90% o más a una proteínatal como se describió en (i)…

(23/05/2012) Composición que comprende moléculas de eritropoyetina recombinantes que comprenden glicanos N-unidos, caracterizada porque el número promedio de estructuras de lewis-X en glicanos N-unidos por molécula de eritropoyetina es al menos de 2, 7.

(31/05/2010) La invención describe un nuevo marcador de selección termoestable para la manipulación genética de bacterias del género Thermus spp., en particular, con un polinucleótido que, cuando se expresa, la proteína resultante proporciona a las bacterias del género Thermus spp. un fenotipo dependiente de estreptomicina, lo que tiene distintas aplicaciones en el campo de la biotecnología como marcador de selección de clonaje y expresión de genes de interés o en la deleción específica de genes

(13/04/2010) Procedimiento para la obtención de bibliotecas de anticuerpos humanos; caracterizado porque se aísla el ARNm a partir de linfocitos B humanos periféricos, no activados y se transcribe en el ADNc, a continuación se amplifica el ADNc, que codifica anticuerpos, por medio de una reacción en cadena de polimerasa RCP con ayuda de cebadores adecuados, llevándose a cabo a continuación una incorporación en plásmidos de expresión adecuados y a continuación se lleva a cabo la expresión del anticuerpo-ADNc en clones individuales, caracterizado porque la maqueta de los cebadores para la reacción inversa para la síntesis de la hebra, no codificante, del ADN de la cadena pesada está basada en secuencias de IgM y porque se posibilita, por medio del empleo de diversos cebadores para la síntesis de la hebra, no codificante, la obtención de un tipo de…

(01/06/2007) Un método para seleccionar células vegetales transformadas genéticamente a partir de una población de células, en el que las células vegetales genéticamente transformadas se transforman con una secuencia de nucleótidos expresable deseada que contiene una secuencia reguladora que permite su expresión en las células transformadas y una secuencia de nucleótidos expresable co-introducida que también contiene una secuencia reguladora que permite su expresión en las células transformadas, método que comprende suministrar a dicha población un compuesto que puede ser metabolizado por el producto de expresión de la secuencia de nucleótidos expresable co-introducida que se ha introducido con la secuencia de nucleótidos expresable deseada en dichas células transformadas, a fin de proporcionar a las células transformadas una ventaja fisiológica cuando se comparan…

(01/09/2006) LA INVENCION TRATA DE PROCEDIMIENTOS PARA OPTIMIZACION DE LA EXPRESION GENICA EN CELULAS. UN PRIMER ASPECTO TRATA DE UN PROCEDIMIENTO PARA VARIAR LA EXPRESION DE UN GEN DIANA QUE SE ENCUENTRA DE MANERA ENDOGENA EN UNA CELULA EUCARIOTICA MEDIANTE LA INTERRUPCION DE UNA SECUENCIA HETEROLOGA DE CONTROL DE EXPRESION EN EL GENOMA DE LA CELULA MEDIANTE UNA RECOMBINACION HOMOLOGA, ASI COMO LA SEPARACION DEL DNA EXTRAÑO INSERTADO MEDIANTE UNA RECOMBINASA ESPECIFICA DE LUGAR Y SU SUSTITUCION MEDIANTE OTRAS SECUENCIAS HETEROLOGAS DE CONTROL DE EXPRESION Y/O GENES DE AMPLIFICACION. ADEMAS TRATA LA INVENCION DE LA INTRODUCCION DE UNA O VARIAS SECUENCIAS DE ACIDO NUCLEICO, A LAS CUALES SE UNE UNA PROTEINA DE UN ACTIVADOR O UN COMPLEJO DE PROTEINA DE ACTIVADOR, P. E. UN FACTOR INDUCIBLE DE LA HIPOXIA (HIF), EN EL GENOMA DE UNA CELULA EUCARIOTICA MEDIANTE…

(01/08/2006) Polinucleótido que comprende: a) un gen seleccionable amplificable; b) un gen de proteína verde fluorescente (GFP); y c) una secuencia seleccionada que codifica un producto deseado, encontrándose la secuencia seleccionada unida operablemente al gen seleccionable amplificable o al gen GFP, y a un promotor, en la que el polinucleótido comprende una primera unidad transcripcional que comprende un primer promotor seguido de un intrón y la secuencia seleccionada; y una segunda unidad transcripcional que comprende un segundo promotor y un intrón en dirección 3’ respecto al segundo promotor; en el que el intrón en la primera unidad transcripcional es el primer intrón, y el intrón en la segunda unidad transcripcional es el segundo intrón, y en la que cada uno…

(16/04/2006) Un método para caracterizar la actividad biológica de una muestra, comprendiendo el método: (a) la expresión de una secuencia de ADN en una célula, en la que la secuencia de ADN codifica una proteína o un polipéptido seleccionado del grupo que consta de: (i) una proteína fluorescente verde que tiene un sitio de reconocimiento de proteína quinasa, o (ii) una proteína fluorescente verde en la que uno o más aminoácidos han sido sustituidos, insertados o eliminados para proporcionar un dominio de unión de un segundo mensajero o un sitio de reconoci miento de un enzima, o (iii) un polipéptido híbrido de proteína fluores cente verde (GFP) o de una GFP modificada y un do minio de unión de un segundo mensajero o un sitio de reconocimiento de un enzima; y (b) la medida de la fluorescencia de dicha GFP en dicha célula en ausencia…

(01/12/2005) LA PRESENTE INVENCION TRATA DE UNA ESTRUCTURA DE TRAMPA DE GENES, QUE CONTIENE UN PRIMERO GEN MARCADOR, QUE SE PUEDE ACTIVAR MEDIANTE LA ACTIVACION DE UN SEGUNDO GEN MARCADOR, Y LA UTILIZACION DE ESTA ESTRUCTURA DE TRAMPA DE GENES PARA UNA IDENTIFICACION Y/O AISLAMIENTO DE GENES, EN PARTICULAR DE GENES QUE SE EXPRESAN DE MANERA TRANSITORIA. TAMBIEN TRATA LA PRESENTE INVENCION DE UNA CELULA, PREFERIBLEMENTE UNA CELULA DE MAMIFERO, QUE CONTIENE LA CITADA ESTRUCTURA DE TRAMPA DE GENES. TAMBIEN TRATA LA PRESENTE INVENCION DE LA UTILIZACION DE ESTAS CELULAS DE MAMIFERO PARA UNA IDENTIFICACION Y/O AISLAMIENTO DE GENES,…

(01/09/2004) Procedimiento para la introducción de un ADN ajeno en una célula hospedante mediante recombinación homóloga, siendo transfectada la célula hospedante con un vector recombinante, que abarca dos secuencias de nucleótidos flanqueadoras, homólogas con respecto a una secuencia diana en el genoma de la célula hospedante, dentro de las cuales se encuentra una secuencia de nucleótidos que codifica un marcador de selección positiva, y fuera de las secuencias flanqueadoras se encuentra una secuencia de nucleótidos que codifica un marcador de selección negativa, que están unidas operativamente en cada caso con una secuencia de control de la expresión, activa en la célula hospedante, caracterizado porque como gen…

(01/07/2004) LA UTILIZACION DE UN VECTOR DE DNA CIRCULAR PARA LA OBTENCION DE UN MEDICAMENTO PARA EL TRATAMIENTO TERAPEUTICO GENETICO DE MAMIFEROS O SERES HUMANOS, CONTENIENDO EL VECTOR DE DNA UN GEN MARCADOR DE SELECCION Y UNA SECUENCIA HETEROLOGA PARA EL VECTOR, QUE CAUSA UNA MODULACION, CORRECCION O ACTIVACION DE LA EXPRESION DE UN GEN ENDOGENICO O LA EXPRESION DE UN GEN INTRODUCIDO MEDIANTE EL VECTOR DE DNA EN LAS CELULAS DEL MAMIFERO O DEL SER HUMANO; ESTA UTILIZACION SE CARACTERIZA PORQUE EL ACIDO NUCLEICO DEL VECTOR A) ESTA AMPLIFICADO MEDIANTE PRESION SELECTIVA Y SE DIVIDE DE TAL MANERA, QUE EL CITADO GEN MARCADOR DE SELECCION Y EL CITADO DNA HETEROLOGO SE ENCUENTRAN EN FRAGMENTOS SEPARADOS DE DNA, B) EL FRAGMENTO DE DNA, QUE CONTIENE EL CITADO DNA HETEROLOGO,…

(01/01/2004) SE DESCRIBEN AQUI SECUENCIAS KOZAK DE CONSENSO COMPLETAMENTE DETERIORADO QUE SON MAS TIPICAMENTE EMPLEADAS CON MARCADORES SELECCIONABLES DOMINANTES DE CINTAS TRANSCRIPCIONALES QUE SON UNA PARTE DE UN VECTOR DE PRESENTACION. ESTOS VECTORES SE EMPLEAN MAS TIPICAMENTE EN LA PRESENTACION DE PROTEINAS EN SISTEMAS DE PRESENTACION MAMIFERO. AQUI, SE DEFINE, DESCRIBE Y RECLAMA, UNA SECUENCIA "KOZAK DE CONSENSO COMPLETAMENTE DETERIORADO" QUE COMPRENDE LA SECUENCIA (I), DONDE: "X" ES UN NUCLEOTIDO SELECCIONADO ENTRE UN GRUPO QUE CONSISTE EN ADENINA (A), GUANINA (G), CITOSINA (C) O TIMINA (T) / URACILO (U); "PY" ES UN NUCLEOTIDO DE PIRIMIDINA, ES DECIR C O TU; "ATG" ES UN CODON CODIFICADO POR METIONINA DE ACIDO AMINO, EL LLAMADO CODON ESTRELLA; Y -3 Y +1 SON PUNTOS DE REFERENCIA DIRECCIONALES RESPECTO A…

(16/06/2003) La invención se refiere a procedimientos para identificar organismos capaces de la degradación del fumonisin. El fumonisin se puede incorporar a un medio de cultivo para selección de organismos resistentes al fumonisin y/o capaz de crecer en el fumonisin como única fuente de carbono. Mediante este procedimiento se han identificado varios organismos. Estos organismos se pueden emplear para aislar enzimas y los genes responsables de conferir resistencia al fumonisin. El gen se puede clonar e insertar en un vector de expresión adecuado de forma que la proteína se pueda además caracterizar. Adicionalmente el DNA que codifica a las enzimas que degradan al fumonisin se puede emplear…