VECTORES DE EXPRESION Y PROCEDIMIENTOS.

Polinucleótido que comprende: a) un gen seleccionable amplificable;

b) un gen de proteína verde fluorescente (GFP); y c) una secuencia seleccionada que codifica un producto deseado, encontrándose la secuencia seleccionada unida operablemente al gen seleccionable amplificable o al gen GFP, y a un promotor, en la que el polinucleótido comprende una primera unidad transcripcional que comprende un primer promotor seguido de un intrón y la secuencia seleccionada; y una segunda unidad transcripcional que comprende un segundo promotor y un intrón en dirección 3 respecto al segundo promotor; en el que el intrón en la primera unidad transcripcional es el primer intrón, y el intrón en la segunda unidad transcripcional es el segundo intrón, y en la que cada uno del primer y segundo intrones se define mediante un sitio dador de splice (corte y empalme 5) y un sitio aceptor de splice (corte y empalme) 3 que proporcionan una eficacia de splicing (corte y empalme) de por lo menos el 95% según se determina mediante PCR cuantitativa; y en la que, (i) el gen seleccionable amplificable se encuentra situado en el primer intrón y se encuentra unido operablemente al primer promotor, y el gen de GFP se encuentra situado en el segundo intrón o en dirección 3 respecto al mismo y se encuentra unido operablemente al segundo promotor; o (ii) el gen de GFP se encuentra situado en el primer intrón y unido operablemente al primer promotor y el gen seleccionable amplificable se encuentra situado en la segunda unidad transcripcional y unido operablemente al segundo promotor.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: GENENTECH, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1 DNA WAY,SOUTH SAN FRANCISCO, CA 94080-.

Inventor/es: CHISHOLM, VANESSA, CROWLEY, CRAIG, W., KRUMMEN, LYNNE, A., MENG, YU-JU, G.

Fecha de Publicación: 1 de Agosto de 2006.

Fecha Solicitud PCT: 11 de Julio de 2000.

Fecha Concesión Europea: 1 de Febrero de 2006.

Clasificación Internacional de Patentes:

C07K14/435 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de animales; de humanos.
C07K14/71 C07K 14/00 […] › para factores de crecimiento; para reguladores de crecimiento.
C07K16/42 C07K […] › C07K 16/00 Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales. › contra inmunoglobulinas (anticuerpos anti-idiotípicos).
C12N15/10 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
C12N15/12 C12N 15/00 […] › Genes que codifican proteínas animales.
C12N15/62 C12N 15/00 […] › Secuencias de ADN que codifican proteínas de fusión.
C12N15/65 C12N 15/00 […] › utilizando marcadores (enzimas empleados como marcadores C12N 15/52).
C12N15/69 C12N 15/00 […] › Aumento del número de copias del vector.
C12N15/85 C12N 15/00 […] › para células animales.
C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Oficina Europea de Patentes, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania, Armenia, Azerbayán, Bielorusia, Ghana, Gambia, Kenya, Kirguistán, Kazajstán, Lesotho, República del Moldova, Malawi, Mozambique, Federación de Rusia, Sudán, Sierra Leona, Tayikistán, Turkmenistán, República Unida de Tanzania, Uganda, Zimbabwe, Burkina Faso, Benin, República Centroafricana, Congo, Costa de Marfil, Camerún, Gabón, Guinea, Malí, Mauritania, Niger, Senegal, Chad, Togo, Organización Regional Africana de la Propiedad Industrial, Swazilandia, Guinea-Bissau, Organización Africana de la Propiedad Intelectual, Organización Eurasiática de Patentes.

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