Promotor regulable.

Un método para producir una proteína de interés (PDI) mediante el cultivo de una línea de células eucariotas recombinantes que comprenden una construcción de expresión que comprende un promotor regulable y una molécula de ácido nucleico que codifica una PDI bajo el control transcripcional de dicho promotor,

que comprende las etapas de:

a) cultivar la línea de células con una fuente de carbono basal que reprime al promotor, en el que la fuente de carbono basal es una fuente de carbono adecuada para el crecimiento de las células,

b) cultivar la línea de células sin una fuente de carbono suplementaria, o con una cantidad limitada de esta, que desreprime al promotor para inducir la producción de la PDI a una tasa de transcripción de al menos 20%, comparado con el promotor pGAP nativo de la célula, y

c) producir y recuperar la PDI;

en el que el promotor se selecciona del grupo que consiste en:

(i) pG1 (SEQ ID NO:1), pG3 (SEQ ID NO:2), pG4 (SEQ ID NO:4), pG6 (SEQ ID NO:3), pG7 (SEQ ID NO:5), o pG8 (SEQ ID NO:6); y

(ii) una secuencia que comprende una secuencia de nucleótidos de al menos 200 pb y que tiene al menos 80% de identidad de secuencia con una cualquiera de pG1 (SEQ ID NO:1), pG3 (SEQ ID NO:2), pG4 (SEQ ID NO:4), pG6 (SEQ ID NO:3), pG7 (SEQ ID NO:5), o pG8 (SEQ ID NO:6); o con una parte de cualquiera de las anteriores con una longitud de al menos 200 pb.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2012/069757.

Solicitante: LONZA LTD..

Inventor/es: MAURER, MICHAEL, DR., KLEIN, JOACHIM, GASSER,BRIGITTE, MATTANOVICH,DIETHARD, PRIELHOFER,ROLAND, WENGER,JANA.

Fecha de Publicación: 8 de Noviembre de 2019.

Clasificación Internacional de Patentes:

C07K14/39 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de levaduras.
C07K14/395 C07K 14/00 […] › de Saccharomyces.
C07K16/00 C07K […] › Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales.
C12N15/63 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Introducción de material genético extraño utilizando vectores; Vectores; Utilización de huéspedes para ello; Regulación de la expresión.
C12N15/67 C12N 15/00 […] › Métodos generales para favorecer la expresión.
C12N15/81 C12N 15/00 […] › para levaduras.
C12N9/02 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Oxidorreductasas (1.), p. ej. luciferasa.
C12P21/00 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00).

PDF original: ES-2730173_T3.pdf

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