Método para reducir la amplificación de dímeros de cebadores.

Un método para reducir la amplificación de dímeros de cebadores en una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) múltiple,

que comprende las etapas de:

(a) obtener una primera secuencia de ácido nucleico que comprende una primera etiqueta (t1) y un primer cebador directo (F1) complementario a una cadena de un primer fragmento de ácido nucleico diana de doble cadena,

(b) obtener una segunda secuencia de ácidos nucleicos que comprende una segunda etiqueta (t2) y un primer cebador inverso (R1) complementario a la otra cadena del primer fragmento de ácido nucleico diana de doble cadena,

(c) obtener una tercera secuencia de ácidos nucleicos que comprende una tercera etiqueta (t3) y un segundo cebador directo (F2) complementario a una cadena de un segundo fragmento de ácido nucleico diana de doble cadena,

(d) obtener una cuarta secuencia de ácidos nucleicos que comprende la primera etiqueta (t1), un segundo cebador inverso (R2) complementario a la otra cadena del segundo fragmento de ácido nucleico diana de doble cadena, y una secuencia parcial del extremo 5' (F1^) o una secuencia completa del primer cebador directo (F1) entre la primera etiqueta (t1) y el segundo cebador inverso (R2), en el que el primer cebador directo (F1) y el segundo cebador inverso (R2) tienen una región complementaria en sus extremos 3', F1^ tiene 3-30 nucleótidos o 40-90% de la secuencia F1,

(e) mezclar el primer y el segundo fragmentos de ácido nucleico diana, la primera, la segunda, la tercera y la cuarta secuencias de ácidos nucleicos, y una cantidad efectiva de reactivos necesarios para realizar una reacción en cadena de la polimerasa (PCR); y

(f) realizar la PCR.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2016/037918.

Solicitante: Pillar Biosciences Inc.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 12 Michigan Drive Natick, Massachusetts 01760 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: SONG,GANG, WANG,ZHAOHUI.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C07H21/04 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07H AZUCARES; SUS DERIVADOS; NUCLEOSIDOS; NUCLEOTIDOS; ACIDOS NUCLEICOS (derivados de ácidos aldónicos o sacáricos C07C, C07D; ácidos aldónicos, ácidos sacáricos C07C 59/105, C07C 59/285; cianohidrinas C07C 255/16; glicales C07D; compuestos de constitución indeterminada C07G; polisacáridos, sus derivados C08B; ADN o ARN concerniente a la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos o su aislamiento, preparación o purificación C12N 15/00; industria del azúcar C13). › C07H 21/00 Compuestos que contienen al menos dos unidades mononucleótido que tienen cada una grupos fosfato o polifosfato distintos unidos a los radicales sacárido de los grupos nucleósido, p. ej. ácidos nucleicos. › con desoxirribosilo como radical sacárido.
  • C12P19/34 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA.C12P 19/00 Preparación de compuestos que contienen radicales sacárido (ácido cetoaldónico C12P 7/58). › Polinucleótidos, p. ej. ácidos nucleicos, oligorribonucleótidos.
  • C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2695580_T3.pdf

 

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