Método de pretratamiento y kit de extracción de ácido nucleico utilizado en el citado método.
Un método de pretratamiento para extraer ácido nucleico por medio de un método de extracción en fase sólida antes de un proceso de amplificación de ácido nucleico,
comprendiendo el método de pretratamiento:
hacer que una muestra, el líquido de extracción para extraer el ácido nucleico contenido en la muestra, las partículas de sílice y un material filtrante entren en contacto unos con las otras;
hacer que el material filtrante mantenga material compuesto del ácido nucleico y las partículas de sílice sobre el mismo; y
a continuación entregar el material filtrante a un proceso de amplificación de ácido nucleico por medio de una solución de reacción para amplificar el ácido nucleico,
en el que los diámetros de las partículas de sílice y la concentración de las partículas de sílice en la solución de reacción para amplificar el ácido nucleico se establecen dentro de un rango predeterminado, permitiendo de esta manera, antes del proceso de amplificación del ácido nucleico, evitar tanto un proceso de secado como un proceso de elución;
el rango predeterminado se define como sigue, de manera que, en base al 100% del ácido nucleico contenido en la muestra, se recupera de la muestra del 5 al 38% del ácido nucleico:
la concentración de las partículas de sílice es de 0,0625 a 4 [μg / μl];
el diámetro promedio de partícula de las partículas de sílice es de 0,01 a 100 [μm]; y
un área superficial calculada en base al diámetro promedio de las partículas es de 1 x 104 a 1 x 108 [μm2]; y
el método de pretratamiento comprende además:
un primer proceso de extracción de añadir la muestra al líquido de extracción para extraer el ácido nucleico contenido en la muestra;
un primer proceso de absorción de: hacer que las partículas de sílice entren en contacto con el ácido nucleico extraído para obtener el material compuesto del ácido nucleico y las partículas de sílice; y hacer que el material compuesto entre en contacto con el material filtrante; y
un primer proceso de lavado de: lavar el material compuesto y el material filtrante con agua purificada; y entregar el material compuesto lavado y el material filtrado lavado al proceso de amplificación de ácido nucleico.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/JP2015/074927.
Solicitante: MIZUHO MEDY CO., LTD.
Nacionalidad solicitante: Japón.
Dirección: 5-4, Fujinoki-chou, Tosu-shi Saga 841-0048 JAPON.
Inventor/es: NAGANO,TAKASHI, YAMAKAWA,KAZUTOMI.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N15/09 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
PDF original: ES-2734068_T3.pdf
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