Medidas de abundancia de telómeros cortos.

Un método para amplificar secuencias repetitivas teloméricas y secuencias subteloméricas de un cromosoma que comprende:



a) crear un producto de extensión de ácidos nucleicos mediante los pasos de:

i) hibridar un cebador de extensión con una secuencia repetitiva telomérica en una saliente 3' de ADN cromosómico de hebra doble, donde:

(1) el ADN cromosómico de hebra doble tiene una región telomérica que comprende secuencias repetitivas teloméricas y una región subtelomérica que comprende secuencias subteloméricas; y

(2) el cebador de extensión comprende:

(A) una porción 3' que hibrida con una secuencia repetitiva telomérica en la saliente 3' en condiciones de apareamiento, y

(B) una porción 5' que tiene una secuencia de anclaje que no hibrida con una secuencia repetitiva telomérica en la saliente 3' en las condiciones de apareamiento; y

ii) realizar una reacción de extensión con desplazamiento de hebra de tiempo controlado para extender el cebador de extensión hacia la región subtelomérica del ADN cromosómico de hebra doble, donde el tiempo de la reacción de extensión se controla de manera de generar un producto de extensión que comprende tanto secuencias repetitivas teloméricas como secuencias subteloméricas solo en el caso del ADN cromosómico de hebra doble que tenga una región telomérica cuya longitud esté comprendida dentro de un rango predeterminado; y

b) amplificar mediante una reacción de PCR ulterior las secuencias del producto de extensión, produciendo así un producto de amplificación de longitud limitada que comprende ácidos nucleicos con secuencias repetitivas teloméricas y secuencias subteloméricas,

donde el tiempo de dicha reacción de extensión de tiempo controlado se controla de manera de generar un producto de extensión cuya longitud esté dentro de un rango predeterminado,

donde el tiempo de la reacción de extensión se controla en 0,1 a 30 minutos, 0,1 a 10 minutos, 0,1 a 5 minutos, 0,1 a 4 minutos, 0,1 a 3 minutos, 0,1 a 2 minutes, no más de 0,1 a 1 minuto, o 0,1 a 0,5 minutos.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2014/039110.

Solicitante: Telomere Diagnostics Inc.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1455 Adams Drive Menlo Park, CA 94025 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: HARLEY, CALVIN, LIN,JUE, HU,YAJING.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/686
  • C12Q1/6883

PDF original: ES-2762860_T3.pdf

 

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