Cebadores modificados para amplificación y detección de ácidos nucleicos.
Un método de amplificación de ácidos nucleicos que comprende los pasos de:
a) realizar una amplificación de ácidos nucleicos en una muestra, usando un primer cebador que incluye por lo menos un nucleótido modificado que no es susceptible de hidrólisis por una exonucleasa específica de ácido nucleico de cadena doble de 5' a 3' ('cebador modificado') y un segundo cebador, en donde la amplificación proporciona un ácido nucleico de cadena doble que comprende una primera cadena que comprende el cebador modificado y una región amplificada cadena abajo; y una segunda cadena;
b) incubar el ácido nucleico de cadena doble de a) con una exonucleasa específica de ácido nucleico de cadena doble de 5' a 3' que hidroliza la segunda cadena pero no hidroliza la región amplificada de la primera cadena, para proporcionar un ácido nucleico de cadena sencilla que comprende región amplificada de la primera cadena;
c) incubar el producto de b) con una sonda que incluye un marcador, en donde la sonda hibrida específicamente con el ácido nucleico de cadena sencilla;
d) incubar el producto de c) con una exonucleasa específica de ácido nucleico de cadena doble de 5' a 3' que hidroliza la sonda pero no hidroliza la región amplificada de la primera cadena, en donde la hidrólisis de la sonda lleva a un cambio detectable en la señal del marcador; y
e) detectar el cambio.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/GB2014/052213.
Solicitante: ATLAS GENETICS LIMITED.
Nacionalidad solicitante: Reino Unido.
Dirección: Derby Court Epsom Square, White Horse Business Park Trowbridge, Wiltshire BA14 0XG REINO UNIDO.
Inventor/es: ADLERSTEIN,Daniel , PEARCE,DAVID M, DIXON,ANNA, FAKANYA,WELLINGTON.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12Q1/6823 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › Liberación de los marcadores unidos.
- C12Q1/6848 C12Q 1/00 […] › caracterizados por los medios para evitar la contaminación o para incrementar la especificidad o la sensibilidad de una reacción de amplificación.
- C12Q1/6853 C12Q 1/00 […] › usando cebadores o moldes modificados.
- C12Q1/689 C12Q 1/00 […] › para bacterias.
PDF original: ES-2697401_T3.pdf
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