Probiótico para el llanto infantil excesivo.

Una composición bacteriana que comprende de 104 a 1012 ufc/g de células viables de Pediococcus pentosaceus que tienen la capacidad de inducir la producción de interleucina-10,

donde la producción de interleucina-10 por macrófagos THP-1 en presencia de células de Pediococcus pentosaceus expresada como incremento normalizado es superior a la producción de interleucina-10 por el control negativo, que son macrófagos THP-1 en ausencia de células de Pediococcus pentosaceus, cuando el incremento normalizado se determina mediante las siguientes etapas:

(a) diferenciar monocitos THP-1 en macrófagos mediante el crecimiento de la línea celular de monocitos THP-1 de la colección de células de Public Health England, número de catálogo 88081201, en medio Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 con suero bovino fetal (FBS) al 10 % y con forbol-12-miristato-13-acetato (PMA) hasta una concentración final de 0,16 μM;

(b) dejar crecer los macrófagos THP-1 en medio RPMI 1640 con FBS al 10% en placas ELISA de 24 pocillos hasta una concentración final de 106 macrófagos/pocillo;

(c) incubar durante 2,5 horas los macrófagos THP-1 con lipopolisacárido (LPS) a una concentración final de 10 ng/mL, y lavar los macrófagos THP-1con el medio solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco (D-PBS);

(d) tener preparado un cultivo de células de Pediococcus pentosaceus obtenido haciendo crecer las células en medio de Man, Rogosa y Sharpe (MRS) una noche a 37 ºC en una atmósfera con CO2 al 5 %;

(e) añadir a cada pocillo ELISA 500 μL de medio RPMI 1640 con FBS al 10 % y una cantidad apropiada de una dilución de células de Pediococcus pentosaceus hasta obtener una relación final de 25:1, es decir, 2,5 x 107 ufc de células de Pediococcus pentosaceus: 106 macrófagos THP-1;

(f) incubar los macrófagos THP-1 con las células de Pediococcus pentosaceus durante 2,5 horas a 37 ºC o sin las células de Pediococcus pentosaceus en las mismas condiciones como control negativo;

(g) lavar los macrófagos THP-1 con medio D-PBS para eliminar las células de Pediococcus pentosaceus, posteriormente añadir a los macrófagos THP-1 medio RPMI 1640 con FBS al 10 % suplementado con 50 μg/mL de gentamicina, 10 μg/mL de ampicilina y 12 μg/mL de cloranfenicol, incubar a 37 °C con CO2 al 5-7 %, y tomar 25 partes alícuotas a las 5 y 24 horas;

(h) centrifugar las partes alícuotas y ensayar los líquidos sobrenadantes para la cuantificación de interleucina-10 mediante citometría de flujo; y

(i) calcular el incremento normalizado de la concentración de interleucina-10, con la fórmula (IL-1024h - IL-105h) / IL- 105h; donde IL-105h y IL-1024h es la concentración de interleucina-10 en pg/mL a 5 y 24 horas, respectivamente.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2014/066970.

Solicitante: AB-Biotics S.A.

Nacionalidad solicitante: España.

Inventor/es: CUÑÉ CASTELLANA,JORDI, ESPADALER MAZO,JORDI, LÁZARO MALLÉN,ELISABET.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A23L33/135
  • A61K35/74 SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE.A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L;   composiciones a base de jabón C11D). › A61K 35/00 Preparaciones medicinales que contienen sustancias de constitución indeterminada o sus productos de reacción. › Bacterias (uso terapéutico de una proteína de la bacteria A61K 38/00).
  • A61K35/744 A61K 35/00 […] › Bacterias del ácido láctico, p. ej., Enterococci, Pediococci, Lactococci, Streptococci o Leuconostocs.
  • A61P1/00 A61 […] › A61P ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS O DE PREPARACIONES MEDICINALES.Medicamentos para el tratamiento de trastornos del tracto alimentario o del aparato digestivo.
  • C12N1/20 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Bacterias; Sus medios de cultivo.
  • C12R1/01 C12 […] › C12R SISTEMA DE INDEXACION ASOCIADO A LAS SUBCLASES C12C - C12Q, RELATIVO A LOS MICROORGANISMOS.C12R 1/00 Microorganismos. › Bacterias o actinomicetos.

PDF original: ES-2683190_T3.pdf

 

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