Uso de G-Clamp para mejorar la PCR específica de alelo.

Un procedimiento de amplificación específica de alelo de una variante de una secuencia diana,

existiendo la diana en forma de varias secuencias variantes, comprendiendo el procedimiento:

(a) hibridar un primer y un segundo oligonucleótido con al menos una variante de la secuencia diana; en el que el primer oligonucleótido es al menos parcialmente complementario de una o más variantes de la secuencia diana y el segundo oligonucleótido es al menos parcialmente complementario de una o más variantes de la secuencia diana y tiene al menos un nucleótido selectivo complementario de una única variante de la secuencia diana en el nucleótido del extremo 3'; en el que dicho segundo oligonucleótido incorpora al menos una 9-(aminoetoxi)fenoxazin-2'-desoxicitidina en una posición 1, 2 o 3 nucleótidos en dirección 5' del nucleótido del extremo 3';

(b) extender el segundo oligonucleótido con una ácido nucleico polimerasa, en el que dicha polimerasa es capaz de extender dicho segundo oligonucleótido de manera eficiente cuando dicho segundo oligonucleótido hibrida con una variante de la secuencia diana que es complementaria de al menos un nucleótido selectivo, y de manera sustancialmente menos eficiente cuando dicho segundo oligonucleótido hibrida con una variante de la secuencia diana que no es complementaria de al menos un nucleótido selectivo.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2012/003817.

Solicitante: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG.

Nacionalidad solicitante: Suiza.

Dirección: GRENZACHERSTRASSE 124 4070 BASEL SUIZA.

Inventor/es: SCHOENBRUNNER,NANCY, BODEPUDI,Veeraiah, TSAN,ALISON.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2656961_T3.pdf

 

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