Procedimiento para prevenir productos de alto peso molecular durante la amplificación.

Un procedimiento para amplificar y detectar una diana de ácido nucleico en una muestra,

en el que se previene o suprime la formación de productos de alto peso molecular durante la amplificación, comprendiendo dicho procedimiento las siguientes etapas:

a) poner en contacto los ácidos nucleicos en dicha muestra con reactivos de amplificación que comprendan al menos una polimerasa, nucleósidos trifosfato u otros monómeros de nucleósido, al menos un cebador directo extendido y/o al menos uno inverso extendido para generar al menos un amplicón y al menos una sonda detectable específica para dicho amplicón o un tinte de unión a ADN, en el que al menos uno de dicho cebador directo y/o cebador inverso extendido comprende una secuencia de poliN añadida al extremo 5' del cebador y que no es complementaria a la secuencia diana, en el que dicha secuencia de poliN se selecciona de un grupo que consiste en una secuencia de poliA, una de poliT, una de poliAT, una de poliU, una de poliC y una de poliG y es de 2 a nucleótidos de longitud;

b) incubar dichos ácidos nucleicos con dichos reactivos de amplificación durante un periodo de tiempo en condiciones suficientes para que se produzca una reacción de amplificación, en el que dicha reacción de amplificación no se finaliza antes de 50 ciclos; y

c) detectar dicho amplicón por medio de dicha sonda detectable o tinte de unión a ADN.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E13189020.

Solicitante: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG.

Nacionalidad solicitante: Suiza.

Dirección: GRENZACHER STRASSE 124 4070 BASEL SUIZA.

Inventor/es: BERGMANN, FRANK, SIZMANN,Dorothea, BABIEL,REINER.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2628286_T3.pdf

 

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