Método de análisis de ARN de conservación del número de copias.
Un método para generar un producto de ácido nucleico a partir de una molécula de ARN molde,
que comprende después de haber obtenido un ARN molde
a) aparear un primer cebador oligonucleotídico en una región de ácido nucleico preseleccionada del ARN molde,
b) elongar el primer cebador oligonucleotídico de manera específica al molde obteniendo de ese modo una primera hebra elongada,
c) retirar el ARN molde,
d) aparear más de un cebador oligonucleotídico adicionales con la primera hebra elongada,
e) elongar los más de un cebador oligonucleotídico adicionales de manera específica al molde sin desplazamiento de los cebadores apareados con la primera hebra elongada usando una polimerasa que carece de actividad de desplazamiento de hebra, preferiblemente una ADN polimerasa T7, T4 o Q5, y/o usando cebadores que tienen resistencia al desplazamiento de hebra por una polimerasa, preferiblemente cebadores que tienen nucleótidos con modificaciones de LNA o 2'-fluor, generando de ese modo productos de elongación adicionales,
en el que las etapas a) a e) se realizan en un volumen de fluido creciente consecutivamente,
f) aislar y/o amplificar un producto de elongación de dicho producto de elongación adicional que comprende una parte de ácido nucleico que se elonga complementaria al primer cebador oligonucleotídico.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2015/055961.
Solicitante: Lexogen GmbH.
Nacionalidad solicitante: Austria.
Dirección: Campus-Vienna-Biocenter 5 Helmut Qualtinger-Gasse 6 1030 Vienna AUSTRIA.
Inventor/es: MOLL,PAMELA.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N15/10 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
- C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
PDF original: ES-2645423_T3.pdf
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