Ensayo para la evaluación del transporte endosomal.
Un ensayo para evaluar la capacidad de liberación de endosomas de una molécula de ensayo,
en donde dicha molécula de ensayo es una neurotoxina clostridial o una proteasa no citotóxica re-dirigida (inhibidor de secreción dirigido) en donde la capacidad de unión natural de la proteasa no citotóxica ha sido modificada por la introducción de un ligando de unión o de una estructura diana, y
en donde dicha molécula de ensayo tiene la capacidad de segmentar proteolíticamente e inactivar una proteína SNARE;
comprendiendo dicho ensayo:
i) poner en contacto una célula eucariota con una molécula de ensayo que se ha de evaluar en relación con la capacidad de liberación de endosomas, en donde dicha célula eucariota comprende una membrana celular que incluye un sitio de unión presente en la superficie externa de la membrana celular de dicha célula;
ii) incubar la molécula de ensayo con dicha célula eucariota, y permitir de esta forma:
a) que la molécula de ensayo se una y forme un complejo unido con el sitio de unión presente en la célula eucariota, permitiendo así que dicho complejo unido se introduzca en la célula eucariota mediante endocitosis;
b) que se formen uno o más endosomas dentro de dicha célula, en donde el uno o más endosomas contienen la molécula de ensayo; y
c) que dicha molécula de ensayo entre en el citosol de la célula eucariota cruzando la membrana endosomal del uno o más endosomas;
iii) eliminar el exceso de molécula de ensayo que no está unido a los sitios de unión presentes en las células eucariotas;
iv) después de un período de tiempo predeterminado, detectar la cantidad de molécula de ensayo presente en el uno o más endosomas, o detectar la cantidad de molécula de ensayo presente en el citosol de dicha célula eucariota;
v) comparar la cantidad de molécula de ensayo detectada en la etapa iv) con un valor testigo, en donde dicho valor testigo representa la cantidad de molécula de ensayo presente en el uno o más endosomas o la cantidad de molécula de ensayo presente en el citosol antes de la etapa iv);
vi) calcular un valor de liberación de endosomas para la molécula de ensayo determinando el cambio relativo de la cantidad de molécula de ensayo que está presente dentro del uno o más endosomas o determinando el cambio relativo de la cantidad de molécula de ensayo presente en el citosol de dicha célula eucariota.
en donde dicha etapa (iv) comprende detectar la molécula de ensayo usando un marcador fluorescente.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/GB2013/052765.
Solicitante: Ipsen Bioinnovation Limited.
Inventor/es: HARPER,ELAINE.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- G01N33/50 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre o de orina; Ensayos mediante métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Ensayos inmunológicos (procedimientos de medida o ensayos diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto, procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).
PDF original: ES-2618521_T3.pdf
Patentes similares o relacionadas:
Cultivo de tejido tridimensional heterogéneamente diferenciado, del 22 de Julio de 2020, de IMBA-INSTITUT FÜR MOLEKULARE BIOTECHNOLOGIE GMBH: Un cultivo de tejido neuronal tridimensional artificial cultivado in vitro que comprende una población heterogénea de células humanas o células de primate no humanas […]
Gangliósidos para estandarizar y aumentar la sensibilidad de las células a las neurotoxinas botulínicas en los sistemas de prueba in vitro, del 15 de Julio de 2020, de MERZ PHARMA GMBH & CO. KGAA: Un método para determinar la actividad biológica de un polipéptido de neurotoxina, que comprende las etapas de: a) cultivar neuronas de diferentes […]
Procedimiento para evaluación de la función hepática y el flujo sanguíneo portal, del 15 de Julio de 2020, de The Regents of the University of Colorado, a body corporate: Procedimiento in vitro para la estimación del flujo sanguíneo portal en un individuo a partir de una única muestra de sangre o suero, comprendiendo el procedimiento: […]
ANTICUERPO MONOCLONAL O UNA PORCIÓN DE UNIÓN A ANTÍGENO DEL MISMO QUE SE UNE A LA PROTEÍNA L DEL VIRUS PARAINFLUENZA HUMANO (PIV); MÉTODO Y KIT PARA DETECTAR AL VIRUS PIV, del 2 de Julio de 2020, de PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA DE CHILE: La invención presenta la generación de anticuerpos monoclonales, o fragmentos de los mismos, que reconocen la proteína L del virus parainfluenza humano (PIV), donde dichos […]
ANTICUERPOS MONOCLONALES ESPECÍFICOS PARA EL ANTÍGENO PB2 DEL VIRUS DE LA INFLUENZA HUMANA (FLU), SECUENCIAS NUCLEOTÍDICAS; MÉTODO Y KIT DE DIAGNÓSTICO DE INFECCIÓN PRODUCIDA POR FLU, del 2 de Julio de 2020, de PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA DE CHILE: La invención presenta la generación de anticuerpos monoclonales, o fragmentos de los mismos, que reconocen la proteína PB2 del virus de la influenza humana (Flu), […]
Diagnóstico y terapia de cáncer que implica células madre cancerosas, del 24 de Junio de 2020, de BioNTech SE: Un anticuerpo que tiene la capacidad de unirse a Claudina 6 (CLDN6) para usar en un método de tratamiento o prevención del cáncer que comprende inhibir y/o eliminar […]
Nueva inmunoterapia contra diversos tumores como el cáncer gastrointestinal y gástrico, del 24 de Junio de 2020, de IMMATICS BIOTECHNOLOGIES GMBH: Péptido seleccionado del grupo siguiente: a) péptido consistente en la secuencia conforme a la SEQ ID N.º 86, b) el péptido conforme a a), en la […]
Reactivos SIRP-alfa de alta afinidad, del 24 de Junio de 2020, de THE BOARD OF TRUSTEES OF THE LELAND STANFORD JUNIOR UNIVERSITY: Un polipéptido SIRPα de alta afinidad que comprende al menos una y no más de 15 modificaciones de aminoácidos dentro del dominio d1 de una secuencia SIRPα de tipo […]