Amplificación isotérmica de ácido nucleico.

Un procedimiento isotérmico para amplificar una molécula objetivo de ácido nucleico bicatenario que comprende las siguientes etapas:



(a) proporcionar:

(i) cebadores en dirección 5' y en dirección 3', comprendiendo cada uno una molécula de ADN monocatenario de menos de 30 nucleótidos, al menos una porción de la cual es complementaria a una secuencia de la molécula objetivo;

(ii) un oligonucleótido que comprende una molécula de ADN monocatenario de al menos 30 nucleótidos, al menos una porción de la cual es complementaria a una secuencia de la molécula objetivo que interviene en los cebadores directo e inverso, en donde el oligonucleótido tiene un extremo terminal 3';

(b) poner en contacto el oligonucleótido (ii) con la recombinasa para permitir que invada la región complementaria de la molécula objetivo, volviendo de este modo la región complementaria de la molécula objetivo y regiones adyacentes monocatenarias;

(c) aplicar el cebador en dirección 5' a la región monocatenaria de la molécula objetivo y extender el extremo terminal 3' del cebador en dirección 5' con polimerasa y dNTP para producir una molécula objetivo de ácido nucleico bicatenario;

(d) aplicar el cebador en dirección 3' a la molécula objetivo monocatenaria y extender el extremo terminal 3' del cebador en dirección 3' con polimerasa y dNTP para producir otra molécula objetivo de ácido nucleico bicatenario;

(e) continuar la reacción mediante la repetición de (b) hasta (d).

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/GB2009/050662.

Solicitante: Orion Pharma Limited.

Nacionalidad solicitante: Reino Unido.

Dirección: Canterbury Enterprise Hub Giles Lane Canterbury, Kent CT2 7NJ REINO UNIDO.

Inventor/es: HOSER,MARK JAY.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2638853_T3.pdf

 

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