Producción de polímeros de heparosano de peso molecular alto y métodos de producción y uso de los mismos.

Un método para producir recombinantemente un polímero de heparosano de alto peso molecular,

comprendiendo el método los pasos de:

cultivar una célula huésped recombinante que contiene una secuencia de nucleótidos que codifica un polipéptido que tiene actividad de sintasa de heparosano en condiciones apropiadas para la expresión de la sintasa de heparosano, en la que al menos uno de:

(a) el polipéptido que tiene actividad de sintasa de heparosano es al menos 90% idéntico a al menos una de 10 las SEQ ID NOS: 2, 4 y 6-8, y la secuencia de nucleótidos que codifica el polipéptido se ha optimizado genéticamente para la expresión en la célula huésped recombinante;

(b) el polipéptido que tiene actividad de sintasa de heparosano tiene adiciones de 1-20 aminoácidos, deleciones y/o sustituciones cuando se compara con al menos una de las SEQ ID NOS: 2, 4 y 6-8, y la secuencia de nucleótidos que codifica el polipéptido ha sido genéticamente optimizado para la expresión en la célula huésped recombinante;

(c) el polipéptido está codificado por la secuencia de nucleótidos de al menos una de las SEQ ID NOS: 9-11;

(d) el polipéptido está codificado por una secuencia de nucleótidos que es idéntica al menos en un 90% a al menos una de las SEQ ID NOS: 9-11; y

(e) la secuencia de nucleótidos codifica una sintasa de heparosano de Pasteurella; y

aislar el polímero de heparosano producido por la sintasa de heparosano, donde el polímero de heparosano aislado es biocompatible con un paciente mamífero y biológicamente inerte dentro de los compartimentos extracelulares de un paciente mamífero, y en el que el polímero de heparosano aislado está representado por la estructura (-GlcUA-beta1,4-GlcNAc-alfa-1,4-)n, en donde n es un número entero positivo mayor que o igual a 2.000.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2013/034631.

Solicitante: THE BOARD OF REGENTS OF THE UNIVERSITY OF OKLAHOMA.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 660 Parrington Oval, Room 119 Norman, OK 73019 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: DEANGELIS,PAUL L, PUMMILL,PHILIP, VISSIER,REGINA C.

Fecha de Publicación: 13 de Abril de 2016.

Clasificación Internacional de Patentes:

A61K31/715 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 31/00 Preparaciones medicinales que contienen ingredientes orgánicos activos. › Polisacáridos, es decir que tienen más de cinco radicales sacáridos unidos los unos a los otros por enlaces glicosídicos; Sus derivados, p. ej. eteres, esteres.
A61K31/726 A61K 31/00 […] › Glicosaminoglicanos, es decir mucopolisacáridos (sulfato de condroitina, sulfato de dermatano A61K 31/737).
A61K8/73 A61K […] › A61K 8/00 Cosméticos o preparaciones similares para el aseo. › Polisacáridos.
A61L27/20 A61 […] › A61L PROCEDIMIENTOS O APARATOS PARA ESTERILIZAR MATERIALES U OBJECTOS EN GENERAL; DESINFECCION, ESTERILIZACION O DESODORIZACION DEL AIRE; ASPECTOS QUIMICOS DE VENDAS, APOSITOS, COMPRESAS ABSORBENTES O ARTICULOS QUIRURGICOS; MATERIALES PARA VENDAS, APOSITOS, COMPRESAS ABSORBENTES O ARTICULOS QUIRURGICOS (conservación de cuerpos o desinfección caracterizada por los agentes empleados A01N; conservación, p. ej. esterilización de alimentos o productos alimenticios A23; preparaciones de uso medico, dental o para el aseo A61K). › A61L 27/00 Materiales para prótesis o para revestimiento de prótesis (prótesis dentales A61C 13/00; forma o estructura de las prótesis A61F 2/00; empleo de preparaciones para la fabricación de dientes artificiales A61K 6/80; riñones artificiales A61M 1/14). › Polisacáridos.
C08B37/00 QUIMICA; METALURGIA. › C08 COMPUESTOS MACROMOLECULARES ORGANICOS; SU PREPARACION O PRODUCCION QUIMICA; COMPOSICIONES BASADAS EN COMPUESTOS MACROMOLECULARES. › C08B POLISACARIDOS; SUS DERIVADOS (polisacáridos que contienen menos de seis radicales sacáridos unidos entre sí por enlaces glucosídicos C07H; procesos de fermentación o procesos que utilizan enzimas C12P 19/00; producción de celulosa D21). › Preparación de polisacáridos no previstos en los grupos C08B 1/00 - C08B 35/00; Sus derivados (celulosa D21).
C12N15/52 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Genes que codifican enzimas o proenzimas.
C12N15/63 C12N 15/00 […] › Introducción de material genético extraño utilizando vectores; Vectores; Utilización de huéspedes para ello; Regulación de la expresión.
C12N15/70 C12N 15/00 […] › Vectores o sistemas de expresión especialmente adaptados a E. coli.
C12N9/10 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Transferasas (2.) (ribonucleasas C12N 9/22).
C12P19/04 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 19/00 Preparación de compuestos que contienen radicales sacárido (ácido cetoaldónico C12P 7/58). › Polisacáridos, es decir, compuestos que contienen más de cinco radicales sacárido unidos entre ellos por enlaces glucosídicos.
C12P19/18 C12P 19/00 […] › preparados por acción de una transferasa glicosílica, p. ej. alfa-, beta- o gamma-ciclodextrinas.
C12P19/26 C12P 19/00 […] › Preparación de hidratos de carbono que contienen nitrógeno.

PDF original: ES-2661575_T3.pdf

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