Método y composición de medición de la cantidad de derivados de vitamina D.
Un método de medición de la cantidad o de la concentración de un derivado de vitamina D en una muestra,
en el que el derivado de vitamina D es 25-hidroxi-vitamina D, método que comprende:
a) poner en contacto una muestra con un polipéptido que comprende un dominio de unión al ligando de VDR modificado (LBD de BDR) y un par donante-aceptor de fluoróforos; y
b) medir la cantidad de fluorescencia, en el que dicha cantidad de fluorescencia es detectablemente superior o inferior en presencia del derivado de vitamina D en comparación con la cantidad de fluorescencia en ausencia del derivado de vitamina D;
en el que el dominio de unión al ligando de VDR corresponde a los aminoácidos 118-427 de SEQ ID NO: 1, y en el que el VDR modificado es una versión mutada del dominio de unión al ligando de VDR, en el que la mutación puede implicar la inserción, deleción y/o sustitución, y comprende al menos una mutación causante de que dicha VDR modificada tenga una afinidad de unión por 25-hidroxi-vitamina D superior en comparación con el calcitriol, comprendiendo dicha al menos una mutación una sustitución en una posición de aminoácido seleccionada entre 274, 147, 150, 227, 230, 233, 234, 271, 275, 286, 288, 300, 309, 313, 418, 237, 143, 278, 305 y 397, y en el que el VDR modificado es un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene una identidad de secuencia de aminoácidos superior al 80 % con, en una región de más de 300 aminoácidos, el dominio de unión al ligando de VDR que corresponde a los aminoácidos 118-427 de SEQ ID NO: 1.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/IB2010/001123.
Solicitante: OPKO Ireland Global Holdings, Limited.
Inventor/es: PETKOVICH,P. MARTIN, HELVIG,CHRISTIAN F.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C07K14/705 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Receptores; Antígenos celulares de superficie; Determinantes celulares de superficie.
- G01N33/542 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › con inhibición estérica o modificación de la señal, p. ej. extinción de fluorescencia.
- G01N33/82 G01N 33/00 […] › en los que intervienen vitaminas.
PDF original: ES-2587795_T3.pdf
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