Método para la selección de una célula productora a largo plazo.
Método para seleccionar un clon celular CHO, que comprende las siguientes etapas:
a) determinar para cada uno de al menos un clon celular CHO, que comprende un ácido nucleico que comprende un gen estructural que codifica un polipéptido unido operativamente a un ácido nucleico promotor que tiene la secuencia de ácido nucleico de la SEQ ID NO: 01, la frecuencia de metilación de un sitio CpG en la posición 425 de la SEQ ID NO: 01 basándose en la metilación determinada para al menos copias del ácido nucleico o en al menos 10 células obtenidas de un cultivo de cada clon celular CHO,
b) seleccionar un clon celular CHO en que la frecuencia de metilación determinada está por debajo del 5 %, mediante lo cual la determinación comprende las siguientes etapas:
1) aislar el ADN de cada uno de los clones celulares CHO,
2) realizar para cada ADN aislado individualmente una reacción en cadena de la polimerasa con el par de cebadores específico de metilación de la SEQ ID NO: 11 y 18 y el par de cebadores universal de la SEQ ID NO: 09 y 11,
3) determinar, con los resultados obtenidos en la etapa 2), la frecuencia de metilación del sitio CpG.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2011/055835.
Solicitante: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG.
Inventor/es: GOEPFERT,ULRICH, OSTERLEHNER,ANDREA, SIMMETH,SILKE.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C07K16/00 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales.
- C12P21/02 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation.
- C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
PDF original: ES-2605702_T3.pdf
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