Método de obtención de ácido nucleico que codifica inmunoglobulina.
Método de producción de un fragmento Fab de inmunoglobulina que comprende las siguientes etapas:
- proporcionar una célula única productora de inmunoglobulina,
- obtener a partir de dicha célula el ácido nucleico que codifica los dominios variables de la cadena ligera y pesada de inmunoglobulina, que también codifica una parte del dominio constante de la cadena ligera y una parte del dominio CH1 de la cadena pesada, con un método que comprende las siguientes etapas:
- realizar una primera reacción en cadena de la polimerasa con cuatro a seis cebadores 5' y un cebador 3',
- realizar con el producto de la primera reacción en cadena de la polimerasa una segunda reacción en cadena de la polimerasa con trece a quince cebadores 5' y un cebador 3',
por el cual en la segunda reacción en cadena de la polimerasa el cebador 3' es el mismo que en la primera reacción en cadena de la polimerasa y al menos un cebador 5' se cambia, y
por el cual en la segunda reacción en cadena de la polimerasa el número de nucleótidos entre el extremo 5' de cada uno de los cebadores 5' y el extremo 3' del cebador 3' se reduce en comparación con el número de nucleótidos entre el extremo 5' de cada uno de los cebadores 5' y el extremo 3' del cebador 3' en la primera reacción en cadena de la polimerasa, cuando se une al ácido nucleico que va a amplificarse,
- generar una matriz de expresión lineal que comprende el ácido nucleico obtenido,
- traducir in vitro dicho ácido nucleico y así producir el fragmento Fab de inmunoglobulina.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2010/001008.
Solicitante: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG.
Inventor/es: KRELL, HANS-WILLI, WEILKE,CHRISTIAN, LIFKE,Alexander, LIFKE,Valeria, MADIN,KAIRAT.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C07K16/00 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales.
- C12Q1/68 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
PDF original: ES-2570460_T3.pdf
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