Formato de sondas para detectar diferencias de ácidos nucleicos.
Método de detección de la presencia o de la ausencia de una secuencia diana de ácidos nucleicos diana en una muestra biológica,
comprendiendo el método: 5 a. poner en contacto una sonda marcada detectablemente que comprende un dominio de ácidos nucleicos de anclaje y un dominio de ácidos nucleicos informador con la muestra, y
b. detectar la presencia o la ausencia de unión de la sonda al ácido nucleico diana,
en el que los dominios de anclaje e informador presentan una complementariedad inferior a 50% y están unidos mediante un conector no nucleósido y ni el dominio de anclaje ni el dominio informador forman una estructura de tallo-bucle en ausencia del ácido nucleico diana,y en el que
(i) la sonda no es extensible por una polimerasa,
(ii) el conector está unido al dominio de anclaje a 2 o menos nucleótidos del extremo 3' del dominio de anclaje y el conector está unido al dominio informador a 2 o menos nucleótidos del extremo 5' del dominio informador, en el que el dominio de anclaje no está unido a un marcaje detectable y el dominio informador comprende una o más bases estabilizadoras, de manera que la diferencia en la temperatura de fusión entre el dominio informador y las posibles secuencias diana se acentúa,
(iii) el dominio de anclaje y el dominio informado comprenden, cada uno, una secuencia contigua de por lo menos 6 nucleótidos complementarios a la misma cadena del ácido nucleico diana, y
(iv) en el que la hibridación entre el dominio de anclaje y el ácido nucleico diana por sí mismo resulta suficiente para regular la hibridación de la sonda en la localización deseada del ácido nucleico diana.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2010/004963.
Solicitante: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG.
Inventor/es: WILL, STEPHEN GORDON.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
PDF original: ES-2608455_T3.pdf
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