Análogos de 3-alquinil pirazolopirimidina funcionalizada como bases universales y métodos de uso.

Un método para la monitorización de la amplificación de los polinucleótidos de un conjunto de una o más secuencias de ácidos nucleicos objetivo,

que comprende:

(a) proporcionar una mezcla que comprende una muestra que contiene las secuencias de ácidos nucleicos objetivo, uno más de un cebador de oligonucleótidos sustancialmente complementario de una porción de las secuencias de ácidos nucleicos objetivo, una enzima de polimerización, sustratos de nucleótidos y una sonda oligomérica de ácidos nucleicos detectable de entre 5 y 100 bases,

en el que dicha sonda oligomérica de ácidos nucleicos detectable tiene un componente de esqueleto seleccionado del grupo que consiste en un esqueleto de un fosfato de azúcar, un esqueleto de un fosfato de azúcar modificado, un esqueleto de un ácido nucleico bloqueado, un esqueleto peptídico o una variante de los mismos,

en el que dicha sonda oligomérica de ácidos nucleicos tiene una secuencia sustancialmente complementaria de una región de la sonda de al menos una de las secuencias de ácidos nucleicos objetivo,

en el que al menos uno de dichos cebadores de oligonucleótidos tiene una secuencia complementaria de una porción adyacente o solapante de la región de sonda de las secuencias de ácidos nucleicos objetivo, y en el que dicha sonda oligomérica de ácidos nucleicos tiene al menos una base de ácidos nucleicos sustituida por un análogo de 3-alquinil-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4(5H)-ona; en el que el análogo de 3-alquinil-1Hpirazolo[ 3,4-d]pirimidin-4(5H)-ona comprende la Fórmula III o la Fórmula IV:**Fórmula**

en las que:

R1 es H;

R1' es H;

L es un análogo de un esqueleto de azúcar o de azúcar/fosfato, que incluye, como pero no se limita a, un esqueleto de ADN, de ARN, de PNA, un ácido nucleico bloqueado, un ADN modificado, un PNA modificado, un ARN modificado, o cualquier combinación de los mismos, y

n es entre 1 y 5; y

(b) incubar la mezcla en unas condiciones favorables para la polimerización con una polimerasa.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2012/030467.

Solicitante: Elitech Holding B.V.

Nacionalidad solicitante: Países Bajos.

Dirección: Van Rensselaerweg 4 6956 AV Spankeren PAISES BAJOS.

Inventor/es: LUKHTANOV,EUGENY,A, VOROBIEV,ALEXEI, SCARR,NOAH.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2611343_T3.pdf

 

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