Sustrato que imita los lípidos intercelulares en el estrato córneo y método de evaluación del daño cutáneo usando el mismo.

Un método para evaluar la rugosidad de la piel, en el que se añade un tensioactivo a un sustrato que imita los lípidos en los lípidos intercelulares del estrato córneo,

que consiste en un sustrato y una membrana lipídica formada sobre el sustrato, en el que la membrana lipídica está formada por ceramidas, ácido palmítico y colesterol y se evalúa que el tensioactivo provoca la rugosidad de la piel in vivo si se forma sobre el sustrato una figura de mielina y se evalúa que el grado de rugosidad de la piel es tanto mayor cuanto mayor es la distancia más corta entre el extremo de la figura de mielina y el borde del sustrato.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/JP2009/065268.

Solicitante: SHISEIDO CO. LTD..

Nacionalidad solicitante: Japón.

Dirección: 5-5, GINZA 7-CHOME CHUO-KU TOKYO 104-8010 JAPON.

Inventor/es: MORI,YUICHIRO, SAIWAKI,TAKUYA, OKA,TAKASHI, IMAE,TOYOKO, WANG,XIAOJUAN, UJIHARA,MASAKI.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • G01N33/15 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › preparaciones medicinales.
  • G01N33/50 G01N 33/00 […] › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre, de orina; Investigación o análisis por métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Investigación o análisis inmunológico (procedimientos de medida, de investigación o análisis diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto; procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).

PDF original: ES-2543627_T3.pdf

 


Fragmento de la descripción:

Sustrato que imita los lípidos intercelulares en el estrato córneo y método de evaluación del daño cutáneo usando el mismo La presente invención se refiere a un método para evaluar la rugosidad de la piel utilizando un sustrato que imita los lípidos intercelulares del estrato córneo.

Técnica anterior El estrato córneo, localizado en la capa más externa de la piel, tiene una función de barrera que protege el cuerpo del contacto e infiltración de materias extrañas tales como las bacterias y las sustancias peligrosas, mientras se mantiene a la vez la piel en un estado saludable evitando la transpiración de humedad del cuerpo. Cuando la función de barrera se ve disminuida o afectada, la pérdida de agua transepidérmica (TEWL, por sus siglas en inglés) de la superficie de la piel aumenta, disminuyendo de este modo el contenido de humedad relativa del estrato córneo. La reducción del contenido de humedad en el estrato córneo, que da como resultado una textura irregular de dermatoglifos compuestos de surcos y crestas cutáneas, crea una condición de la piel seca y rugosa, áspera (T. Sone, et al., Koshokaishi, vol. 15, número 2, páginas 60-65 (1991) ) .

Los lípidos intercelulares en el estrato córneo, que desempeñan un importante papel en la función de barrera, están compuestos principalmente por ceramidas, ácidos grasos libres y colesterol y se sabe que forman una estructura laminar (a veces denominada "lamelar") (J.A. Bouwstra et al., Acta Derm. Venereol. Suppl. (Stockh) , 2000, 208; páginas 23-30; J.A. Bouwstra et al., Int. J. Cosmet. Sci., 2008, oct 30 (5) ; página 388) . Para el desarrollo de los cosméticos, es necesario examinar de antemano la interacción entre los lípidos intercelulares del estrato córneo y los materiales cosméticos, a fin de evitar afectar o perjudicar a la función de barrera de la piel y para cribar los materiales eficaces.

Para examinar los efectos de los materiales cosméticos sobre la función de barrera de la piel, normalmente se expone una muestra biológica al material candidato y después se somete su estructura de lípidos intercelulares a análisis de rayos X, resonancia de espín electrónica (ESR, por sus siglas en inglés) , calorimetría diferencial de barrido (DSC, por sus siglas en inglés) , análisis mediante radiación infrarroja (IR) o métodos similares. Utilizar una muestra biológica permite obtener los datos necesarios, que se pueden enlazar directamente a la información del producto.

Sin embargo, debido a las diferencias individuales entre muestras biológicas, los lípidos intercelulares del estrato córneo obtenidos a partir de muestras tienen también estructuras diferentes que dependen de la muestra concreta. Además, se necesitan complejos procedimientos para obtener lípidos intercelulares de estrato córneo específicos a partir de animales y los métodos de medida presentan limitaciones, en razón de la protección de los animales.

Por lo tanto, para el desarrollo de nuevos cosméticos, ha sido necesario emplear indicadores convenientes y altamente reproducibles que no confíen en muestras biológicas, con el fin de determinar qué efectos tienen las sustancias sobre los lípidos intercelulares del estrato córneo.

Los tensioactivos están entre los componentes incluidos en los productos de cuidado de la piel y similares. Los tensioactivos penetran a través del estrato córneo y son absorbidos en la queratina de las células cornificadas, mezclándose con los lípidos intercelulares (S. E. Friberg et al., Colloids Surf. 1988, 30, páginas 1-12; L. D. Rhein, ibid., 1997, 48, páginas 253-274) . También se sabe que los tensioactivos eliminan lípidos de la piel, como ácidos grasos, glicéridos de ácidos grasos y ésteres de colesterol, produciendo de este modo daño a la piel, incluso si la cantidad eliminada de lípidos es pequeña (A. W. Fulmer et al., J. Invest. Dermatol., 1986, 86, páginas 598-602; M. Denda et al., Arch. Dermatol. Res., 1994, 286, páginas 41-46; R. W. Ronald et al., J. Invest. Dermatol., 1999, 113, páginas 960-966; O. López et al., Bioch. et Biophy. Acta, 2000, 1508, páginas 196-209; B. Ebba et al., Inter. J. Pharma. 2000, 195, páginas 189-195) .

Los efectos de los tensioactivos sobre los lípidos intercelulares del estrato córneo han sido objeto de interés en el pasado en relación con la función de barrera de la piel (K. Harada et al., J. Invest. Dermatol., 1992, 99, páginas 278282; A. P. M. Lavrijsen et al., J. Invest. Dermatol., 1995, 105, páginas 619-624) y en relación con los cambios en la composición de lípidos relacionados con diversos síntomas cútaneos (W. M. Holleran et al., J. Lipid. Res., 1991, 32, páginas 1151-1158; Y. Murata et al., J. Invest. Dermatol., 1996, 106, páginas 1242-1249; M. Ponec et al., J. Invest. Dermatol., 1997, 109, páginas 348-355) . Sin embargo, los mecanismos y procedimientos de acción son todavía muy mal comprendidos.

Lista de referencias (Bibliografía no de patente)

(Documento no de patente 1) T. Sone et al., Koshokaishi, vol. 15, número 2, páginas 60-65 (1991)

(Documento no de patente 2) J.A. Bouwstra et al., Acta Derm. Venereol. Suppl. (Stockh) , 2000, 208; páginas 23-30

(Documento no de patente 3) J.A. Bouwstra et al., Int. J. Cosmet. Sci., 2008, oct 30 (5) ; página 388

(Documento no de patente 4) S. E. Friberg et al., Colloids Surf. 1988, 30, páginas 1-12

(Documento no de patente 5) L. D. Rhein, ibid., 1997, 48, páginas 253-274

(Documento no de patente 6) A. W. Fulmer et al., J. Invest. Dermatol., 1986, 86, páginas 598-602

(Documento no de patente 7) M. Denda et al., Arch. Dermatol. Res., 1994, 286, páginas 41-46

(Documento no de patente 8) R. W. Ronald et al., J. Invest. Dermatol., 1999, 113, páginas 960-966

(Documento no de patente 9) O. López et al., Bioch. et Biophy. Acta, 2000, 1508, páginas 196-209

(Documento no de patente 10) B. Ebba et al., Inter. J. Pharma. 2000, 195, páginas 189-195)

(Documento no de patente 11) K. Harada et al., J. Invest. Dermatol., 1992, 99, páginas 278-282

(Documento no de patente 12) A. P. M. Lavrijsen et al., J. Invest. Dermatol., 1995, 105, páginas 619-624

(Documento no de patente 13) W. M. Holleran et al., J. Lipid. Res., 1991, 32, páginas 1151-1158

(Documento no de patente 14) Y. Murata et al., J. Invest. Dermatol., 1996, 106, páginas 1242-1249

(Documento no de patente 15) M. Ponec et al., J. Invest. Dermatol., 1997, 109, páginas 348-355)

(Documento no de patente 16) O. López et al.; J. Dispersion Science and Technology, 18 (5) , páginas 503-515 (1997)

Descripción de la invención (Problemas a resolver por la invención)

Es un objeto de la presente invención proporcionar un método para evaluar la rugosidad de la piel utilizando un sustrato in vitro modelado sobre los lípidos intercelulares del estrato córneo, el cual tiene una gran homogeneidad estructural y permite una medida fácil de los cambios estructurales en los lípidos.

(Medios para resolver los problemas)

Como un modelo simple de la piel para el estrato córneo, los presentes inventores prepararon una mezcla de lípidos compuesta de tres componentes, a saber, ceramida, ácido palmítico y colesterol, sobre un sustrato tal como una placa de vidrio (un cubre) y encontraron que la membrana lipídica formada sobre el sustrato es similar a la estructura laminar de lípidos del estrato córneo; y, como resultado de analizar sus propiedades físicas, encontraron que la naturaleza de la membrana lipídica es similar a la de los lípidos intercelulares del estrato córneo. Considerando la estructura laminar y analizando las propiedades físicas, se concluye que la membrana lipídica formada por la mezcla de lípidos compuesta por los tres componentes es similar a la estructura de lípidos intercelulares del estrato córneo.

Es sabido que, cuando se aplica un tensioactivo a una piel de cerdo, la estructura lipídica del estrato córneo se transforma de una estructura laminar a una forma vesicular (O. López et al.; J. Dispersion Science and Technology, 18 (5) , páginas 503-515 (1997) ) . Por lo tanto, los presentes inventores añadieron tensioactivos específicos a una membrana lipídica formada a partir de la mezcla de lípidos previamente mencionada y encontraron que la estructura lipídica del estrato córneo resultó afectada de tal forma que las moléculas que componían la membrana lipídica se juntaron en forma de tubos, creando una figura de mielina. Tras examinar la relación entre la distancia desde el extremo de la figura de mielina al borde del sustrato imitador de los lípidos y el valor TEWL como evaluación de la función de barrera de la piel, se encontró... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Un método para evaluar la rugosidad de la piel, en el que se añade un tensioactivo a un sustrato que imita los lípidos en los lípidos intercelulares del estrato córneo, que consiste en un sustrato y una membrana lipídica formada sobre el sustrato, en el que la membrana lipídica está formada por ceramidas, ácido palmítico y colesterol y se evalúa que el tensioactivo provoca la rugosidad de la piel in vivo si se forma sobre el sustrato una figura de mielina y se evalúa que el grado de rugosidad de la piel es tanto mayor cuanto mayor es la distancia más corta entre el extremo de la figura de mielina y el borde del sustrato.

2. El método según la reivindicación 1, en el que la ceramida, el ácido palmítico y el colesterol están presentes en el sustrato que imita los lípidos en en unas proporciones de masa de 20 - 70 % : 10 - 60 % : 20 - 40 % 10 (ceramida : ácido palmítico : colesterol) .

3. El método según la reivindicación 1, en el que dicho sustrato que imita los lípidos en los lípidos intercelulares del estrato córneo se forma:

1) disolviendo ceramida, ácido palmítico y colesterol en una proporción de masas de 20 - 70 % : 10 - 60 % : 20 - 40 % (ceramida : ácido palmítico : colesterol) en un disolvente; 15 2) desarrollando y secando la disolución sobre una placa usada como el sustrato y 3) fundiendo la membrana resultante en un horno a alta temperatura, dejándola estar bajo una corriente de nitrógeno, enfriándola hasta temperatura ambiente y humedeciendo la membrana por adición 20 de agua o inmersión.

4. El método según la reivindicación 3, en el que la alta temperatura es 120 ºC.


 

Patentes similares o relacionadas:

Imagen de 'Método para un ensayo de selección de fármacos basado en células…'Método para un ensayo de selección de fármacos basado en células y uso del mismo, del 31 de Octubre de 2019, de QGel SA: Método para un ensayo de selección de fármacos basado en células que comprende las etapas de: - cultivar una población celular en un entorno de […]

Método destinado al análisis por PCR de muestras de grupos sanguíneos, del 30 de Octubre de 2019, de Baxalta Incorporated: Método para identificar de manera exclusiva donaciones de fluido biológico con carga viral positiva, comprendiendo el método las fases que […]

Dispositivo de detección para detectar analitos en muestras líquidas, del 24 de Octubre de 2019, de Abon Biopharm (Hangzhou) Co., Ltd: Un dispositivo de detección para detectar analitos en una muestra líquida, que comprende: una cámara de muestras para recoger o almacenar la muestra líquida; […]

Lipopéptidos para su uso en el tratamiento de enfermedades hepáticas y enfermedades cardiovasculares, del 23 de Octubre de 2019, de Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg: Compuesto basado en lipopéptidos para su uso en la prevención y/o tratamiento de una enfermedad o afección hepática, en el que el compuesto basado en lipopéptidos […]

Fenotipos anormales de singamia observados con obtención de imágenes a intervalos de tiempo preestablecidos para identificación precoz de embriones con potencial de desarrollo inferior, del 23 de Octubre de 2019, de ARES TRADING S.A.: Un método in vitro para deseleccionar uno o más embriones humanos con potencial de desarrollo pobre que comprende: (A) cultivar in-vitro uno […]

Procedimientos para determinar interferón que tiene efectos inhibidores directos sobre tumores y usos del mismo, del 23 de Octubre de 2019, de Superlab Far East Limited: Un procedimiento de determinación o comparación de la potencia de un interferón de prueba con respecto al supercompuesto de interferón recombinante (rSIFN-co) o establecer […]

Concentración de células raras, del 23 de Octubre de 2019, de SIEMENS HEALTHCARE DIAGNOSTICS INC.: Método para aumentar una razón de células raras con respecto a células no raras en una muestra de sangre que se sospecha que contiene células raras y células no raras, comprendiendo […]

Identificación de estados celulares funcionales, del 22 de Octubre de 2019, de Asedasciences AG: Un método para caracterizar el efecto de un agente en células que comprende: a) poner en contacto muestras de una población de células con una serie de concentraciones diferentes […]

Utilizamos cookies para mejorar nuestros servicios y mostrarle publicidad relevante. Si continua navegando, consideramos que acepta su uso. Puede obtener más información aquí. .