Copolímeros multibloque.

Composición que comprende un copolímero de bloques asociado con un polinucleótido,

comprendiendo el copolímero de bloques un primer, un segundo y un tercer bloque de composición distinta, siendo el primer bloque un bloque de polímero hidrófilo, estando el segundo bloque situado entre el primer y el tercer bloque y asociado con el polinucleótido, siendo el tercer bloque un bloque de polímero hidrófobo que comprende unidades de repetición aniónicas, teniendo las unidades de repetición aniónicas una población de aniones como sustituyentes de las mismas que varía en número de una manera dependiente del pH, siendo la población mayor a pH 7,4 que a pH 5, en la que al menos el 90% de las unidades de repetición del primer, segundo y tercer bloque no son residuos de aminoácidos unidos por un enlace peptídico.

Copolímeros multibloque [0001] La presente solicitud reivindica prioridad de la solicitud de patente de Estados Unidos nº de serie 61/112.048, presentada el 6 de noviembre de 2008; solicitud de patente de Estados Unidos Nº de Serie 61/112.054, presentada el 6 de noviembre de 2008; solicitud de patente de Estados Unidos nº de serie 61/140.774, presentada el 24 de diciembre de 2008; solicitud de patente de Estados Unidos nº de serie 61/140.779, presentada el 24 de diciembre de 2008; solicitud de patente de Estados Unidos nº de serie 61/171.358, presentada el 21 de abril de 2009, solicitud de patente de Estados Unidos nº de serie 61/171.369, presentada el 21 de abril de 2009; US nº de Serie 61/177.921, presentada el 13 de mayo de 2009; y solicitud de patente de Estados Unidos nº de Serie 61/243.898, presentada el 18 de septiembre de 2009.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

En ciertos casos, es beneficioso proporcionar agentes terapéuticos, tales como polinucleótidos (por ejemplo, oligonucleótidos) a las células vivas. En algunos casos, la liberación de dichos polinucleótidos a una célula viva proporciona un beneficio terapéutico.

DESCRIPCIÓN RESUMIDA DE LA INVENCIÓN

La presente invención proporciona una composición que comprende un copolímero de bloques asociado con un polinucleótido, tal como se describe en las reivindicaciones. También se proporciona un método para la liberación intracelular de un polinucleótido utilizando la composición de la invención. La presente invención también proporciona una composición que comprende una micela polimérica y un polinucleótido asociado con la micela, tal como se describe en las reivindicaciones.

Entre los diversos aspectos de la presente descripción es una composición que comprende un copolímero de bloques asociado con un polinucleótido. El copolímero de bloques comprende al menos tres bloques de composición diferente. El primero de los tres bloques es un bloque de polímero hidrófilo. El segundo de los tres bloques es un bloque de polímero, que se encuentra entre el primer y el tercer bloque, estando el segundo bloque (i) asociado con el polinucleótido. El tercer bloque es un bloque de polímero hidrófobo que comprende unidades de repetición aniónicas; las unidades de repetición aniónicas tienen una población de aniones como sustituyentes de los mismos que varía en número de una manera dependiente del pH, la población es mayor a pH 7, 4 que a pH 5.

Entre los diversos aspectos de la presente descripción es una composición que comprende un copolímero de bloques asociado con un polinucleótido, comprendiendo el copolímero de bloques un primer bloque, siendo el primer bloque un bloque de polímero hidrófilo adecuado para dirigir o proteger estéricamente el polinucleótido, un segundo bloque entre el primer bloque y un tercer bloque, asociándose el segundo bloque con el polinucleótido, y un tercer bloque, comprendiendo el tercer bloque un bloque de polímero hidrófobo desestabilizante de membrana y dependiente del pH.

Otro aspecto de la descripción se dirige a una composición que comprende un copolímero de bloques asociado con un polinucleótido, comprendiendo el copolímero de bloques un primer bloque, siendo el primer bloque un bloque de polímero hidrófilo, un segundo bloque entre el primer bloque y un tercer bloque, asociándose el segundo bloque con el polinucleótido, y un tercer bloque, siendo o comprendiendo el tercer bloque un bloque de polímero que comprende una pluralidad de residuos monoméricos hidrófobos y una pluralidad de residuos monoméricos aniónicos.

Otro aspecto de la descripción se refiere a una composición que comprende un copolímero de bloques asociado con un polinucleótido, comprendiendo el copolímero de bloques un primer bloque, siendo el primer bloque un bloque de polímero hidrófilo, un segundo bloque entre el primer bloque y un tercer bloque, siendo el segundo bloque hidrófilo y comprendiendo una pluralidad de residuos monoméricos catiónicos en asociación iónica con el polinucleótido, y un tercer bloque, comprendiendo el tercer bloque un bloque de polímero hidrófobo desestabilizante de membrana y dependiente del pH.

Otro aspecto de la descripción se refiere a una composición que comprende un copolímero de bloques asociado con un polinucleótido, comprendiendo el copolímero de bloques un primer bloque, siendo el primer bloque un bloque de polímero hidrófilo, un segundo bloque entre el primer bloque y un tercer bloque, siendo el segundo bloque un bioconjugado de polímero que comprende el polinucleótido acoplado covalentemente al segundo bloque, y un tercer bloque, siendo o comprendiendo el tercer bloque un bloque de polímero hidrófobo desestabilizante de membrana y dependiente del pH.

Otro aspecto de la descripción se refiere a una composición que comprende un copolímero de bloques asociado con un polinucleótido, comprendiendo el copolímero de bloques un primer bloque, siendo el primer bloque un bloque de polímero hidrófilo adecuado para dirigir o proteger estéricamente el polinucleótido, un segundo bloquear entre el primer bloque y un tercer bloque, siendo el segundo bloque un bioconjugado de polímero que comprende el polinucleótido

acoplado covalentemente al segundo bloque, y un tercer bloque, siendo o comprendiendo el tercer bloque un bloque de polímero que comprende una pluralidad de residuos monoméricos hidrófobos y una pluralidad de residuos monoméricos aniónicos.

En otro aspecto de la descripción se refiere a micelas poliméricas que comprenden las composiciones descritas en el presente documento.

Se proporciona en ciertas realizaciones en el presente documento una composición que comprende una micela polimérica y un polinucleótido asociado con la micela, comprendiendo la micela una pluralidad de copolímeros de bloque que comprende:

a. un primer bloque, siendo el primer bloque un bloque de protección hidrófilo;

b. un segundo bloque, estando el segundo bloque entre el primer bloque y un tercer bloque, siendo el segundo bloque un bloque portador de polinucleótido; y

c. un tercer bloque, siendo el tercer bloque un bloque hidrófobo desestabilizante de membrana y dependiente del pH; asociándose la pluralidad de copolímeros de bloque en la micela de tal manera que la micela es estable en un medio acuoso a pH 7, 4.

Se proporciona en ciertas realizaciones en el presente documento una composición que comprende una micela polimérica y un polinucleótido asociado con la micela, comprendiendo la micela una pluralidad de copolímeros de bloque que comprende:

a. un primer bloque, siendo el primer bloque un bloque de polímero hidrófilo adecuado para dirigir o proteger estéricamente el polinucleótido,

b. un segundo bloque entre el primer bloque y un tercer bloque, asociándose el segundo bloque al polinucleótido; y

c. un tercer bloque, comprendiendo el tercer bloque un bloque de polímero hidrófobo desestabilizante de membrana y dependiente del pH; asociándose la pluralidad de copolímeros de bloque en la micela, siendo la micela estable en un medio acuoso a pH 7, 4.

Se proporciona en ciertas realizaciones en el presente documento una composición que comprende una micela polimérica y un polinucleótido asociado con la micela, comprendiendo la micela una pluralidad de copolímeros de bloque que comprende:

a. un primer bloque, siendo el primer bloque un bloque de polímero hidrófilo,

b. un segundo bloque entre el primer bloque y un tercer bloque, asociándose el segundo bloque al polinucleótido; y

c. un tercer bloque, siendo o comprendiendo el tercer bloque un bloque de polímero que comprende una pluralidad de residuos monoméricos hidrófobos y una pluralidad de residuos monoméricos aniónicos, estando la pluralidad de copolímeros de bloque asociados en la micela, siendo la micela estable en un medio acuoso a pH 7, 4.

Se proporciona en ciertas realizaciones en el presente documento una composición que comprende una micela polimérica y un polinucleótido asociado con la micela, comprendiendo la micela una pluralidad de copolímeros de bloque que comprende:

a. un primer bloque, siendo el primer bloque un bloque de polímero hidrófilo,

b. un segundo bloque entre el primer bloque y un tercer bloque, siendo el segundo bloque hidrófilo y comprendiendo una pluralidad de residuos monoméricos catiónicos en asociación iónica con el polinucleótido, y

c. un tercer bloque, comprendiendo el tercer bloque un bloque de polímero hidrófobo desestabilizante de membrana y dependiente del pH, estando asociada la pluralidad de copolímeros de bloque en la micela, siendo la micela estable en un medio... [Seguir leyendo]

1. Composición que comprende un copolímero de bloques asociado con un polinucleótido, comprendiendo el copolímero de bloques un primer, un segundo y un tercer bloque de composición distinta, siendo el primer bloque un bloque de polímero hidrófilo, estando el segundo bloque situado entre el primer y el tercer bloque y asociado con el polinucleótido, siendo el tercer bloque un bloque de polímero hidrófobo que comprende unidades de repetición aniónicas, teniendo las unidades de repetición aniónicas una población de aniones como sustituyentes de las mismas que varía en número de una manera dependiente del pH, siendo la población mayor a pH 7, 4 que a pH 5, en la que al menos el 90% de las unidades de repetición del primer, segundo y tercer bloque no son residuos de aminoácidos unidos por un enlace peptídico.

2. Composición, según la reivindicación 1, en la que: el primer, segundo y terce bloque comprenden unidades de repetición, las unidades de repetición tienen átomos de cadena y grupos colgantes acoplados covalentemente a los átomos de cadena, y los átomos de cadena son carbono o una combinación de átomos de carbono y azufre u oxígeno; preferiblemente, en la que los grupos colgantes se seleccionan del grupo que consiste en hidrógeno, hidrocarbilo, hidrocarbilo sustituido, carbonilo sustituido o heterociclo;

o el primer, segundo y tercer bloque del copolímero de bloques comprenden unidades de repetición derivadas de monómeros de ácido acrílico opcionalmente sustituidos, monómeros de vinil arilo opcionalmente sustituidos, monómeros de acrilamida opcionalmente sustituidos, monómeros de acrilato opcionalmente sustituidos y combinaciones de los mismos.

3. Composición, según la reivindicación 1, en la que el primer, segundo y tercer bloque comprenden unidades de repetición de fórmula 1:

en la que * designa el punto de unión de la unidad de repetición de Fórmula 1 a otras unidades de repetición; cada X1 y X2 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, hidrocarbilo, hidrocarbilo sustituido, heterociclo, y carbonilo sustituido, a condición, sin embargo, X1 y X2 no se seleccionen, en la misma unidad de repetición, del grupo que consiste en arilo, heteroarilo, carbonilo heterosustituido, y combinaciones de los mismos; cada X3 es independientemente hidrógeno, alquilo o alquilo sustituido, y cada X4 es independientemente carbonilo heterosustituido, arilo o heteroarilo; preferiblemente, en la que el primer, segundo y tercer bloque comprenden unidades de repetición de fórmula 1 en las que X4 es -C (O) OX40 , -C (O) SX40 , o -C (O) NX40X41 , y X40 y X41 son independientemente hidrógeno, hidrocarbilo, hidrocarbilo sustituido, heterohidrocarbilo, heterohidrocarbilo sustituido, o heterociclo.

4. Composición, según la reivindicación 1, en la que el primer o segundo bloque comprende unidades de repetición derivadas de un monómero polimerizable que tiene la fórmula:

en la que: n es un número entero que varía de 2 a 20; X es - (CR1R2) m-en el que m es 0-10, y en el que una o más unidades (CR1R2) están opcionalmente sustituidas con – NR1R2, -OR1 o –SR1, Y es -O-, -NR4-o - (CR1R2) -, cada uno de R1, R2, R3, Z1 y Z2 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, y C1-C3alquilo opcionalmente sustituido, R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, y C1-C6alquilo opcionalmente sustituido, R8 es hidrógeno o (CR1R2) mR9, en el que m es 0-10, y en el que una o más unidades (CR1R2) están opcionalmente sustituidas con –NR1R2, -OR1 o –SR1, y R9 es hidrógeno, halógeno, C1-C3alquilo opcionalmente sustituido, poliol, vitamina, péptido o molécula pequeña que tiene un peso molecular de 200 a 1200 Daltons, o un grupo conjugable.

5. Composición, según cualquiera de las reivindicaciones 1, 3 ó 4, en la que el primer bloque es un copolímero al azar que comprende dos o más unidades de repetición de composición distinta.

6. Composición, según la reivindicación 1, en la que el primer bloque comprende unidades de repetición correspondientes a la fórmula 1ETS:

en la que * designa el punto de unión de la unidad de repetición de Fórmula 1ETS a otras unidades de repetición, X3 es alquilo, y X44 es un resto de reconocimiento o de protección; preferiblemente, en la que X44 es un poliol, vitamina, péptido o molécula pequeña que tiene un peso molecular de 200 a 1200 Daltons.

7. Composición, según la reivindicación 1, en la que el segundo bloque comprende unidades de repetición correspondientes a la fórmula 1:

X4 X45

es -C (O) OX45 o -C (O) NX45X41 , es hidrocarbilo sustituido, heterohidrocarbilo sustituido, o heterociclo, y X45 comprende un resto disulfuro; preferiblemente, en la que X45 comprende el polinucleótido, y el polinucleótido está unido covalentemente a la composición a través de X45 .

8. Composición, según cualquiera de las reivindicaciones 1, 3, 6 ó 7, en la que el primer, segundo o tercer bloque consisten cada uno esencialmente en unidades de repetición que son residuos de monómero o monómeros etilénicamente insaturados.

9. Composición, según la reivindicación 1, en la que el tercer bloque comprende unidades de repetición correspondientes a la fórmula 1A:

en la que * designa el punto de unión de la unidad de repetición de Fórmula 1A a otras unidades de repetición, y X3 es alquilo; y/o en la que el tercer bloque comprende unidades de repetición correspondientes a la fórmula 1E:

en la que * designa el punto de unión de la unidad de repetición de Fórmula 1E a otras unidades de repetición, y X3 y X47 son independientemente alquilo; y/o en la que el tercer bloque comprende unidades de repetición correspondientes a la fórmula 1C:

en la que * designa el punto de unión de la unidad de repetición de Fórmula 1C a otras unidades de repetición, X3 es alquilo y X48 es alquilo sustituido con amino.

10. Composición, según la reivindicación 1, en la que el tercer bloque comprende unidades de repetición aniónicas derivadas de la polimerización de un ácido (C2-C8) alquilacrílico; preferiblemente en la que las unidades de repetición aniónicas derivan de la polimerización de ácido propilacrílico.

11. Composición, según cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en la que el polinucleótido es un desoxirribonucleótido, un siARN, un oligonucleótido antisentido, un sustrato dicer, un miARN, un aiARN o un shARN; preferiblemente, en la que el polinucleótido es un siARN.

12. Composición, según cualquiera de las reivindicaciones 1-11, para utilizar en la liberación intracelular de un polinucleótido.

13. Método para la liberación intracelular de un polinucleótido, que comprende poner en contacto una célula con una composición según cualquiera de las reivindicaciones 1-11.

14. Composición que comprende una micela polimérica y un polinucleótido asociado con la micela, comprendiendo la

micela una pluralidad de copolímeros de bloque que comprende (i) un primer bloque, siendo el primer bloque un bloque de polímero hidrófilo, (ii) un segundo bloque entre el primer bloque y un tercer bloque, estando el segundo bloque asociado con el polinucleótido, y (iii) un tercer bloque, siendo o comprendiendo el tercer bloque un bloque de polímero que comprende una pluralidad de residuos monoméricos hidrófobos y una pluralidad de residuos monoméricos aniónicos; asociándose la pluralidad de copolímeros de bloque en la micela, y siendo la micela estable en un medio acuoso a pH 7, 4.

15. Composición farmacéutica que comprende la composición, según cualquiera de las reivindicaciones 1-11, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.