Combinaciones de compuestos inhibidores de fosfoinositida 3-cinasa y agentes quimioterapéuticos, y metodos para su uso.

Una combinación terapéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto elegido entre 4-(2-(1H-indazol-4-il)-6-((4- (metilsulfonil) piperazin-1-il) metil) tieno [3,

2 -d] pirimidin-4-il) morfolina, que tiene la fórmula Ia:**Fórmula**

(S)-1-(4-((2-(2-aminopirimidin-5-il)-7-metil-4-morfolinotieno [3,2-d]pirimidin-6-il)metil) piperazin-1-il) -2-hidroxipropan- 1-ona ,que tiene la fórmula Ib **Fórmula**

y estereoisómeros, isómeros geométricos, tautómeros, o sales de los mismos aceptables farmacéuticamente; y una cantidad terapéuticamente efectiva de un agente quimioterapéutico elegido entre erlotinib, docetaxel, 5-FU, gemcitabina, PD-0325901, cisplatino, carboplatino, paclitaxel, bevacizumab, trastuzumab, pertuzumab, temozolomida, tamoxifeno, doxorrubicina, Akti-1/2, HPPD, rapamicina, y lapatinib; en donde la combinación terapéutica tiene una puntuación de CI (índice de combinación) inferior a 0,8 en una línea de células de tipo tumoral, siendo calculada la puntación del CI por el método de Chou y Talalay a partir de los valores de EC50 obtenidos en un ensayo de proliferación celular in vitro y siendo elegido el tipo de tumor entre tumores de mama, cervical, colon, endometrio, glioma, pulmón, melanoma, ovario, pancreático y de próstata.

Combinaciones de compuestos inhibidores de fosfoinositida 3-cinasa y agentes quimioterapéuticos, y métodos para su uso

Campo de la invención

La invención se refiere generalmente a combinaciones farmacéuticas de compuestos con actividad contra trastornos hiperproliferativos tales como el cáncer, y que incluyen compuestos que inhiben la actividad de la cinasa PI3. La invención se refiere también a métodos de uso de los compuestos para el diagnóstico in vitro, in situ, e in vivo o el tratamiento de células de mamífero, o de condiciones patológicas asociadas.

Fundamentos de la invención

El fosfatidil-inositol es uno de los fosfolípidos que se encuentran en las membranas de las células, y que participan en la transducclón señales intracelulares. La señalización celular a través de fosfoinositidos 3'-fosforllados ha sido Implicada en una variedad de procesos celulares, por ejemplo, la transformación maligna, la señalización de factores de crecimiento, la inflamación y la inmunidad (Rameh et al. (1999) J. Biol Chem. 274: 8347 - 835). La enzima responsable de la generación de estos productos de señalización fosforilados, fosfatidil inosltol 3-c¡nasa (también denominada PI3-cinasa o PI3K), fue identificada originalmente como una actividad asociada con oncoproteínas virales y tlroslna cinasas receptoras del factor de crecimiento que fosforilan el fosfatidil inosltol (Pl) y sus derivados fosforilados en el hidroxilo 3' del anillo de inositol (Panayotou et al (1992) Trends Cell Biol 2: 358 - 6). Las fosfoinositida 3-cinasas (PI3K) son cinasas de lípidos que fosforilan lípidos en el resto 3-hldroxllo de un anillo de inositol (Whitman et al (1988) Nature, 332: 664). Los fosfolípidos 3-fosforilados (PIP3s) generados por PI3-clnasas actúan como cinasas que reclutan segundos mensajeros con dominios de unión con lípidos (Incluyendo reglones de homología plekstrin (PH)), tales como Akt y PDK1, cinasa-1 fosfolnosltldo-dependiente (Vlvanco et al ( 22) Nature Cáncer Rev. 2: 489; Phillips et al. (1998) Cáncer 83:41).

La familia de PI3 cinasa comprende al menos 15 enzimas diferentes sub-clasificadas por su homología estructural y se dividen en 3 clases basadas en la homología de secuencias y el producto formado por la catálisis enzlmátlca. Las cinasas PI3 de clase I se componen de 2 subunidades: una subunidad catalítica de 11 kd y una subunldad reguladora de 85 kd. Las subunidades reguladoras contienen dominios SH2 y se unen a residuos de tirosina fosforilados por receptores del factor de crecimiento con una actividad de tirosina cinasa o productos oncogénicos, induciendo de esta manera la actividad de PI3K de la subunidad catalítica p11, que fosforila su sustrato lipídico. Las cinasas PI3 de clase I están involucradas en importantes eventos de transducción de señales aguas abajo de citocinas, integrinas, factores de crecimiento e inmunorreceptores, lo que sugiere que el control de esta ruta puede conducir a efectos terapéuticos importantes tales como la modulación de la proliferación celular y la carcinogénesis. Las PI3Kde clase I pueden fosforilar fosfatidil inositol (Pl), fosfatidil inositol-4-fosfato, y fosfatidil inositol-4,5-bifosfato (PIP2) para producir fosfatidil inositol-3-fosfato (PIP), fosfatidil inositol-3,4-bifosfato y fosfatidil inositol-3,4,5-trifosfato, respectivamente. Las PI3Ks de clase II fosforilan Pl y fosfatidil inositol-4-fosfato. Las PI3Ks de clase III pueden fosforilar solamentre Pl. La principal isoforma de la PI3-cinasa en el cáncer es la PI3-cinasa de clase I, p11a. (patente de Estados Unidos No. 5.824.492; patente de EE.UU. No. 5.846.824; patente de Estados Unidos No. 6.274.327). Otras isoformas están implicadas en enfermedades cardiovasculares e inmuno-inflamatorias (Workman P (24) Biochem Soc Trans 32: 393 - 396; Patel et al (24) Proc. Am. Assoc. of Cáncer Res. (Abstract LB-247) 95th Annual Meeting, marzo 27-31, Orlando, Florida, EE.UU.; Ahmadi K y Waterfield MD (24) "Phosfoinositide 3- Kinase: Function and Mechanisms" Encyclopedia of Biological Chemistry (Lennarz W J, Lañe M D eds) Elsevier/ Academic Press), y las mutaciones de oncogenes en PI3 cinasa (Samuels et al (24), Science 34: 554). Las mutaciones oncogénicas de p11 alfa se han encontrado con una frecuencia significativa en tumores sólidos de colon, mama, cerebro, hígado, ovario, gástrico, de pulmón, y cabeza y cuello. Se encuentran anomalías PTEN en cánceres glioblastoma, melanoma, próstata, endometrio, ovario, mama, pulmón, cabeza y cuello, hepatocelular, y de tiroides.

La purificación inicial y la clonación molecular de PI3 cinasa reveló que era un heterodímero consistente en subunidades p85 y p11 (Otsu et al (1991) Cell 65: 91 - 14; Hiles et al (1992) Cell 7: 419 - 29 ). Desde entonces, se han identificado cuatro PI3Ks de Clase I distintas, designadas a PI3K (alfa), (3 (beta), ó (delta), y cu (gamma), consistiendo cada una en una subunidad catalítica de 11 kDa distinta y una subunidad reguladora. Más concretamente, tres de las subunidades catalíticas, es decir p11 alfa, beta p11 y p11 delta, interaccionan cada una con la misma subunidad reguladora, p85; mientras que p11 gamma interacciona con una subunidad reguladora distinta, p11. Los patrones de expresión de cada una de estas PI3K en células y tejidos humanos también son distintos. En cada uno de los subtipos de PI3K alfa, beta y delta, la subunidad p85 actúa localizando PI3 cinasa a la membrana plasmática mediante la interacción de su dominio SH2 con restos de tirosina fosforilados (presente en un contexto de secuencia adecuado) en proteínas diana (Rameh et al (1995) Cell, 83: 821 - 3; Volinia et al (1992) Oncogene, 7: 789 - 93).

La ruta PI3 cinasa/Akt/PTEN es una diana atractiva para el desarrollo de fármacos contra el cáncer ya que sería de esperar que tales agentes inhibirían la proliferación, revertirían la represión de la apoptosis y superarían la

resistencia a agentes citotóxicos en las células cancerosas. Se han publicado inhibidores de PI3 cinasa (Yaguchi et al (26) Jour. of the Nat. Cáncer Inst. 98 (8): 545 - 556; patente de Estados Unidos No. 7.173.29; patente de EE.UU. No. 7.37.915; patente de EE.UU. No. 6.68.56; patente de Estados Unidos No. 6.68.53; patente de EE.UU. No. 6.838.457; patente de Estados Unidos No. 6.77.641; patente de Estados Unidos No. 6.653.32; patente de Estados Unidos No. 6.43.588; documentos WO 26/4631, WO 26/4635, WO 26 / 464; WO 27/4286; WO 27/4281; WO 24/1795, US 24/92561, WO 24/7491, WO 24/6916, WO 23/37886, US 23/14974, WO 23/35618, WO 23/34 997, US 23/158212; EP 1417976, US 24/53946; JP 21247477; JP 817599; JP 81767). Los análogos de wortmanina tienen actividad de cinasa PI3 en mamíferos (patente de Estados Unidos N° 6.73.414; WO 97/15658.).

Los compuestos de tienopirimidina de fórmulas I y II tienen unión p11 alfa, actividad inhibidora de cinasa PI3 e inhiben el crecimiento de células cancerosas (documentos WO 26/4631, US 28/39459, US 28/76768, US 28/76758, WO 28 / 774; WO 28/73785).

I II

El compuesto de Fórmula I, GDC-941 (Genentech Inc.), es un inhibidor selectivo, biodisponible por vía oral, de PI3K con propiedades farmacocinéticas y farmacéuticas prometedoras (Belvin et al., American Association for Cáncer Research Annual Meeting 28, 99a: 15 de abril, Abstract 44; Folkes et al, American Association for Cáncer Research Annual Meeting 28, 99a: 14 de abril, Abstract LB-146; Friedman et al, American Association for Cáncer Research Annual Meeting 28, 99a: 14 de abril, Abstract LB-11).

Las combinaciones de agentes terapéuticos farmacéuticos anticancerosos administrados simultáneamente o secuencialmente en un régimen de dosificación son ahora comunes en el tratamiento del cáncer. La exitosa terapia de combinación proporciona un efecto mejor e incluso sinérgico sobre la monoterapia, es decir, el tratamiento farmacéutico limitado a un fármaco. Se ha estudiado la terapia de combinación para el tratamiento de trastornos hiperproliferativos tales como el cáncer, incluyendo la actividad antitumoral de erlotinib en combinación con capecitabina en modelos de xenoinjerto tumoral humano (Ouchi et al (26) Cáncer Chemother. Pharmacol. 57: 693 - 72), y erlotinib en combinación con gemcitabina y cisplatino en modelos de cáncer de pulmón no microcítico (o de células no pequeñas: Non Small Cell Lung Cáncer: NSCLC) de xenoinjertos tumorales (Higgins et al (24) Anti- Cancer Drugs 15: 53 - 512). La investigación preclínica ha sido la base para la predicción de la sinergia de la etapa clínica de combinaciones terapéuticas farmacéuticas anticancerosas, que incluyen capecitabina y taxanos para el tratamiento del cáncer de mama (Sawada et al (1998) Clin. Cáncer Res. 4: 113 - 119). Ciertas dosis y programas de terapia de combinación de capecitabina... [Seguir leyendo]

1. Una combinación terapéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto elegido entre 4-(2-(1H-indazol-4-il)-6-((4- (metilsulfonil) piperazin-1-il) metil) tieno [3,2 -d] pirimidin-4-il) morfolina, que tiene la fórmula la:

Ta;

(S)-1-(4-((2-(2-aminopirimidin-5-il)-7-metil-4-morfolinotieno [3,2-d]pirimidin-6-il)metil) piperazin-1-il) -2-hidroxipropan- 1-ona ,que tiene la fórmula Ib

y estereoisómeros, isómeros geométricos, tautómeros, o sales de los mismos aceptables farmacéuticamente; y una cantidad terapéuticamente efectiva de un agente quimioterapéutico elegido entre erlotinib, docetaxel, 5-FU, gemcitabina, PD-32591, cisplatino, carboplatino, paclitaxel, bevacizumab, trastuzumab, pertuzumab, temozolomida, tamoxifeno, doxorrubicina, Akt¡-1/2, HPPD, rapamicina, y lapatinib; en donde la combinación terapéutica tiene una puntuación de Cl (índice de combinación) inferior a ,8 en una línea de células de tipo tumoral, siendo calculada la puntación del Cl por el método de Chou y Talalay a partir de los valores de EC5 obtenidos en un ensayo de proliferación celular in vitro y siendo elegido el tipo de tumor entre tumores de mama, cervical, colon, endometrio, glioma, pulmón, melanoma, ovario, pancreático y de próstata.

2. Una combinación según la reivindicación 1a, en la que la sal aceptable farmacéuticamente del compuesto de fórmula la o Ib se elige entre una sal formada con ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, ácido metanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido fórmico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido propiónico, ácido oxálico, ácido malónico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido láctico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido etanosulfónico, ácido aspártico y ácido glutámico.

3. Una combinación según la reivindicación 1a o 2a, que está en forma de una formulación combinada.

4. Una combinación según la reivindicación 3a, que comprende un agente de deslizamiento aceptable farmacéuticamente elegido entre dióxido de silicio, celulosa en polvo, celulosa microcristalina, estearatos metálicos, aluminosilicato sódico, benzoato sódico, carbonato cálcico, silicato cálcico, almidón de maíz, carbonato de magnesio, talco libre de amianto, stearowet C, almidón, almidón 15, laurilsulfato de magnesio, óxido de magnesio y combinaciones de los mismos.

5. Una combinación según la reivindicación 1a o 4a, en la que el compuesto y el agente quimioterapéutico comprenden cada uno de ellos una cantidad de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1 mg por forma de dosificación unitaria.

6. Una combinación según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, para ser usada en el tratamiento de un trastorno hiperproliferativo que es el cáncer escogido entre mama, cervical, colon, endometrio, glioma, pulmón, melanoma, ovario, páncreas y próstata.

7. Una combinación para ser usada según la reivindicación 6a, en la que el cáncer se elige entre el cáncer de mama y el cáncer de pulmón.

8. Una combinación para ser usada según la reivindicación 6a, en la que el cáncer expresa un K-ras muíante.

9. Una combinación para ser usada según la reivindicación 8a, en la que la combinación comprende fórmula la y docetaxel.

1. Un kit que comprende

a) una combinación farmacéutica como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1a a 5a, y

b) instrucciones para su uso en el tratamiento de un tumor elegido entre mama, cervical, colon, endometrio, glioma, pulmón, melanoma, ovario, páncreas y próstata.

11. Un producto que comprende un compuesto elegido entre 4-(2-(1H-indazol-4-¡l)-6-((4-(metilsulfonil) piperazin-1-il) metil) tieno [3,2 -d] pirimidin-4-il) morfolina que tiene la fórmula la:

(S)-1-(4-((2-(2-aminopirimidin-5-il)-7-met¡l-4-morfolinotieno [3,2-d]pirimidin-6-il)metil) piperazin-1-il) -2-hidroxipropan- 1-ona ,que tiene la fórmula Ib:

y estereoisómeros, isómeros geométricos, tautómeros o sales de los mismos aceptables farmacéuticamente; y un agente quimioterapéutico elegido entre erlotinib, docetaxel, 5-FU, gemcitabina, PD-32591, cisplatino, carboplatino, paclitaxel, bevacizumab, trastuzumab, pertuzumab, temozolomida, tamoxifeno, doxorrubicina, Akti-1/2, HPPD, rapamicina, y lapatinib; como una formulación combinada para uso separado, simultáneo o secuencial en el tratamiento de un tipo de tumor elegido entre mama, cervical, colon, endometrio, glioma, pulmón, melanoma, ovario, pancreático y próstata; en donde la combinación de dicho compuesto y dicho agente quimioterapéutico tiene una puntuación de Cl (índice de combinación) inferior a ,8 en una línea de células de un tipo de tumor como se define antes, siendo calculada la puntación del Cl por el método de Chou y Talalay a partir de los valores de EC5 obtenidos en un ensayo de proliferación celular in vitro.

12. Un compuesto elegido entre 4-(2-(1H-indazol-4-il)-6-((4-(metilsulfonil)piperazin-1-il)metil)tieno[3,2- d]pirimidin-4-il) morfolina que tiene la fórmula la:

(S)-1-(4-((2-(2-am¡nopirimidin-5-il)-7-metil-4-morfolinotieno [3,2-d]pirimidin-6-il)metil) piperazin-1-il) -2-hidroxipropan- 1-ona ,que tiene la fórmula Ib:

y estereoisómeros, isómeros geométricos, tautómeros o sales de los mismos aceptables farmacéuticamente; para 5 su uso en combinación con un agente quimioterapéutico elegido entre erlotinib, docetaxel, 5-FU, gemcitabina, PD- 32591, cisplatino, carboplatino, paclitaxel, bevacizumab, trastuzumab, pertuzumab, temozolomida, tamoxifeno, doxorrubicina, Akti-1/2, HPPD, rapamicina, y lapatinib para el tratamiento de un tipo de tumor elegido entre mama, cervical, colon, endometrio, glioma, pulmón, melanoma, ovario, pancreático y próstata; en donde la combinación de dicho compuesto y dicho agente quimioterapéutico tiene una puntuación de Cl (índice de combinación) inferior a ,8 1 en una línea de células de un tipo de tumor como se define antes, siendo calculada la puntación del Cl por el método de Chou y Talalay a partir de los valores de EC5o obtenidos en un ensayo de proliferación celular in vitro.

13. Un agente quimioterapéutico elegido entre erlotinib, docetaxel, 5-FU, gemcitabina, PD-32591, cisplatino, carboplatino, paclitaxel, bevacizumab, trastuzumab, pertuzumab, temozolomida, tamoxifeno, doxorrubicina, Akti-1/2, HPPD, rapamicina, y lapatinib para su uso en combinación con un compuesto elegido entre 4-(2-(1H-indazol-4-il)-6- 15 ((4-(metilsulfonil) piperazin-1 -il)metil) tieno [3,2-d] pirimidin-4-il) morfolina que tiene la fórmula la:

(S)-1-(4-((2-(2-aminop¡rimidin-5-il)-7-metil-4-morfol¡not¡eno [3,2-d]pirimidin-6-il)metil) piperazin-1-il) -2-hidroxipropan- 1-ona que tiene la fórmula Ib:

y estereoisómeros, isómeros geométricos, tautómeros o sales de los mismos aceptables farmacéuticamente; para el tratamiento de un tipo de tumor elegido entre mama, cervical, colon, endometrio, glioma, pulmón, melanoma, ovario, pancreático y próstata; en donde la combinación de dicho compuesto y dicho agente quimioterapéutico tiene una puntuación de Cl (índice de combinación) inferior a ,8 en una línea de células de un tipo de tumor como se define antes, siendo calculada la puntación del Cl por el método de Chou y Talalay a partir de los valores de EC5 25 obtenidos en un ensayo de proliferación celular in vitro.