Biomarcadores de seguridad renal predictiva y señales de biomarcadores para monitorizar la función renal.

Un método para evaluar la toxicidad renal en un individuo después de la administración de compuestos que se sospecha que producen toxicidad renal,

en donde la toxicidad renal se identifica mediante medición de un conjunto de biomarcadores en una muestra de orina del individuo y comparación de la cantidad de biomarcador medida con la correspondiente cantidad en un individuo sano, en donde los biomarcadores son seleccionados del grupo que consiste de los biomarcadores listados en la Tabla 1 e incluyen la proteína cistatina C y en donde la toxicidad renal son las alteraciones/daños glomerulares.

Biomarcadores de seguridad renal predictiva y señales de blomarcadores para monltorlzar la función renal Campo de la Invención

La invención se relaciona con señales de biomarcadores y su uso en métodos y dispositivos para la monitorización, el pronóstico, el diagnóstico y/o tratamiento de la toxicidad renal, y más específicamente la toxicidad tubular renal como consecuencia de la enfermedad o el tratamiento con fármacos.

Antecedentes de la Invención

La progresión del fallo renal en etapa terminal es la ruta final común de diversas nefropatías proteinúricas. El grado de proteinuria está asociado con la rata de progresión de la enfermedad renal.

En las enfermedades proteinúricas humanas, la lesión tubulointersticial es un predictor mejor del deterioro de la función renal que el daño glomerular. Se cree que las proteínas plasmáticas tubulotóxicas filtradas son responsables por esta asociación, aunque la naturaleza de estas proteínas es incierta. Las proteínas filtradas ejercen en parte sus efectos perjudiciales a través de la activación de las células tubulares proximales (PTC), las cuales excretan quimioquinas y citoquinas, lo que da como resultado la inflamación, biotransformación de fibroblastos intersticiales, fibrosis y apoptosis. Esto conduce finalmente al fallo renal en fase terminal. Por lo tanto, se considera que las células epiteliales tubulares renales son cruciales en la progresión del daño intersticial. Se ha propuesto que la proteinuria causa lesión tubular y fibrosis intersticial.

Gunel et al. (European Journal of Cáncer, vol. 37, 1 April 2001, page S359) y Gunel et al. (Nephrology 2002; 7, SOSO) se refieren con la evaluación de los niveles de cistatina C en suero y escintigrafía renal con 99mtecnecio- mercaptoacetlltrlgllclna-3 para la detección de la toxicidad renal inducida por cisplatlno en pacientes con cáncer. La US 2004/241774 A1 describe kits para el diagnóstico de enfermedades renales. La aparición de los trastornos tubulares en los pacientes con diabetes se diagnostica utilizando un valor de corte calculado mediante la medición de las relaciones de concentración de cistatina C a la concentración de creatina descargada en la orina. Han et al. (Clinical Nephrology, vol. 48, no. 2, 1997, pages 104-108) discute la medición de cistatina C y su uso práctico en pacientes con diversas enfermedades renales.

Existe una necesidad continua en la técnica para determinar y monitorizar la función renal y hepática en los animales y en el hombre después de tratamiento con fármacos o cuando la función renal es alterada debido a una enfermedad.

Resumen de la invención

La Invención provee un método para establecer la toxicidad renal en un individuo después de la administración del compuesto sospechoso de causar toxicidad renal, en donde la toxicidad renal se identifica mediante la medición de un conjunto de biomarcadores en una muestra de orina del individuo y la comparación de la cantidad de biomarcadores medido con la cantidad correspondiente en un individuo saludable, en donde los biomarcadores se seleccionan del grupo que consiste de los biomarcadores listados en la Tabla 1 e incluyen la proteína cistatina C, y en donde la toxicidad renal son alteraciones/daños glomerulares.

La Invención también provee un método para diagnosticar, predecir y clasificar la toxicidad renal por el uso de la proteína cistatina C en la orina mostrando alteraciones/daños glomerulares.

La efectividad de un agente para afectar la expresión del marcador se puede monitorizar en ensayos clínicos de sujetos que reciben tratamiento para la toxicidad renal. Así, la invención también provee un método para monitorizar la efectividad del tratamiento de un sujeto con un agente (por ejemplo, un agonista, antagonista, peptidomimético, proteína, péptido, ácido nucleico, molécula pequeña, u otro candidato de fármaco) que comprende las etapas de: (i) obtener una muestra de orina preadministración de un sujeto antes de la administración del agente; (¡I) detectar el nivel de expresión de la cistatina C en la muestra previa a la administración; (iii) obtener una o más muestras de orina después de la administración del sujeto; (iv) detectar el nivel de expresión de cistatina C en las muestras posteriores a la administración; (v) comparar el nivel de expresión de cistatina C en la muestra de preadmlnlstración con el nivel de expresión de cistatina C en la muestra o muestras postadmlnlstraclón; y (vi) alterar la administración del agente al sujeto concordantemente, en donde el sujeto está recibiendo tratamiento para la toxicidad renal y la toxicidad renal son alteraciones/daños glomerulares. Por ejemplo, la administración modificada del agente puede ser deseable para Incrementar la expresión de los marcadores a los niveles 1 superiores a los detectados, esto es, para incrementar la efectividad del agente. Alternativamente, la administración incrementada/disminulda del agente puede ser deseable para incrementar/disminuir la efectividad del agente, respectivamente.

La Invención hace posible la predicción, clasificación, correlación y diagnóstico de la toxicidad renal con base en los datos presentados aquí.

Breve descripción de los dibujos

Las figuras de los dibujos representan realizaciones preferidas a modo de ejemplo, no a modo de limitaciones.

La Figura 1 es una lista de los compuestos administrados a los animales en los estudios in vivo.

La Figura 2 muestra el número de lesiones renales, que fueron publicados en los 10 estudios. Los números son subdivididos por grado y por los grupos de tratamiento (animales tratados con nefrotóxicos versus animales tratados con vehículos y hepatotóxico).

La Figura 3 es una tabla que muestra la hlstopatología de lesiones renales que se reportaron en los 10 estudios in vivo. El número de ocurrencias se listan categorlzadas por grado y por los grupos de tratamiento (tratados con nefrotóxicos versus tratados con vehículo y hepatotóxicos).

La Figura 4 es una matriz de hlstopatología renal para el estudio clsplatlno. Cada columna representa una lesión localizada. Cada fila corresponde a un animal, por lo que los animales se ordenan por grupos de dosis (controles, dosis baja, dosis media, y dosis alta) y dentro de cada grupo de dosis por punto de tiempo de terminación. SI se informó una lesión, el grado está representada por un cuadro de color naranja con el grado correspondiente en él (grado 1, grado 2-5, ningún ¡nforme/grado 0). Los procesos dominantes están etiquetados.

La Figura 5 es una tabla que muestra la hlstopatología de lesiones del hígado que se reportaron en los 10 estudios in vivo. Se lista el número de ocurrencias.

La Figura 6 es una tabla que muestra los resultados del análisis de las características del operador receptor (ROC) para biomarcadores y los estándares actuales para determinadas patologías. La columna 1 representa el biomarcador, la columna 2 la entidad molecular, La columna tres, el medio en el que se midió el biomarcador, y la columna 4 la patología para la que se realizó el análisis de ROC. La columna 5 representa las AUC y el error estándar de las mismas. La columna 6 Indica si un valor de biomarcador se Incrementa con la presencia de la patología correspondiente (+) o disminuye (-). Las columnas 7 y 8 despliegan el número de animales utilizados para los análisis correspondientes. La columna 11 muestra la sensibilidad correspondiente para el 95% de especificidad (columna 10) y la columna 9 el umbral correspondiente del biomarcador. Además de los biomarcadores de interés, también se muestran los resultados para estándares actuales de BUN y de la creatinina en suero para las 10 patologías de interés. Esta tabla demuestra el uso y el rendimiento de las ¡mplementaciones de dispositivos, ensayos, prueba de diagnóstico o kits de diagnóstico de los biomarcadores específicos listados para monítorízar las patologías renales específicas listadas.

La Figura 7 es un conjunto de gráficos de dispersión que muestra una evaluación de la hepatotoxícídad por diferentes biomarcadores de proteína. Los biomarcadores se obtuvieron de animales a los que se les administró vehículo o diferentes dosis del hepatotóxico ANIT (alfa-naftilisotiocianato). En este estudio se observaron hallazgos de histopatología relacionados con la dosis en el hígado, pero no en el riñón. En los gráficos se muestran los niveles de concentración relativos (veces del cambio versus controles). Los niveles de dosis están representados por los diferentes matices de color, los puntos de tiempo de muestreo están representados por etiquetas. Los niveles de biomarcadores se correlacionan bien con la dosis y por lo tanto con la hepatotoxicidad... [Seguir leyendo]

1. Un método para evaluar la toxicidad renal en un individuo después de la administración de compuestos que se sospecha que producen toxicidad renal, en donde la toxicidad renal se identifica mediante medición de un conjunto de biomarcadores en una muestra de orina del individuo y comparación de la cantidad de biomarcador medida con

la correspondiente cantidad en un individuo sano, en donde los biomarcadores son seleccionados del grupo que consiste de los biomarcadores listados en la Tabla 1 e incluyen la proteína cistatina C y en donde la toxicidad renal son las alteraciones/daños glomerulares.

2. Un método para diagnosticar, predecir y clasificar la toxicidad renal mediante el uso de la proteína cistatina C en orina para mostrar alteraciones/daños glomerulares.

3. Un método para monitorizar la efectividad del tratamiento de un sujeto con un agente que comprende las etapas

de: (i) obtener una muestra de orina preadministración de un sujeto antes de la administración del agente; (ii) detectar el nivel de expresión de la cistatina C en la muestra preadministración; (iii) obtener una o más muestras de orina posteriores a la administración del sujeto; (iv) detectar el nivel de expresión de la cistatina C en las muestras posteriores a la administración; (v) comparar el nivel de expresión de la cistatina C en la muestra previa a la 15 administración con el nivel de expresión de la cistatina C en la muestra o muestras posteriores a la administración; y (vi) alterar la administración del agente al sujeto en consecuencia, en donde el sujeto está recibiendo tratamiento para la toxicidad renal y la toxicidad renal son las alteraciones/daños glomerulares.