Utilización de péptidos de SCO-espondina para inhibir o prevenir la apoptosis neuronal mediada por los ligandos de receptores de la muerte celular.

Polipéptido que comprende la secuencia que consiste en

-W-S-G-W-S-S-C-S-R-S-C-G- (SEC ID Nº8),

para su utilización en un método para inhibir o prevenir la apoptosis neuronal mediada por al menos un ligando de receptores de la muerte celular seleccionado de TRAIL y FasL.

Utilización de péptidos de SCO-espondina para inhibir o prevenir la apoptosis neuronal mediada por los ligandos de receptores de la muerte celular.

Campo de la invención La invención se refiere a un polipéptido derivado de la TSR (unidades de tromboespondina tipo 1) de SCOespondina para inhibir o prevenir la apoptosis neuronal mediada por ligandos de receptores de la muerte celular, tales como TRAIL o FasL. Más particularmente, la invención se refiere a dicho polipéptido para inhibir o prevenir la apoptosis neuronal asociada con una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en trastornos neurodegenerativos, isquemia cerebral, traumatismos neuronales, enfermedades inflamatorias neuronales, y neurodegeneraciones víricas.

Antecedentes de la invención La pérdida selectiva de células neuronales mediante apoptosis es una característica habitual de las enfermedades neurodegenerativas crónicas tales como enfermedad de Alzheimer, esclerosis lateral amiotrófica, enfermedad de Parkinson y enfermedad de Huntington (Honig L.S. et al., 2001) . Aunque la necrosis se ha considerado como el tipo dominante de muerte celular en patologías agudas o subagudas inducidas por isquemia, toxinas, traumatismo e infección, cada vez más pruebas sugieren que la apoptosis contribuye significativamente a la pérdida neuronal en estos procesos.

Cualquiera que sea la causa subyacente, todos los sucesos apoptósicos neuronales comparten características comunes e implican un conjunto prescrito de factores que incluyen la cinasa N-terminal c-Jun (JNK) , que activa c-Jun e incrementa de ese modo la transcripción de diversos factores apoptósicos. Adicionalmente, se ha demostrado que la ruta de la muerte mitocondrial intrínseca, que implica Bax, Apaf-1, caspasa 9, y caspasa 3, es crítica para la apoptosis tanto en neuronas lesionadas en desarrollo y maduras. Bax, una proteína de la familia bcl-2, es de particular importancia en la apoptosis neuronal. Cuando se sobreexpresa, Bax promueve la muerte celular (Oltvai et al. 1993) , y las neuronas simpáticas deficientes en Bax carentes de NGF no sufren apoptosis normal (Deckwerth et al. 1996) . Otros miembros de la familia Bcl-2 son también importantes a la hora de modular la apoptosis neuronal, por ejemplo la fosforilación de Bim por JNK potencia la apoptosis dependiente de Bax. (Véase, por ejemplo, Putcha et al. 2001) .

El proceso apoptósico se puede disparar por señales intrínsecas o extrínsecas (Cifone M.G. et al. 1995; Li H. et al. 1999.) . El mejor ejemplo de la ruta extrínseca de apoptosis es la superfamilia de citocinas del factor de necrosis tumoral (TNF) , tal como TNF-, el ligando Fas (FasL) y el ligando inductor de apoptosis relacionado con TNF (TRAIL) . Por ejemplo, se ha dado a conocer que FasL está asociado con una variedad de trastornos neurológicos tales como esclerosis lateral amiotrófica (Yi et al., 2000) , enfermedad de Alzheimer (Su et al., 2003) , y apoptosis neuronal tras isquemia (Rosenbaum et al., 2000) . La activación de las rutas de señalización de receptores de la muerte también se ha detectado durante la enfermedad de Parkinson (Hartmann et al., 2002) . La función de otros receptores de la muerte, tales como receptores de TRAIL, también expresados en neuronas, se detectó durante la degeneración neuronal que se produce en varias patologías: procesos inflamatorios tales como esclerosis múltiple (Aktas et al., 2005) , modelos experimentales de neurodegeneración (Cantarella et al., 2003; Murata et al., 2006) , pacientes con Alzheimer (Uberti et al., 2004) e isquemia (Martin-Villalba et al., 1999) .

Por lo tanto, los métodos que inhiben o previenen la apoptosis neuronal serían particularmente beneficiosos para aquellos susceptibles de sufrir lesión neuronal o enfermedad neurodegenerativa.

Los polipéptidos utilizados se han descrito en la solicitud de patente internacional WO 99/03890, así como en Monnerie H. et al. (1998) y Meiniel et al. (2003) . Hasta ahora los polipéptidos son conocidos por sus propiedades para incrementar el crecimiento neurítico (incluyendo los axones) en las neuronas de la corteza cerebral en casos en los que ya se ha producido la degeneración celular, tal como en pacientes que sufren trastornos neurodegenerativos, lesiones neuronales o traumatismos, etc.

Sin embargo, nunca se ha sospechado ni sugerido un papel por su capacidad para prevenir la apoptosis neuronal tal como en trastornos neurodegenerativos, isquemia cerebral, traumatismos neuronales, enfermedades inflamatorias neuronales y neurodegeneraciones víricas en poblaciones en riesgo. Las poblaciones en riesgo incluyen personas que son susceptibles de sufrir tales trastornos, tales como, por ejemplo, miembros sanos de una familia en la que ya se ha producido la enfermedad de Alzheimer o en áreas en las que se podría extender un virus que induce neurodegeneración. En tales casos, existe la necesidad de un medicamento capaz de inhibir la apoptosis neuronal y prevenir consiguientemente tales enfermedades. La presente invención proporciona una solución a esta necesidad demostrando que los polipéptidos descritos son capaces de actuar sobre la apoptosis neuronal mediada por ligandos de receptores de la muerte celular (por ejemplo, TRAIL, FasL) .

Resumen de la invención La presente invención se refiere a un polipéptido que comprende la secuencia que consiste en:

- W-S-G-W-S-S-C-S-R-S-C-G- (SEC ID Nº8)

para uso en un método para inhibir o prevenir la apoptosis neuronal mediada por al menos un ligando de receptores de la muerte celular seleccionado de TRAIL y FasL.

La invención también se refiere al polipéptido como se define anteriormente para uso en un método para inhibir o prevenir la apoptosis que resulta de una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en trastornos neurodegenerativos, isquemia cerebral, traumatismos neuronales, enfermedades inflamatorias neuronales, y neurodegeneraciones víricas.

Descripción detallada de la invención Se ha demostrado que un péptido derivado de la TSR (unidades de tromboespondina tipo 1) de la SCO-espondina inhibe la apoptosis neuronal mediada por los ligandos de receptores de la muerte celular (TRAIL, FasL…) .

Se describe en la presente memoria el uso de un polipéptido que comprende o consiste en la siguiente secuencia - W-S-A1-C-S-A2-C-G- (SEC ID Nº1) en la que A1 y A2 son secuencias de aminoácidos que comprenden 1 a 5 aminoácidos, para la fabricación de un medicamento para inhibir o prevenir la apoptosis neuronal mediada por al menos un ligando de receptores de la muerte celular. También se describe en la presente memoria un polipéptido que comprende o consiste en la siguiente secuencia

- W-S-A1-C-S-A2-C-G- (SEC ID Nº1) en la que A1 y A2 son secuencias de aminoácidos que comprenden 1 a 5 aminoácidos, para inhibir o prevenir la apoptosis neuronal mediada por al menos un ligando de receptores de la muerte celular. Un primero objeto de la presente invención se refiere a un polipéptido que comprende la secuencia que consiste en -W-S-G-W-S-S-C-S-R-S-C-G- (SEC ID Nº8) , para uso en un método para inhibir o prevenir la apoptosis neuronal mediada por al menos un ligando de receptores de la muerte celular seleccionado de TRAIL y FasL.

Se debería recordar que, en la descripción como un todo, “aminoácido” se entiende que significa tanto los aminoácidos naturales como los aminoácidos no naturales. Se entiende que “aminoácido natural” significa los aminoácidos en la forma L que se puede encontrar en proteínas naturales, es decir, alanina (A) , arginina (R) , asparagina (N) , ácido aspártico (D) , cisteína (C) , glutamina (Q) , ácido glutámico (E) , glicina (G) , histidina (H) , isoleucina (I) , leucina (L) , lisina (K) , metionina (M) , fenilalanina (F) , prolina (P) , serina (S) , treonina (T) , triptófano (W) , tirosina (Y) y valina (V) . Sin embargo, la presente invención también se refiere a los aminoácidos no naturales, es decir, los aminoácidos anteriores en su forma D, así como las formas homo de algunos aminoácidos, tales como arginina, lisina, fenilalanina y serina, y las formas nor de leucina o valina.

El ligando de receptores de la muerte celular según la presente invención es FasL y/o TRAIL.

Ventajosamente, la apoptosis neuronal está asociada con una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en trastornos neurodegenerativos, isquemia cerebral, traumatismos neuronales, enfermedades inflamatorias neuronales, y neurodegeneraciones víricas.

La expresión “apoptosis neuronal asociada con una enfermedad” se refiere a la apoptosis neuronal que resulta de dicha enfermedad.

En una forma de realización particular, los trastornos neurodegenerativos incluyen,... [Seguir leyendo]

1. Polipéptido que comprende la secuencia que consiste en - W-S-G-W-S-S-C-S-R-S-C-G- (SEC ID Nº8) ,

para su utilización en un método para inhibir o prevenir la apoptosis neuronal mediada por al menos un ligando de receptores de la muerte celular seleccionado de TRAIL y FasL.

2. Polipéptido para su utilización según la reivindicación 1, en el que dicha apoptosis neuronal resulta de una enfermedad seleccionada de entre el grupo que consiste en trastornos neurodegenerativos, isquemia cerebral, traumatismos neuronales, enfermedades inflamatorias neuronales, y neurodegeneraciones víricas.

3. Polipéptido para su utilización según la reivindicación 2, en el que dichos trastornos neurodegenerativos se seleccionan de entre el grupo que consiste en esclerosis lateral amiotrófica (ALS) , atrofia muscular espinal (SMA) , enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de cuerpos de Lewy difusos, enfermedad priónica, parálisis supranuclear progresiva, atrofia sistémica múltiple, adrenoleucodistrofia, síndrome de down y demencia frontotemporal.

4. Constructo de ácido nucleico que codifica un polipéptido como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para su utilización en un método para inhibir o prevenir la apoptosis neuronal que resulta de una enfermedad seleccionada de entre el grupo que consiste en trastornos neurodegenerativos, isquemia cerebral, traumatismos neuronales, enfermedades inflamatorias neuronales, y neurodegeneraciones víricas.

5. Polipéptido que comprende la secuencia que consiste en

- W-S-G-W-S-S-C-S-R-S-C-G- (SEC ID Nº8) ,

para la utilización en un método para prevenir una enfermedad seleccionada de entre el grupo que consiste en trastornos neurodegenerativos, isquemia cerebral, traumatismos neuronales, enfermedades inflamatorias neuronales y neurodegeneraciones víricas.

6. Polipéptido para la utilización según la reivindicación 5, en el que dichos trastornos neurodegenerativos se seleccionan de entre el grupo que consiste en esclerosis lateral amiotrófica (ALS) , atrofia muscular espinal (SMA) , enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de cuerpos de Lewy difusos, enfermedad priónica, parálisis supranuclear progresiva, atrofia sistémica múltiple, adrenoleucodistrofia, síndrome de down y demencia frontotemporal.