Uso de agonistas de receptores de 1-fosfato de esfingosina (s1p) en combinación con un segundo agente para el tratamiento de enfermedades cerebrales degenerativas.

Una combinación farmacéutica que comprende a) un primer agente que es 2-amino-2-[2-(4-octilfenil)etil]propano-1,

3-diol en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable, o fosfato de FTY720 y b) un segundoagente, que se selecciona de un agonista de receptor de AMPA,

en la que el agonista de receptor de AMPA se selecciona de aminoalquilfosfonato de quinoxalindiona; 7-acetil-5-(4-aminofenil)-8,9-dihidro-8-metil-7H-1,3-dioxolo[4,5-h][2,3]benzodiazepin-8-carbonitrilo; 4-(7-cloro-2-metil-4H-3,10atriazabenzo[f]azulen-9-il)-fenilamina; N,N-dimetil-2-[2-(3-fenil-1,2,4-oxadiazol-5-il)fenoxi]etanamina; ácido 7-[4-[[[[(4-carboxifenil)-amino]carbonil]oxi]metil]-1H-imidazol-1-il]-3,4-dihidro-3-oxo-6-(trifluorometil)-2-quinoxalincarboxílico; salmonosódica de ácido 2-[[[5-[4-[(dimetilamino)-sulfonil]fenil]-1,2,6,7,8,9-hexahidro-8-metil-2-oxo-3H-pirrolo[3,2-10 h]isoquinolin-3-iliden]amino]oxi]-4-hidroxibutanoico; sulfamato de 2,3:4,5-bis-O-(1-metiletiliden)-beta-Dfructopiranosa;(R)-7-acetil-5-(4-aminofenil)-8,9-dihidro-8-metil-7H-1,3-dioxolo[4,5-h][2,3]benzodiazepina; 6-imidazol-1-il-7-nitro-1,4-dihidroquinoxalin-2,3-diona; ácido 7-cloro-6-sulfamoil-2-(1H)-quinolinon-3-fosfórico; ácido 7-imidazol-1-il-6-nitro-2,3-dioxo-3,4-dihidro-2H-quinoxalin-1-il)-acético; 4-(8-metil-9H-1,3-dioxa-6,7-diaza-ciclohepta[f]inden-5-il)-fenilamina; ácido 7-morfolin-4-il-2,3-dioxo-6-trifluorometil-3,4-dihidro-2H-quinoxalin-1-ilmetil)-fosfónico; 3-(2-cloro15fenil)-2-[2-(6-dietilaminometilpiridin-2-il)-vinil]-6-fluoro-3H-quinazolin-4-ona; propilamida de ácido 4-(4-aminofenil)-6-metoxi-1-metil-1H-ftalazin-2-carboxílico; propilamida de ácido 8-(4-aminofenil)-5-metil-5H-[1,3]dioxolo[4,5-g]ftalazin-6-carboxílico; ácido (4-oxo-2-fosfono-5,10-dihidro-4H-imidazo[1,2-a]indeno[1,2-e]pirazin-9-il)-acético; y ácido 6-[2-(1H-tetrazol-5-il)-etil]-decahidroisoquinolin-3-carboxílico.

Uso de agonistas de receptores de 1-fosfato de esfingosina (S1P) en combinación con un segundo agente para el tratamiento de enfermedades cerebrales degenerativas La presente invención se refiere a un nuevo uso para un agonista de receptores de 1-fosfato de esfingosina (S1P) , particularmente en el tratamiento de la demencia progresiva o enfermedades cerebrales degenerativas, según se define en las reivindicaciones.

Los agonistas de receptores de S1P son compuestos que se señalan como agonistas en uno o más receptores de 1fosfato de esfingosina, p. ej. S1P1 a S1P8. La unión de un agonista a un receptor de S1P puede dar como resultado,

p. ej., la disociación de proteínas G heterotrímeras intracelulares en Ga-GTP y Gºy-GTP, y/o una fosforilación incrementada del receptor ocupado por agonista y una activación de rutas de señalización/quinasas aguas abajo, o internalización/desensibilización de los receptores como resultado de superagonismo y por consiguiente un antagonismo de la señalización del receptor por el ligando natural S1P.

La afinidad de unión de agonistas de receptores de S1P a receptores de S1P humanos individuales puede determinarse en el siguiente ensayo:

Las actividades agonistas para receptores de S1P de los compuestos se ensayan sobre los receptores de S1P humanos S1P1, S1P3, S1P2, S1P4 y S1P5. La activación del receptor funcional se determina cuantificando la unión de GTP [y-35S] inducida por compuesto a proteína de membrana preparada a partir de células CHO o RH7777 transfectadas que expresan establemente el receptor de S1P humano apropiado. La tecnología de ensayo usada es SPA (ensayo de centelleo basado en la proximidad, por sus siglas en inglés) . Brevemente, compuestos disueltos en DMSO se diluyen en serie y se añaden a una cuenta de SPA (Amersham-Pharmacia) inmobilizada en proteína de membrana que expresa receptor de S1P (10-20 !g/pocillo) en presencia de Hepes 50 mM, NaCl 100 mM, MgCl2 10 mM, GDP 10 !M, 0, 1% de BSA libre de grasa y GTP[y-35S] 0, 2 nM (1200 Ci/mmol) . Después de la incubación en placas de microvaloración de 96 pocillos a TA durante 120 min, el GTP [y-35S] no unido se separa mediante una etapa de centrifugación. La luminiscencia de cuentas de SPA activadas por GTP [y-35S] unido a la membrana se cuantifica con un lector de placas TOPcount (Packard) . Las EC50 se calculan usando un software de ajuste de curvas estándar. En este ensayo, los agonistas de receptores de S1P tienen preferiblemente una afinidad de unión al receptor de S1P < 50 nM.

La internalización y la desensibilización de receptores de S1P se determina usando, p. ej., células de ovario de hámster chino (CHO, por sus siglas en inglés) transfectadas con un receptor de S1P humano etiquetado con myc. La internalización del receptor como resultado de la estimulación por agonistas se determina mediante análisis de FACS usando anticuerpos anti-myc marcados fluorescentemente.

Agonistas de receptores de S1P preferidos son, p. ej., compuestos que, además de sus propiedades de unión a S1P, también tienen propiedades de guiado (“homing”) acelerado de linfocitos, p. ej. compuestos que provocan una linfopenia resultante de una redistribución, preferiblemente reversible, de linfocitos desde la circulación hasta tejido linfático secundario, sin generar una inmunosupresión generalizada. Las células simples son secuestradas; las células T y las células B CD4 y CD8 de la sangre son estimuladas para migrar a los nódulos linfáticos (LN, por sus siglas en inglés) y los parches de Peyer (PP) .

La propiedad de guiado de linfocitos puede medirse en el siguiente ensayo de agotamiento de linfocitos sanguíneos:

Un agonista de receptor de S1P o el vehículo se administra oralmente mediante sonda a ratas. Se obtiene sangre de la cola para el control hematológico el día -1 para dar los valores individuales de la línea de base, y a las 2, 6, 24, 48 y 72 horas después de la aplicación. En este ensayo, el agonista de receptor de S1P agota los linfocitos de sangre periférica, p. ej. en 50%, cuyo se administra en una dosis de, p. ej. < 20 mg/kg. Agonistas de receptores de S1P preferidos son compuestos adicionales que además de sus propiedades de unión a S1P internalizan/desensibilizan los receptores de S1P, antagonizando se ese modo procesos inflamatorios conducidos por lisofosfolípidos, incluyendo, p. ej. 1-fosfato de esfingosina (S1P) , esfingofosforilcolina (SPC) , ácido lisofosfatídico (LPA) y otros, sobre células de la vasculatura, p. ej. células endoteliales. La capacidad de internalización/desensibilización de los compuestos se determinará usando células CHO transfectadas con receptor de S1P etiquetado con myc humano.

Ejemplos de agonistas de receptores de S1P apropiados son, por ejemplo:

-Compuestos como los divulgados en EP627406A1, p. ej. un compuesto de fórmula I en la que R1 es una cadena de carbonos (C12-22) lineal o ramificada

- que pueden tener en la cadena un enlace o un heteroátomo, seleccionados de un doble enlace, un triple enlace, O, S, NR6, en donde R6 es H, alquilo, aralquilo, acilo o alcoxicarbonilo, y carbonilo, y/o

- que pueden tener como un sustituyente alcoxi, alqueniloxi, alquiniloxi, aralquiloxi, acilo, alquilamino, alquiltio, acilamino, alcoxicarbonilo, alcoxicarbonilamino, aciloxi, alquilcarbamoílo, nitro, halógeno, amino, hidroxiimino, hidroxi o carboxi; o

R1 es

- un fenilalquilo en el que el alquilo es una cadena de carbonos (C6-20) lineal o ramificada; o

- un fenilalquilo en el que el alquilo es una cadena de carbonos (C1-30) lineal o ramificada, en donde dicho fenilalquilo está sustituido con

- una cadena de carbonos (C6-20) lineal o ramificada opcionalmente sustituida con halógeno,

- una cadena de alcoxi (C6-20) lineal o ramificada opcionalmente sustituida con halógeno,

- un alqueniloxi (C6-20) lineal o ramificado,

- fenilalcoxi, halofenilalcoxi, fenilalcoxialquilo, fenoxialcoxi o fenoxialquilo,

- cicloalquilalquilo sustituido con alquilo C6-20,

- heteroarilalquilo sustituido con alquilo C6-20,

- alquilo heterocíclico C6-20 o

- alquilo heterocíclico sustituido con alquilo C2-20, y en donde el resto alquilo puede tener

- en la cadena de carbonos, un enlace o un heteroátomo seleccionados de un doble enlace, un triple enlace, O, S, sulfinilo, sulfonilo o NR6, en donde R6 es como se definió anteriormente, y

- como un sustituyente, alcoxi, alqueniloxi, alquiniloxi, aralquiloxi, acilo, alquilamino, alquiltio, acilamino, alcoxicarbonilo, alcoxicarbonilamino, aciloxi, alquilcarbamoílo, nitro, halógeno, amino, hidroxi o carboxi, y

cada uno de R2, R3, R4 y R5, independientemente, es H, alquilo C1-4 o acilo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

- Compuestos como los divulgados en REP 1002792A1, p. ej. un compuesto de fórmula II en la que m es de 1 a 9 y cada uno de R’2, R’3, R’4 y R’5, independientemente, es H, alquilo o acilo, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

-Compuestos como los divulgados en EP077S283 A1, p. ej. un compuesto de fórmula III

en la que W es H; alquilo C1-6, alquenilo C2-6 o alquinilo C2-6; no sustituido o sustituido con fenilo sustituido con OH; R"4O (CH2) n; o alquilo C1-6 sustituido con de 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halógeno, cicloalquilo C3-8, fenilo y fenilo sustituido con OH;

X es H o alquilo de cadena lineal no sustituido o sustituido que tiene un número p de átomos de carbono o alcoxi de cadena lineal no sustituido o sustituido que tiene un número (p-1) de átomos de carbono, p. ej. sustituido con de 1 a 10 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en alquilo C1-6, OH, alcoxi C1-6, aciloxi, amino, alquil (C1-6) amino, acilamino, oxo, halo-alquilo (C1-6) , halógeno, fenol no sustituido y fenilo sustituido con de 1 a 3 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en alquilo C1-6, OH, alcoxi C1-6, acilo, aciloxi, amino, alquil (C1-6) -amino, acilamino, halo-alquilo (C1-6) y halógeno; Y es H, alquilo C1-6, OH, alcoxi C1-6, acilo, aciloxi, amino, alquil (C1-6) -amino, acilamino, halo-alquilo (C1-6) o halógeno, Z2 es un enlace sencillo o un alquileno de cadena lineal que tiene un número de átomos de carbono de q,

cada uno de p y q, independientemente, es un número entero de 1 a 20, con la condición de que 6:p+q:23, m es 1, 2 o 3, n es 2 o 3,

cada uno de R"1, R"2, R"3 y R"4, independientemente, es H, alquilo C1-4 o acilo,

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

- Compuestos como los divulgados en WO02/18395, p. ej. un compuesto de fórmula IVa o IVb

en las que Xa es O, S, NR1s o un grupo... [Seguir leyendo]

1. Una combinación farmacéutica que comprende a) un primer agente que es 2-amino-2-[2- (4-octilfenil) etil]propano1, 3-diol en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable, o fosfato de FTY720 y b) un segundo agente, que se selecciona de un agonista de receptor de AMPA,

en la que el agonista de receptor de AMPA se selecciona de aminoalquilfosfonato de quinoxalindiona; 7-acetil-5- (4aminofenil) -8, 9-dihidro-8-metil-7H-1, 3-dioxolo[4, 5-h][2, 3]benzodiazepin-8-carbonitrilo; 4- (7-cloro-2-metil-4H-3, 10, 10atriazabenzo[f]azulen-9-il) -fenilamina; N, N-dimetil-2-[2- (3-fenil-1, 2, 4-oxadiazol-5-il) fenoxi]etanamina; ácido 7-[4-[[[[ (4carboxifenil) -amino]carbonil]oxi]metil]-1H-imidazol-1-il]-3, 4-dihidro-3-oxo-6- (trifluorometil) -2-quinoxalincarboxílico; sal monosódica de ácido 2-[[[5-[4-