Un método para obtener datos útiles en la identificación de un paciente con riesgo de tener dificultad de llevar a término un embarazo.

Factor estimulante de las colonias de granulocitos (G-CSF) para usar en un método para tratar una mujer conriesgo de fracaso de la implantación durante la reproducción asistida y/o aborto espontáneo,

comprendiendo dichométodo:

determinar, en una muestra de dicha paciente, al menos uno de los parámetros seleccionados del grupo queconsiste en el número de células Th1, número de células Th2, actividad de células Th1, actividad de células Th2, lacantidad de un producto de células Th1, y la cantidad de un producto de células Th2;

identificar si dicha muestra satisface uno o más de los criterios seleccionados del grupo que consiste en número decélulas Th1 elevado, actividad de células Th1 elevada, cantidad elevada de un producto de células Th1, número decélulas Th2 disminuido, actividad de células Th2 disminuida, cantidad disminuida de un producto de células Th2, unamayor razón de número de células Th1 a número de células Th2, y mayor actividad de células Th1 a actividad decélulas Th2; y

si la muestra satisface uno o más de estos criterios, se administra G-CSF a una dosis de 1 a 20 mcg(microgramos)/kg/día a dicha paciente.

Un método para obtener datos útiles en la identificación de un paciente con riesgo de tener dificultad de llevar a término un embarazo

Campo de la invención La invención se refiere a métodos para reducir el riesgo de aborto espontáneo o fracaso de la implantación durante la reproducción asistida.

Antecedentes de la invención La concepción, el embarazo y el parto requieren una interacción complicada y delicada de la fisiología y la anatomía. La implantación y placentación del embrión son procesos complejos que implican cambios hormonales y anatómicos en la madre y la migración y división celular del embrión.

El aborto espontáneo tiene lugar en el 15 % de los embarazos diagnosticados en mujeres entre quince y cuarenta y cinco años de edad. Los abortos espontáneos recurrentes se definen como la pérdida de tres o más embarazos consecutivos y tienen lugar en aproximadamente 3-4 % de estas mujeres. El riesgo de pérdida del embarazo aumenta desde el 15-20 % en el primer embarazo hasta el 40 % después de un aborto espontáneo.

Aunque la mayor parte de los embarazos que se pierden en el primer trimestre son debidos a causas fetales; el aborto espontáneo, la pérdida del producto de la concepción antes de la semana 20 de embarazo, es un trastorno de etiología desconocida. Se ha teorizado sobre que los abortos espontáneos son el rechazo natural de un feto con anormalidades incompatibles con la vida, sin embargo, esta teoría aún no ha sido confirmada.

Los factores de riesgo de aborto incluyen la edad, el peso y el estado de salud de la mujer. La prevalencia de aborto espontáneo aumenta con el aumento de la edad materna, aunque no con la gestación. El riesgo empieza a aumentar rápidamente a la edad de 35 años. El riesgo de aborto espontáneo a la edad de 40 años es aproximadamente el doble que a la edad de 20. Como las familias se planifican cada vez más tarde en la vida, la frecuencia de aborto espontáneo solamente aumentará sin métodos de prevención eficaces.

Acompañando el aumento de la edad de los padres aspirantes va el uso creciente de técnicas de reproducción asistida tales como la fertilización in vitro, transferencia de gametos a las trompas de Falopio (GIFT) , y similares. Estas técnicas tienen sus propios riesgos asociados, especialmente para la mujer durante la hiperestimulación ovárica. Además, la reproducción asistida y la fertilización in vitro son caras, requieren mucho tiempo y tienen una alta tasa de fallos, produciéndose el embarazo solamente en aproximadamente el 25 % de los casos. (véase Merck Manual 17th edition, 1999, Merck Research Laboratories, Whitehouse Station, New Jersey, p. 1995) .

La amenaza de aborto generalmente se presenta como un dolor cólico y hemorragia cuyo tratamiento es el reposo en cama. Este tratamiento conservador proporciona cuidados paliativos para la madre pero modifica muy poco el pronóstico. El uso de hormonas generalmente está contraindicado debido al riesgo de anomalías congénitas, incluyendo la malformación de los vasos cardíacos del embrión y posibles anomalías genitales en la descendencia femenina.

La preeclampsia y otros trastornos hipertensivos de la gestación son una causa general de enfermedad y mortalidad maternal y de los recién nacidos. Los síntomas de preeclampsia incluyen hipertensión, edema y proteinuria con ganancia súbita de peso, cefaleas y visión borrosa. La preeclampsia puede impedir que llegue suficiente flujo sanguíneo a la placenta lo que puede causar un bajo peso de nacimiento y otros problemas para la criatura. Aunque la mayor parte de las mujeres con preeclampsia todavía tienen bebés sanos, algunas desarrollan eclampsia, una condición grave que amenaza la vida de la madre y del feto.

El riesgo de preeclampsia es más alto en las mujeres con embarazos múltiples, en las madres adolescentes y en las mujeres mayores de 40 años. Típicamente, la preeclampsia tiene lugar al final del segundo o tercer trimestre (mitad a final de la gestación) aunque ocasionalmente aparece más pronto. La preeclampsia afecta aproximadamente al 5 % de todos los embarazos.

La preeclampsia leve se trata de forma conservadora con estricto reposo en cama con revisiones continuas de la tensión arterial. El progreso del trastorno se trata con fluidos, antihipertensivos y sulfato de magnesio pero el único remedio es el parto del feto.

En adición a la carga física de estos trastornos, la pérdida de un embarazo deseado supone una tremenda carga emocional para los padres aspirantes y expectantes. La pérdida de un embarazo puede llevar a sentimientos de incompetencia, desesperanza y culpabilidad que pueden tener un efecto devastador sobre los individuos y sobre una pareja.

Se necesitan siempre nuevos métodos y composiciones para reducir los riesgos para la salud de la madre y del feto asociados con el embarazo. La prevención eficaz del aborto espontáneo puede permitir a las mujeres, especialmente a las mujeres en riesgo, tener embarazos con éxito, y el tratamiento o prevención eficaces de la preeclampsia puede reducir o eliminar uno de los riesgos para la salud más comunes del embarazo. La prevención del fracaso de la implantación durante la reproducción asistida, puede llevar a embarazos logrados, reducir los riesgos para la mujer y ahorrar tiempo y dinero. La prevención del parto prematuro aumentará la probabilidad de nacimientos normales.

Sumario de la invención Para reducir la frecuencia del aborto espontáneo recurrente y del fracaso de la implantación durante la reproducción asistida, la presente invención se refiere a composiciones y kits que comprenden un factor estimulante de las colonias de granulocitos (GCSF o G-CSF) en una cantidad eficaz para prevenir el aborto espontáneo o el fracaso de la implantación de un embrión transferido. La presente invención se basa, en parte, en el descubrimiento de que el GCSF puede reducir o eliminar las aberraciones mediadas por el sistema inmunitario que se asocian con el aborto espontáneo o con el fracaso de la implantación. Basándose en este descubrimiento, se describen aquí métodos para utilizar las células madres de la sangre periférica movilizadas por GCSF para prevenir el aborto espontáneo o el fracaso de la implantación, y la presente invención también proporciona métodos que utilizan el GCSF para tratar o prevenir la preeclampsia o el parto prematuro.

En un aspecto, la presente invención proporciona G-CSF para usar en un método para tratar una mujer con riesgo de fracaso de la implantación durante la reproducción asistida y/o aborto espontáneo según la reivindicación 1.

El G-CSF se puede administrar a cualquier sujeto femenino en riesgo de aborto espontáneo. Los sujetos en riesgo se pueden identificar según los métodos descritos aquí o según métodos conocidos por los especialistas en la técnica. Típicamente el sujeto está en el primer o segundo trimestre de embarazo. En ciertas realizaciones, el sujeto está en las primeras 20 semanas de embarazo. En ciertas realizaciones, el sujeto está en el primer o segundo mes de embarazo.

Para prevenir o reducir el riesgo de aborto espontáneo, se puede administrar a la paciente una cantidad profilácticamente eficaz de GCSF. El GCSF se puede administrar por cualquier modo de administración conocido por los expertos en la técnica. En ciertas realizaciones, el GCSF se administra subcutáneamente. La dosis de GCSF puede ser determinada por un facultativo experto en la técnica como se describe en detalle más adelante. Se puede continuar la dosis tanto como sea necesario para prevenir el aborto espontáneo según el criterio del facultativo experto en la técnica. Se puede administrar la dosis durante todo el primer trimestre de embarazo. Se puede administrar la dosis durante cuatro, tres, dos o una semanas. Se puede administrar la dosis durante cinco, cuatro, tres, dos o un día.

Se describe aquí un método para prevenir el aborto espontáneo administrando a una paciente células madre de sangre periférica movilizadas. En este método, se administra el GCSF a una primera paciente. Preferiblemente, la paciente no está embarazada. Se puede administrar el GCSF opcionalmente junto con terapia quimioterapéutica o inmunodepresora. Después de la administración de GCSF, se recogen los granulocitos de la paciente. Estos granulocitos se conservan opcionalmente, típicamente por crioconservación, para administración posterior. Preferiblemente, los granulocitos comprenden células madre de sangre periférica, y en particular, células madre CD34+ de sangre periférica.

Las células madre, que pueden ser histocompatibles, se pueden administrar a una paciente embarazada. La administración puede ser autóloga, esto es, la paciente... [Seguir leyendo]

1. Factor estimulante de las colonias de granulocitos (G-CSF) para usar en un método para tratar una mujer con riesgo de fracaso de la implantación durante la reproducción asistida y/o aborto espontáneo, comprendiendo dicho método:

determinar, en una muestra de dicha paciente, al menos uno de los parámetros seleccionados del grupo que consiste en el número de células Th1, número de células Th2, actividad de células Th1, actividad de células Th2, la cantidad de un producto de células Th1, y la cantidad de un producto de células Th2;

identificar si dicha muestra satisface uno o más de los criterios seleccionados del grupo que consiste en número de células Th1 elevado, actividad de células Th1 elevada, cantidad elevada de un producto de células Th1, número de células Th2 disminuido, actividad de células Th2 disminuida, cantidad disminuida de un producto de células Th2, una mayor razón de número de células Th1 a número de células Th2, y mayor actividad de células Th1 a actividad de células Th2; y

si la muestra satisface uno o más de estos criterios, se administra G-CSF a una dosis de 1 a 20 mcg (microgramos) /kg/día a dicha paciente.

2. G-CSF para usar según la reivindicación 1, donde el G-CSF se administra a dicha paciente durante uno, dos, tres, cuatro o cinco días.

3. G-CSF para usar según la reivindicación 1, donde el producto de células Th1 es interferón y.

4. G-CSF para usar según la reivindicación 1, donde el producto de células Th2 es interleucina (IL) -10.

5. G-CSF para usar según la reivindicación 1, donde el producto de células Th1 es el factor de necrosis tumoral 1.

6. G-CSF para usar según la reivindicación 1, donde el producto de células Th1 es IL-2.

7. G-CSF para usar según la reivindicación 1, donde el producto de células Th2 se selecciona del grupo que consiste en IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13 y sus combinaciones.

8. G-CSF para usar según la reivindicación 1, donde el producto de células Th2 es IL-4, IL-10 o sus combinaciones.

9. G-CSF para usar según la reivindicación 8, donde el producto de células Th2 es IL-4.

10. G-CSF para usar según la reivindicación 1, donde dicha muestra es una muestra de sangre.

11. Un kit que comprende G-CSF y una etiqueta o etiquetado con instrucciones donde el kit es para usar en la reducción del riesgo de fracaso de la implantación durante la reproducción asistida y/o aborto espontáneo en una mujer, donde se administra G-CSF a dicha paciente a una dosis de 1 a 20 mcg (microgramos) /kg/día.

12. Un método para determinar la idoneidad de una mujer para el tratamiento con G-CSF para reducir el riesgo de fracaso de la implantación durante la reproducción asistida y/o aborto espontáneo, comprendiendo dicho método:

determinar, en una muestra de dicha paciente, al menos uno de los parámetros seleccionados del grupo que consiste en el número de células Th1, número de células Th2, actividad de células Th1, actividad de células Th2, la cantidad de un producto de células Th1, y la cantidad de un producto de células Th2; e identificar si dicha muestra satisface uno o más de los criterios seleccionados del grupo que consiste en número de células Th1 elevado, actividad de células Th1 elevada, cantidad elevada de un producto de células Th1, número de células Th2 disminuido, actividad de células Th2 disminuida, cantidad disminuida de un producto de células Th2, una mayor razón de número de células Th1 a número de células Th2, y mayor actividad de células Th1 a actividad de células Th2;

donde si dicha muestra satisface uno o más de estos criterios, dicha paciente es adecuada para tratamiento con G-CSF a una dosis de 1 a 20 mcg (microgramos) /kg/día.

13. G-CSF para usar según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores 1-10, el kit de la reivindicación 11 o el método de la reivindicación 12, donde dicha paciente ha tenido uno o dos abortos espontáneos previos.

14. G-CSF para usar según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, el kit de la reivindicación 11 o el método de la reivindicación 12, donde dicha paciente ha tenido más de dos abortos espontáneos previos.

15. G-CSF para usar según una cualquiera de las reivindicaciones 1-10, el kit según la reivindicación 11 o el método de la reivindicación 12, donde dicha paciente ha tenido fallo previamente en la reproducción asistida.

16. G-CSF para usar según la reivindicación 15, el kit de la reivindicación 15 o el método de la reivindicación 15, donde dicha paciente ha tenido al menos uno o más fallos en procedimientos de fertilización in vitro.

17. G-CSF para usar según una cualquiera de las reivindicaciones 1-10 y 13-16, el kit de la reivindicación 11 o 1316, o el método de una cualquiera de las reivindicaciones 12-16, donde el aborto espontáneo es interrupción del embarazo, amenaza de aborto espontáneo, aborto espontáneo inevitable o aborto espontáneo incompleto.