CONJUGADO POLIMERICO PARA EL TRATAMIENTO DE INFECCIONES BACTERIANAS.

Conjugado polimérico para el tratamiento de infecciones bacterianas. Campo de la invención La presente invención se encuadra en general dentro del campo de la química médica y en particular se encuadra dentro del campo de los polímeros terapéuticos. Antecedentes de la invención Las endotoxinas o lipopolisacáridos (LPS) son constituyentes de la membrana externa de bacterias Gram negativas. Cuando se liberan como resultado de la división celular o el tratamiento con antibióticos, los LPS son reconocidos como patrones moleculares asociados a patógenos (PAMP) por receptores tipo toll (TLR; siendo el TLR4 específico para LPS) (Poltorak, A. et al. Science 282, 2085-2088 (1998). Poltorak, A., Ricciardi-Castagnoli, P., Citterio, S. & Beutler, B. Proc Natl Acad Sci U S A 97, 2163-2167. (2000)). Estos receptores retransmiten la señal de los LPS a los núcleos de células inmunes innatas, dando como resultado su activación y la secreción subsiguiente de citoquinas proinflamatorias. La presencia continua de LPS en la corriente sanguínea de los mamíferos induce la desregulación de citoquinas, dando lugar al choque séptico (Heine, H., Rietschel, E.T. & Ulmer, A.J. Mol Biotechnol 19, 279-296. (2001)), la causa principal de mortalidad en pacientes sépticos. La sepsis es la décima causa principal de muerte en general, así como la causa más importante de muerte en las unidades de cuidados intensivos (Minino, A.M., Heron, M.P., Murphy, S.L. & Kochanek, K.D. Natl Vital Stat Rep 55, 1-119 (2007)). A pesar de la incidencia de la sepsis, solo se ha aprobado como tratamiento un agente, la drotrecogina alfa (Xigris ® ), (Vincent, J.L. Expert Opin Biol Ther. 7, 1763-1777. (2007)). Recientemente, las investigaciones en este campo se han centrado en terapias extracorpóreas contra endotoxinas dirigidas a reducir los niveles en circulación de LPS (Burns, M.R. et al. J Med Chem 50, 877-888 (2007); Cruz, D.N. et al. Crit Care 11, R47 (2007); Nguyen, T.B. et al. Bioorg Med Chem 15, 5694-5709 (2007) y Sil, D. et al. Antimicrob Agents Chemother 51, 2811 -2819 (2007)). La polimixina B, es un péptido que neutraliza LPS pero es demasiado tóxico para el uso sistémico, se ha desarrollado como un dispositivo médico de purificación de sangre basado en diálisis en el que se inmoviliza en fibras de poliestireno (PMX-F); este dispositivo ha sido utilizado desde 1994 por el programa de seguro sanitario nacional japonés (Shoji, H. Ther Apher Dial 7, 108-114 (2003)). En investigaciones previas, los autores identificaron una molécula pequeña neutralizante de LPS, el peptoide 7 (PTD7) (Mora, P. et al. J Med Chem 48, 1265-1268. (2005)) (Fig. 1). Sin embargo, el PTD7 tiene una escasa solubilidad en agua y una toxicidad no específica, de tal forma que su uso como terapia queda limitado. Existe pues una necesidad apremiante de desarrollar medicamentos efectivos contra las endotoxinas útiles en el tratamiento y prevención de las infecciones bacterianas y contra la sépsis. Descripción de la invención La presente invención se refiere a un conjugado polimérico amfifílico que neutraliza y promueve la eliminación sistémica de endotoxinas, siendo útil en el tratamiento de infecciones bacterianas y evitando la sépsis. Así pues, en un primer aspecto, la presente invención se refiere a conjugado polimérico amfifílico que comprende la fórmula general I: donde: PTD7-(L1)n-(L2)m-(PEG)-(L2)m-(L1)n-PTD7 L1 es una secuencia peptídica de entre uno a cinco aminoácidos cuyos aminoácidos son iguales o diferentes y son seleccionados de entre el grupo formado por Gly, Val, Leu, Ile, Phe, Arg, Lys, Asp, Glu, preferentemente es Gly n = 1-5 L2 es ácido láctico m = 0-1 2 PTD7 comprende la siguiente fórmula general II ES 2 350 430 A1 En un aspecto más en particular, el conjugado polimérico de la presente invención comprende la fórmula general III, donde L1 es Gly, n = 2, L2 es ácido láctico, m = 0. En otro aspecto en particular, el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general IV, donde L1 es Gly, n = 2, L2 es ácido láctico y m =1. En otro aspecto particular la presente invención se refiere al conjugado polimérico amfifílico de la presente invención para su uso como medicamento. En un aspecto más en particular el medicamento comprende el conjugado polimérico descrito en la fórmula general I, en un aspecto más en particular, el medicamento comprende el conjugado polimérico descrito en la fórmula general III. En otro aspecto en particular, el medicamento comprende el conjugado polimérico descrito en la fórmula general IV. 3 ES 2 350 430 A1 En otro aspecto en particular, la presente invención se refiere al conjugado polimérico amfifílico de la presente invención para uso en diálisis intracorpórea. En un aspecto más en particular el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general I. En otro aspecto más en particular el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general III. En otro aspecto más en particular, el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general IV. En la presente invención se entiende por diálisis intracorpórea la eliminación del torrente sanguíneo de contaminantes o toxinas que puedan desencadenar cuadros de enfermedad tales como infecciones graves e incluso inducir shock séptico. Los nanoconjugados descritos actúan como scavengers. Esto es posible debido a la farmacocinética asociada a los conjugados polímero-fármaco como los conjugados de PEG descritos en la presenta invención. Estos nanoconjugados son administrados de forma intravenosa, distribuidos por el torrente sangíneo y eliminados de forma renal (Duncan, R. Nat. Rev. Cáncer 6, 688-701 (2006); Webster, R. et al Drug Metabol. Disp. 35, 9-16 (2007)) una vez han ejercido su actividad, en este caso la interacción con la endotoxina LPS. En un aspecto más en particular la presente invención se refiere al conjugado polimérico amfifílico de la presente invención para el tratamiento de infecciones bacterianas, en otro aspecto más en particular la presente invención se refiere al conjugado polimérico de la presente invención para el tratamiento de las infecciones bacterianas producidas por endotoxinas de bacterias Gram negativas, en particular se refiere a las infecciones producidas por endotoxinas bacterianas de naturaleza lipídica, más en particular a infecciones producidas por LPS. En un aspecto más en particular el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general I. En otro aspecto más en particular el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general III. En otro aspecto más en particular, el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general IV. En otro aspecto más en particular, la presente invención se refiere al conjugado polimérico amfifílico de la presente invención para el tratamiento de la sepsis bacteriana. En otro aspecto más en particular el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general I. En otro aspecto más en particular, el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general III. En otro aspecto más en particular, el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general IV. En la presente invención se entiende por sepsis al síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (SRIS) provocado por una infección causada por la presencia de microorganismos en sangre o por la presencia de sus toxinas. En un segundo aspecto, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención. En otro aspecto más en particular el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general I. En otro aspecto más en particular, el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general III. En otro aspecto más en particular, el conjugado polimérico amfifílico de la presente invención comprende la fórmula general IV. En un tercer aspecto, la presente invención se refiere a un procedimiento para la síntesis de un conjugado polimérico amfifílico de la presente invención, que comprende las siguientes reacciones: a) Incorporar mediante síntesis en fase sólida de al menos dos aminoácidos al PTD7 unido a una resina para dar lugar al compuesto PTD7-(L1)n, donde los aminoácidos (L1) son iguales o diferentes y son seleccionados de entre el grupo formado por Gly, Val, Leu, Ile, Phe, Arg, Asp, Glu. b) Eliminar la resina unida al compuesto obtenido en el paso anterior. c) Conjugación del compuesto obtenido en b) con PEG funcionalizado con -COOH. En otro aspecto en particular,...

1. Conjugado polimérico amfifílico que comprende la fórmula general I: PTD7-(L1)n-(L2)m-(PEG)-(L2)m-(L1)n-PTD7 L1 es una secuencia peptídica de 1 a 5 aminoácidos donde dichos aminoácidos son seleccionados de entre Gly, Val, Leu, Ile, Phe, Arg, Lys, Asp, Glu. n = 1-5 L2 es ácido láctico m = 0-1 PTD7 comprende la siguiente fórmula general II 2. Conjugado polimérico amfifílico según la reivindicación 1, caracterizado porque L1 es Gly n = 2 L2 es ácido láctico m = 0 3. Conjugado polimérico amfifílico según la reivindicación 1, donde el conjugado polimérico comprende la fórmula general IV. L1 es Gly n = 2 L2 es ácido láctico m = 1 4. Conjugado polimétrico amfifílico según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para su uso como medicamento. 5. Conjugado polimérico amfifílico según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para uso en diálisis intracorpórea. 6. Conjugado polimérico amfifílico según cualquiera de la reivindicaciones 1-3 para el tratamiento de infecciones bacterianas. 7. Conjugado polimérico amfifílico según la reivindicación 6 donde la infección bacteriana es producida por endotoxinas de bacterias Gram negativas. 9 ES 2 350 430 A1 8. Conjugado polimérico amfifílico según la reivindicación 7 donde las endotoxinas bacterianas son de naturaleza lipídica. 9. Conjugado polimérico amfifílico según la reivindicación 8 donde la endotoxina bacteriana es LPS. 10. Conjugado polimérico amfifílico según cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para el tratamiento de la sepsis bacteriana. 11. Composición farmacéutica que comprende un conjugado polimérico amfifílico según cualquiera de las reivindicaciones 1-3. 12. Procedimiento para la síntesis de un conjugado polimérico amfifílico según la reivindicación 1 que comprende las siguientes reacciones: a) Incorporar mediante síntesis en fase sólida de al menos 1 aminoácido al PTD7 unido a una resina para dar lugar al compuesto PTD7-(L1)n, donde L1 es una secuencia peptídica de 1 a 5 aminoácidos donde dichos aminoácidos son seleccionados de entre Gly, Val, Leu, Ile, Phe, Arg, Asp, Glu b) Eliminar la resina unida al compuesto obtenido en el paso anterior c) Conjugación del compuesto obtenido en b) con PEG funcionalizado con -COOH 13. Procedimiento según la reivindicación 12 donde entre la etapa a) y la etapa b) comprende la incorporación de un ácido láctico al compuesto PTD7-2G para dar lugar al compuesto PTD7-2GLact. ES 2 350 430 A1 11 ES 2 350 430 A1 12 ES 2 350 430 A1 13 ES 2 350 430 A1 14 ES 2 350 430 A1 ES 2 350 430 A1 16 ES 2 350 430 A1 17 ES 2 350 430 A1 18 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA