p38 alfa como diana terapéutica en carcinoma de vejiga.

Un inhibidor de p38α para uso en el tratamiento de un tumor o carcinoma de vejiga.

p38 alfa como diana terapeutica en carcinoma de vejigaº

Campo de la invención.º

5 La presente invencion se refiere al campo de la medicina, en particular a composiciones y metodos para el tratamiento de carcinoma o tumor de vejiga especialmente relacionado con la mutacion del FGFR3.

Antecedentes de la invención.

El receptor 3 del factor de crecimiento de fibroblastos (abreviadamente FGFR3 por la expresion inglesa fibroblast growth factor receptor 3) pertenece a una familia de receptores de tirosina quinasa relacionados estructuralmente (FGFR1-4) implicados en muchos aspectos de la embriogenesis y la homeostasis de tejidos. Estos receptores regulan diversos procesos biologicos, incluyendo la proliferacion, la diferenciacion, la migracion y la apoptosis. Tambien estan implicados en estados patologicos y muchos estudios han subrayado su importancia en enfermedades geneticas del desarrollo y tumores benignos o malignos. Los FGFR tienen un dominio extracelular de union al ligando compuesto de dos o tres dominios similares a inmunoglobulinas, una region transmembrana y un dominio citoplas

mico con actividad tirosina quinasa. El ligando que se une al dominio extracelular conduce a la dimerizacion del FGFR, induciendo la activacion del receptor por transfosforilacion de las tirosinas intracelulares. El dominio intracelular interacciona luego con varias proteinas de senalizacion intracelular que fosforila. Los cortes y empalmes alternativos de mRNA afectan a diferentes regiones de los FGFR. La segunda parte del dominio yuxtamembrana similar a Ig de FGFR1-3 esta codificada por dos exones mutuamente excluyentes que dan como resultado dos isoformas diferentes, b y c, que tienen diferente especificidad de ligando y distribucion en tejidos. El FGFR3b se expresa principalmente en celulas epiteliales, mientras que el FGFR3c se encuentra predominantemente en celulas procedentes del mesenquima, incluyendo los condrocitos.

Las mutaciones puntuales especificas de la linea germinal en el FGFR3 estan asociadas con diversos trastornos oseos humanos autosomicos dominantes. Todas estas mutaciones generan receptores auto-activados por diversos mecanismos, dependiendo de la posicion y naturaleza de la sustitucion de nucleotidos.

Las mismas mutaciones activadoras del FGFR3 se han identificado en tumores benignos y malignos (WO 00/68424) . Los tumores benignos incluyen tumores de la piel (queratosis seborreicas y nevos epidermicos) (WO 2006/053788) y de la vejiga (papiloma de vejiga) . Los tumores malignos incluyen cancer hematologico, mieloma multiple y carcinomas de vejiga y de cuello uterino. La frecuencia de mutaciones del FGFR3 es baja en mielomas multiples y carcinomas de cuello uterino (menos de 2% de los tumores presentan estas mutaciones) , pero mucho mas alta en carcinomas de vejiga (alrededor de 50%) . Se han demostrado claramente las propiedades transformadoras del FGFR3c mutado, la principal isoforma del FGFR3 expresada en el mieloma multiple. A pesar del hecho de que la isoforma mutada del FGFR3b se encuentra principalmente en tumores benignos o en tumores de bajo potencial maligno, los inventores demostraron recientemente con claridad las propiedades oncogenicas del FGFR3b mu

tado en celulas NIH-3T3 y en una linea de celulas de carcinoma de vejiga. En efecto, el FGFR3b-S249C, la forma mutada mas comun de FGFR3 en tumores de vejiga, fue capaz de transformar celulas NIH-3T3, induciendo su crecimiento independiente del anclaje y la formacion de tumores cuando se inyectaba por via subcutanea a ratones atimicos y la desactivacion del FGFR3b-Y375C en celulas MGH-U3 utilizando siRNA disminuyo el crecimiento celular e inhibio el crecimiento independiente del anclaje (Bernard-Pierrot, 2006, Carcinogenesis, 4:740-747) . Sin embar

go, no se esclarecieron los mecanismos moleculares asociados a (responsables de) estas propiedades oncogenicas de los receptores FGFR3 mutados.

El cancer de vejiga es el cuarto tipo de cancer en los hombres en terminos de incidencia y el noveno en las mujeres. Por paciente, es el cancer mas costoso para la sociedad. Sin embargo, el numero de tratamientos disponibles de patologias relacionadas con mutaciones del FGFR3 es muy limitado y se necesitan nuevos tratamientos.

Un resumen de AACR de abril de 2005 de los inventores describe un resultado in vitro que relaciona una linea de celulas de laboratorio NIH-3T3 transfectadas por un FGFR3-S249C mutado. El FGFR3-S249C activa ERK1/2 y la quinasa P13 y activa especificamente la via de la MAP quinasa p38. El tratamiento de la linea de celulas transfectadas por LY294002 o SB203580, inhibidores de la quinasa p13 y la MAP quinasa p38, respectivamente, inhibe el fenotipo transformado de las celulas y sus capacidades para formar colonias en agar-agar blando. En consecuencia,

los autores llegaron a la conclusion de que se requieren las vias tanto de la quinasa p13 como de la p38 para conseguir la transformacion celular inducida por FGFR3-S249C. El objetivo de los autores fue el descubrimiento de los mecanismos de la oncogenesis. No hay ninguna sugerencia sobre la utilizacion de uno de estos inhibidores para cualquier tratamiento. Ademas, estos datos solo se refieren a resultados in vitro en un modelo de linea celular de laboratorio y el experto en la tecnica sabe que es imposible deducir cualquier posible eficacia terapeutica a partir de 55 tales resultados in vitro. Por ultimo, no existe informacion sobre la isoforma de la p38.

Sumario de la invención.

Los inventores establecieron que p38a es una diana terapeutica para patologias relacionadas con mutaciones del FGFR3, mas generalmente para carcinoma o tumor de vejiga, por las siguientes razones:

- la isoforma p38a es la unica isoforma implicada en la proliferacion inducida por FGFR3 mutado.

-parece que los inhibidores de p38a son especificos del FGFR3 mutado. En efecto, no bloquean la proliferacion inducida por FGFR3 de tipo natural activado en las celulas 3T3.

-usando muestras humanas, se ha demostrado que la mayoria de las muestras de tumores de vejiga expresaron una forma fosforilada de p38a, que es la forma activada de p38a. Todas las muestras de tumores de vejiga que alojan la mutacion del FGFR3 expresaron una forma fosforilada de p38a. Curiosamente, algunas muestras humanas con FGFR3 no mutado expresaron tambien una forma fosforilada de p38 lo que sugiere que, en tumores de vejiga humanos, el papel de p38a no esta limitado a los tumores con mutacion del FGFR3. Por ejemplo, todos los tumores de vejiga humanos que presentan mutacion de RAS tambien presentaron una fuerte fosforilacion de p38a.

-los inhibidores de p38a bloquean la proliferacion y capacidad para formar colonias en agar-agar blando inducidas por FGFR3 mutado en una linea de celulas de tumores de vejiga.

-los inhibidores de p38a bloquean la proliferacion in vivo, en particular reducen el desarrollo de xenoinjertos de tumores de vejiga en raton atimico y tambien la proliferacion de celulas tumorales en un modelo de tumor de piel en raton.

- los inhibidores de p38a son eficaces para diversas mutaciones del FGFR3, en particular, S249C e Y375C.

Por lo tanto, los inhibidores de p38a son un tratamiento atractivo contra patologias relacionadas con las mutaciones del FGFR3, debido a su efecto dirigido a las celulas afectadas. En particular, los inhibidores de p38a son un tratamiento atractivo contra tumores de vejiga, debido a que podria utilizarse un farmaco contra los tumores con FGFR3 mutado para tratar 50% de los tumores de vejiga, mientras que podria utilizarse por tanto un farmaco contra p38a para tratar 75% de los tumores de vejiga, incluyendo los tumores con FGFR3 mutado.

En consecuencia, la presente invencion se refiere al uso de un inhibidor de p38a para preparar un medicamento para el tratamiento de un carcinoma o tumor de vejiga, relacionado opcionalmente con las mutaciones del FGFR3 o de RAS. La descripcion tambien se refiere a un metodo para tratar un sujeto que padece un carcinoma o tumor de vejiga, relacionado opcionalmente con las mutaciones del FGFR3 o de RAS, que comprende administrar una cantidad terapeuticamente eficaz de un inhibidor de p38a.

En una realizacion particular, el inhibidor de p38a se selecciona del grupo que consiste en AMG 548, ARQ 101, ARRY-371797, ARRY-614, AR00182263, AZO6703, RPR200765A, RPR203494, BIRB796, SB242235, SB239063, SB681323, R04402257, R03201195, RWJ67657, RWJ67671, RWJ67568, RWJ67411, RWJ66430, KC706, L167307, SC-80036, SCIO-469, SCIO-323, SO-282, SCI-496, TAK715, VX-702, VX-850, VX-745, SB202190, SB203580, SB220025, SB239063, SC68376, Compuesto 37 (657417 de Amgen) , SX-011 y SKF-86002. En una realizacion preferida, el inhibidor de p38a es especifico de p38a. Por ejemplo, el inhibidor especifico de p38a se puede seleccionar... [Seguir leyendo]

1. Un inhibidor de p38a para uso en el tratamiento de un tumor o carcinoma de vejiga.

2. El uso de un inhibidor de p38a para preparar un medicamento para el tratar un tumor o carcinoma de vejiga.

3. El inhibidor de p38a de acuerdo con la reivindicacion 1 o su uso de acuerdo con la reivindicacion 2, en donde el

inhibidor de p38a se selecciona del grupo que consiste en AMG 548, ARQ 101, ARRY-371797, ARRY-614, AR00182263, AZO6703, RPR200765A, RPR203494, BIRB796, SB242235, SB239063, SB681323, R04402257, R03201195, RWJ67657, RWJ67671, RWJ67568, RWJ67411, RWJ66430, KC706, L-167307, SC-80036, SCIO-469, SCIO-323, SO-282, SCI-496, TAK715, VX-702, VX-850, VX-745, SB202190, SB203580, SB220025, SB239063, SC68376, el compuesto 37 (657417 de Amgen) , SX-011 y SKF-86002.

4. El inhibidor de p38a o su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde el inhibidor de p38a es especifico de p38a.

5. El inhibidor de p38a o su uso de acuerdo con la reivindicacion 4, en donde el inhibidor de p38a especifico se selecciona del grupo que consiste en AMG 548, ARRY-371797, ARRY-614, AR00182263, el compuesto 37 (657417 de Amgen) , SX-011, BIRB796, VX-745, SCIO-469 y SO-282.

6. El inhibidor de p38a de acuerdo con la reivindicacion 1 o su uso de acuerdo con la reivindicacion 2, en donde el inhibidor de p38a es un siRNA dirigido contra p38a.

7. El inhibidor de p38a de acuerdo con la reivindicacion 1 o su uso de acuerdo con la reivindicacion 2, en donde el inhibidor de p38a se selecciona del grupo que consiste en un molecula antisentido, un anticuerpo y una ribozima.

8. El inhibidor de p38a o su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde se detecta una 20 p38a fosforilada en una muestra del sujeto que se ha de tratar.

9. El inhibidor de p38a o su uso de acuerdo con la reivindicacion 8, en donde el carcinoma de vejiga esta relacionado con mutaciones de FGFR3 o de RAS.

10. El inhibidor de p38a o su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en donde el sujeto que se ha de tratar tiene un FGFR3 mutado, preferiblemente en el tejido afectado por la patologia.

11. El inhibidor de p38a o su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en donde la mutacion del FGFR3 se selecciona del grupo que consiste en R248C, S249C, G372C, S373C, Y375C, K652E, K652M, J809G, J809C, J809R, J809L, P250R, G377C, G382R, A393E y N542K, preferiblemente R248C, S249C, G372C, K652E e Y375C, mas preferiblemente S249C o Y375C.

12. El inhibidor de p38a o su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-11, en donde el inhibidor 30 de p38a se administra por via oral, topica o parenteral.