Derivado de isoxazolina y nuevo procedimiento para su preparación.

Compuesto de fórmula (1):

donde

R1 es alquilo o un grupo aromático,

un grupo heteroaromático, y sus derivados parcialmente reducidos, y R2 es alquilo.

Derivado de isoxazolina y nuevo procedimiento para su preparación.

CAMPO TÉCNICO

La presente invención se refiere a un derivado de isoxazolina que tiene una fracción hemicetal de ácido carboxílico cíclico para su uso como inhibidor de caspasas, a un procedimiento para preparar dicho derivado, a una composición farmacéutica que lo contiene y a la utilización del mismo.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

El concepto “inhibidor de caspasas” se refiere a un compuesto que puede inhibir la actividad caspasa, regulando así la inflamación o la apoptosis causada por la función de las caspasas. Entre los inhibidores caspasa, se conocen inhibidores irreversibles que muestran una actividad de inhibición más eficaz, ya que inactivan de forma irreversible una enzima de control de la apoptosis (Wu J. y col., Methods: A Companion to Methods in Enzymology 1999, 17, 320) . Los siguientes compuestos son conocidos como inhibidores irreversibles y tienen en común una parte ácido 3-amino-5-fluor4-oxopentanoico.

Las enfermedades que pueden ser tratadas o aliviadas mediante la administración de los compuestos arriba mostrados incluyen: artritis reumatoide, enfermedad intestinal inflamatoria, enfermedad injerto contra huésped, septicemia, osteoartritis, osteoporosis, leucemia mielógena aguda y crónica, meningitis, salpingitis, shock séptico, colangitis, colitis, encefalitis, endocarditis, glomerulonefritis, hepatitis, miocarditis, pancreatitis, diabetes mellitus de tipo I, esclerosis múltiple, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, cirrosis hepática, etc.

Referencias:

Demencia: Arch Neurol, marzo de 2003; 60 (3) : 369-76, Caspase gene expression in the brain as a function of the clinical progression of Alzheimer disease. Pompl PN, Yemul S, Xiang Z, Ho L, Haroutunian V, Purohit D, Mohs R, Pasinetti GM.;

Accidente cerebrovascular: Proc Natl Acad Sci USA, 12 de noviembre de 2002; 99 (23) : 15188-93, Caspase activation and neuroprotection in caspase-3-deficient mice after in vivo cerebral ischemia and in vitro oxygen glucose deprivation. Le DA, Wu Y, Huang Z, Matsushita K, Plesnila N, Augustinack JC, Hyman BT, Yuan J, Kuida K, Flavell RA, Moskowitz MA.;

Discapacidad cerebral debida al SIDA: J Neurosci, 15 de mayo de 2002; 22 (10) : 4015-24, Caspase cascades in human immunodeficiency virus-associated neurodegeneration. Garden GA, Budd SL, Tsai E, Hanson L, Kaul M, D’Emilia DM, Friedlander RM, Yuan J, Masliah E, Lipton SA.;

Diabetes: Diabetes, junio de 2002; 51 (6) : 1938-48, Hyperglycemia-induced apoptosis in mouse myocardium: mitochondrial cytochrome C-mediated caspase-3 activation pathway. Cai L, Li W, Wang G, Guo L, Jiang Y, Kang YJ.;

Úlcera gástrica: J Physiol Pharmacol, diciembre de 1998; 49 (4) : 489-500, Role of basic fibroblast growth factor in the suppression of apoptotic caspase-3 during chronic gastric ulcer healing. Slomiany BL, Piotrowski J, Slomiany A.;

Lesión cerebral por hepatitis: J Viral Hepat, marzo de 2003; 10 (2) : 81-6, Cerebral dysfunction in chronic hepatitis C infection. Forton DM, Taylor-Robinson SD, Thomas HC.;

Fallo hepático fulminante: Gastroenterology, agosto de 2000; 119 (2) : 446-60, Tumor necrosis factor alpha in the pathogenesis of human and murine fulminant hepatic failure. Streetz K, Leifeld L, Grundmann D, Ramakers J, Eckert K, Spengler U, Brenner D, Manns M, Trautwein C.;

Septicemia: Nat Immunol, diciembre de 2000; 1 (6) : 496-501, Caspase inhibitors improve survival in sepsis: a critical role of the lymphocyte. Hotchkiss RS, Chang KC, Swanson PE, Tinsley KW, Hui JJ, Klender P, Xanthoudakis S, Roy S, Black C, Grimm E, Aspiotis R, Han Y, Nicholson DW, Karl IE.;

Rechazo de trasplantes de órganos: Xenotransplantation, mayo de 2001; 8 (2) : 115-24, In vitro prevention of cellmediated xeno-graft rejection via the Fas/FasL-pathway in CrmA-transducted porcine kidney cells. Fujino M, Li XK, Suda T, Hashimoto M, Okabe K, Yaginuma H, Mikoshiba K, Guo L, Okuyama T, Enosawa S, Amemiya H, Amano T, Suzuki S.;

Artritis reumatoide: Prog Med Chem 2002; 39: 1-72, Caspase inhibitors as antiinflammator y and antiapoptotic agents. Graczyk PP.;

Enfermedades cardíacas isquémicas: Am J Physiol Heart Circ Physiol, septiembre de 2002; 283 (3) : H990-5, Hypoxiainduced cleavage of caspase-3 and DFF45/ICAD in human failed cardiomyocytes. Todor A, Sharov VG, Tanhehco EJ, Silverman N, Bernabei A, Sabbah HN.;

Antiinflamatorios: J Immunol, 15 de marzo de 2003; 170 (6) : 3386-91, A broad-spectrum caspase inhibitor attenuates allergic airway inflammation in murine asthma model. Iwata A, Nishio K, Winn RK, Chi EY, Henderson WR Jr, Harlan JM.;

Cirrosis hepática: i) J Pharmacol Exp Ther., marzo de 2004; 308 (3) : 1191-6, The caspase inhibitor Idn-6556 attenuates hepatic injur y and fibrosis in the bile duct ligated mouse. Canbay A., Fledstein A., Baskin-Bey E., Bronk FS. Gores GJ.; ii) Hepatology, febrero de 2004; 39 (2) : 273-8, Apoptosis: the nexus of liver injur y and fibrosis. Canbay A, Friedman S, Gores GJ.; iii) Hepatology, noviembre de 2003; 38 (5) : 1188-98, Kupffer cell engulíment of apoptotic bodies stimulates death ligand and cytokine expression. Canbay A, Feldstein AE, Higuchi H, Werneburg N, Grambihier A, Bronk SF, Gores GJ.]

Por otro lado, en la técnica es conocido un proceso para la preparación de la fracción ácido 3-amino-5-fluor-4ºxopentanoico inhibidor de caspasa tal como el correspondiente al siguiente Esquema de Reacción 1 (Revesz y col., Tetrahedron Lett. 1994, 35, 9693) :

Esquema de Reacción 1

El documento WO 01/21599 da a conocer compuestos de isoxazolina inhibidores de caspasas.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

Los presentes inventores han continuado estudiando un compuesto que puede ser utilizado como un eficaz inhibidor de caspasas y un procedimiento para su preparación.

Como resultado, han descubierto que el derivado de isoxazolina con una fracción hemicetal de ácido carboxílico cíclico de acuerdo con la presente invención presenta una buena actividad como inhibidor de caspasas y se puede preparar con una alta pureza empleando una transformación dinámica inducida por cristalización, para completar la presente invención.

Por consiguiente, un objeto de la presente invención es proporcionar un compuesto de la fórmula (1) mostrada más abajo con la estructura isoxazolina y fracciones hemicetal de ácido carboxílico cíclico, y un nuevo procedimiento para la preparación eficaz de dicho compuesto.

Otro objeto de la presente invención es proporcionar un derivado amina de la fórmula (4) mostrada más abajo, un producto intermedio para el compuesto de la fórmula (1) mostrada más abajo y un procedimiento para su preparación.

Otro objeto de la presente invención es proporcionar una composición farmacéutica para tratar la inflamación o para prevenir la apoptosis que comprende el compuesto de la fórmula (1) mostrada más abajo, así como excipientes farmacéuticamente aceptables.

Otro objeto de la presente invención es proporcionar un uso del compuesto de la fórmula (1) mostrada más abajo para la preparación de un medicamento para tratar la inflamación o prevenir la apoptosis.

Otro objeto de la presente invención es proporcionar una forma cristalina del compuesto de la fórmula (1) mostrada más abajo, de alta estabilidad.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS

Fig. 1: espectro de difracción de rayos X de la forma cristalina del compuesto de fórmula (1) (R1 = isoquinolinilo, R2 = isopropilo) de acuerdo con la presente invención.

Fig. 2: gráfico que muestra los resultados de la prueba de estabilidad de la forma cristalina y la forma amoría de 5 compuesto de fórmula (1) (R1 = isoquinolinilo, R2 = isopropilo) de acuerdo con la presente invención.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN

Términos importantes utilizados en la presente invención se definen tal como se indica a continuación.

En las fórmulas y esquemas de reacción utilizados en la presente invención, alquilo se refiere a un grupo alquilo lineal o ramificado de 1 a 8 átomos de carbono o a un grupo cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono.

Un grupo aromático se refiere a hidrocarburos insaturados de 5 a 15 miembros en forma cíclica simple o fusionada, refiriéndose los grupos heteroaromáticos a grupos aromáticos que tienen de 1 a 5 heteroátomos seleccionados de entre el grupo consistente en oxígeno, azufre y nitrógeno.

Además, uno o más hidrógenos de los alquilo y arilo pueden sustituirse por otros sustituyentes. Por ejemplo, los sustituyentes se pueden seleccionar entre acilo, amino, carboalcoxi, carboxi, carboxiamino, ciano, halo, hidroxi, nitro,

1. Compuesto de fórmula (1) :

donde

R1 es alquilo o un grupo aromático, un grupo heteroaromático, y sus derivados parcialmente reducidos, y R2 es alquilo.

2. Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque R1 es isoquinolinilo, quinolinilo o naftilo, y R2 es metilo, etilo, propilo o butilo.

3. Compuesto según la reivindicación 2, caracterizado porque R1 es isoquinolinilo y R2 es isopropilo.

4. Compuesto según la reivindicación 3, con la siguiente estructura:

5. Proceso para preparar un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende:

(a) activar el compuesto de fórmula (2) y someterlo después a reacción con un compuesto de fórmula (4) para 15 producir un compuesto de fórmula (13) ;

(b) hidrolizar el compuesto de fórmula (13) para producir un compuesto de fórmula (14) ;

(c) desproteger el compuesto de fórmula (14) ; y

(d) llevar a cabo la transformación dinámica inducida por cristalización;

donde R1 es alquilo o un grupo aromático, un grupo heteroaromático, y sus derivados parcialmente reducidos, R2 es alquilo,

R3 y R’3 son en cada caso alquilo, o R3 y R’3, junto con el átomo de oxígeno al que están unidos, forman un heterociclo, y

R4 es alquilo.

6. Proceso según la reivindicación 5, donde R1 es isoquinolinilo, quinolinilo o naftilo, R2 es metilo, etilo, propilo o butilo, R3 y R’3 son en cada caso metilo, etilo o propilo o R3 y R’3, junto con el átomo de oxígeno al que están unidos, forman

dioxolano o dioxano, y R4 es metilo, etilo, propilo o butilo.

7. Proceso según la reivindicación 5 o 6, caracterizado porque el compuesto de fórmula (2) se activa en el paso

(a) mediante un reactivo de activación seleccionado de entre el grupo consistente en cloruro de oxalilo, cloruro de trimetilacetilo, tricloruro de fosforilo y cloruro de tionilo.

8. Proceso según la reivindicación 5 o 6, caracterizado porque la reacción del paso (a) se lleva a cabo en presencia de una base seleccionada de entre el grupo consistente en trietilamina, tri (n-butil) amina, diisopropiletilamina, piridina, 4-dimetilaminopiridina y 4- (4-metilpiperidin-1-il) piridina.

9. Proceso según la reivindicación 5 o 6, caracterizado porque la hidrólisis del paso (b) se lleva a cabo en presencia de una base seleccionada de entre el grupo consistente en hidróxido de litio, hidróxido de sodio, hidróxido de potasio e hidróxido de calcio.

10. Proceso según la reivindicación 5 o 6, caracterizado porque la reacción de desprotección del paso (c) se lleva a cabo en presencia de un ácido seleccionado de entre el grupo consistente en ácido clorhídrico, ácido sulfúrico y ácido trifluoroacético.

11. Proceso según la reivindicación 5 o 6, caracterizado porque la reacción de desprotección del paso (c) se lleva a cabo en ausencia de disolvente o en presencia de un disolvente seleccionado de entre diclorometano o cloroformo.

12. Procedimiento según la reivindicación 5 o 6, caracterizado porque la reacción de transformación dinámica inducida por cristalización del paso (d) se lleva a cabo añadiendo el compuesto de fórmula (1) como simiente.

13. Proceso según la reivindicación 12, caracterizado porque la reacción de transformación dinámica inducida por cristalización del paso (d) se lleva a cabo en presencia de simiente y una cantidad catalítica de una base.

14. Proceso según la reivindicación 13, caracterizado porque la base es una amina seleccionada de entre el grupo consistente en trietilamina, tri (n-butil) amina, diisopropiletilamina, diisopropilamina, piridina, 4-dimetilaminopiridina, 4- (4metilpiperidin-1-il) piridina, 1-feniletilamina ópticamente activa y 1-naftiletilamina ópticamente activa.

15. Proceso según la reivindicación 14, caracterizado porque la amina se utiliza en una cantidad de 0, 001 a 1, 0 equivalentes con respecto al compuesto de fórmula (14) .

16. Proceso para preparar el compuesto según la reivindicación 4, que comprende los pasos descritos en el esquema de reacción 3:

1. precipitado

17. Compuesto de fórmula (4) :

Esquema de Reacción 3

donde

R3 y R’3 son en cada caso alquilo o R3 y R’3, junto con el átomo de oxígeno al que están unidos, forman un heterociclo y

R4 es alquilo.

18. Compuesto según la reivindicación 17, donde R3 y R’3 son en cada caso metilo, etilo o propilo o R3 y R’3, junto con el átomo de oxígeno al que están unidos,

forman dioxolano o dioxano y R4 es metilo, etilo, propilo o butilo.

19. Proceso para preparar un compuesto de fórmula (4) , que comprende:

(a) proteger y desproteger un compuesto de fórmula (9) para producir un compuesto de fórmula (10) ;

(b) llevar a cabo una reacción de acoplamiento carbono-carbono del compuesto de fórmula (10) para producir un 15 compuesto de fórmula (11) ;

(c) someter a reacción el compuesto de fórmula (11) con bencilamina y reducirlo para producir un compuesto de fórmula (12) ; e

(d) hidrogenar el compuesto de fórmula (12) ;

donde5 R3 y R’3 son, en cada caso, alquilo o R3 y R’3, junto con el átomo de oxígeno al que están unidos, forman un heterociclo, y R4 es alquilo.

20. Proceso según la reivindicación 19, donde R3 y R’3 son, en cada caso, metilo, etilo o propilo o R3 y R’3, junto con el átomo de oxígeno al que están unidos,

forman dioxolano o dioxano, y R4 es metilo, etilo, propilo o butilo.

21. Proceso según la reivindicación 19 o 20, caracterizado porque la reacción de protección en el paso (a) se lleva a cabo utilizando trimetilortoformiato o trietilortoformiato.

22. Proceso según la reivindicación 19 o 20, caracterizado porque la reacción de desprotección del paso (a) se lleva a cabo en presencia de una base seleccionada de entre hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, carbonato de sodio y bicarbonato de sodio.

23. Proceso según la reivindicación 19 o 20, caracterizado porque la reacción del paso (b) se lleva a cabo 5 utilizando cloroformiato de etilo o cloroformiato de metilo.

24. Proceso según la reivindicación 23, caracterizado porque la reacción del paso (b) se lleva a cabo en presencia de una base seleccionada de entre n-butil-litio, diisopropilamina-litio o hexametildisilazida de litio.

25. Proceso según la reivindicación 19 o 20, caracterizado porque la reacción de reducción del paso (c) se lleva a cabo utilizando ácido acético y borohidruro de sodio.

26. Proceso según la reivindicación 19 o 20, caracterizado porque la reacción del paso (d) se lleva a cabo en presencia de un catalizador metálico.

27. Proceso según la reivindicación 26, caracterizado porque el catalizador metálico es un catalizador de la familia del paladio o un catalizador de la familia del níquel de Raney.

28. Composición farmacéutica que comprende un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-4 y uno o 15 más excipientes farmacéuticamente aceptables.

29. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-4 o composición según la reivindicación 28 para su uso en terapia.

30. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-4 o composición según la reivindicación 28 para el tratamiento de la inflamación o la prevención de la apoptosis.

31. Composición según la reivindicación 28 o compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-4 para el tratamiento de la demencia, accidentes cerebrovasculares, discapacidad cerebral debida al SIDA, diabetes, úlcera gástrica, lesiones cerebrales por el virus de la hepatitis, enfermedades hepáticas por el virus de la hepatitis, hepatitis aguda, fallo hepático fulminante, cirrosis hepática, septicemia, rechazo de trasplantes de órganos, artritis reumatoide o necrosis celular cardíaca debida a enfermedades cardíacas isquémicas.

32. Compuesto según la reivindicación 4, caracterizado porque el compuesto es una forma cristalina que muestra el siguiente patrón de difracción de rayos X:

D (X) Intensidad relativa (I/I0) Ángulo 2

9, 665 0, 555 9, 15

7, 284 0, 397 12, 15

5, 825 0, 260 15, 21

5, 563 0, 228 15, 93

5, 372 0, 302 16, 50

4, 840 1, 000 18, 33

4, 695 0, 477 18, 90

4, 341 0, 454 20, 46

3, 663 0, 230 24, 30

3, 414 0, 219 26, 10

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