Anticuerpos contra el receptor del factor l de crecimiento similar a la insulina y usos de los mismos.

Anticuerpo ligante de receptor del factor I de crecimiento similar a la insulina (IGF-IR),

caracterizado dicho anticuerpo porque es producido por medios recombinantes en una célula CHO que es la línea celular depositada DSM ACC2795.

Anticuerpos contra el receptor del factor I de crecimiento similar a la insulina y usos de los mismos.

La presente invención se refiere a anticuerpos contra el receptor del factor I de crecimiento similar a la insulina (IGF-IR) , a métodos para su producción, a composiciones farmacéuticas que contienen dichos anticuerpos y a usos de las mismas.

El receptor del factor I de crecimiento similar a la insulina (IGF-IR, EC 2.7.112, antígeno CD221) pertenece a la familia de las proteína tirosina quinasas transmembranales (LeRoith D. et al., Endocrin. Rev. 16:143-163, 1995, y Adams T.E. et al., Cell. Mol. Life Sci. 57 (2000) 1050-1093) . IGF-IR se une a IGF-I con una afinidad elevada e inicia la respuesta fisiológica a este ligando in vivo. IGF-IR también se une a IGF-II, aunque con una afinidad ligeramente inferior. La sobreexpresión de IGF-IR induce la transformación neoplásica de las células y existe evidencia de que IGF-IR participa en la transformación maligna de las células y que por lo tanto es una diana útil para el desarrollo de agentes terapéuticos para el tratamiento del cáncer (Adams T.E. et al., Cell. Mol. Life Sci. 57:1050-1093, 2000) .

Los anticuerpos contra IGF-IR son bien conocidos del estado de la técnica y han sido investigados pos sus efectos antitumorales in vitro e in vivo (Benini S. et al., Clin. Cancer Res. 7:1790-1797, 2001; Scotlandi K. et al., Cancer Gene Ther. 9:296-307, 2002; Scotlandi K. et al., Int. J. Cancer 101:11-16, 2002; Brunetti A. et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 165:212-218, 1989; Prigent S.A. et al., J. Biol. Chem. 265:9970-9977, 1990; Li S.L. et al., Cancer Immunol. Immunother. 49:243-252, 2000; Pessino A. et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 162:1236-1243, 1989; Surinya K.H. et al., J. Biol. Chem. 277:16718-16725, 2002; Soos M.A. et al., J. Biol. Chem., 267:12955-12963, 1992; Soos M.A. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:5217-5221, 1989; O’Brien R.M. et al., EMBO J. 6:4003-4010, 1987; Taylor R. et al., Biochem. J. 242:123-129, 1987; Soos M.A. et al., Biochem. J. 235:199-208, 1986; Li S.L. et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 196:92-98, 1993; Delafontaine P. et al., J. Mol. Cell. Cardiol. 26:1659-1673, 1994; Kull F.C. Jr. et al. J. Biol. Chem. 258:6561-6566, 1983; Morgan D.O. y Roth R.A., Biochemistr y 25:1364-1371, 1986; Forsayeth J.R. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:3448-3451, 1987; Schaefer E.M. et al., J. Biol. Chem. 265:1324813253, 1990; Gustafson T.A. y Rutter W.J., J. Biol. Chem. 265:18663-18667, 1990; Hoyne P.A. et al., FEBS Lett. 469:57-60, 2000; Tulloch P.A. et al., J. Struct. Biol. 125:11-18, 1999; Rohlik Q.T. et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 149:276-281, 1987; y Kalebic T. et al., Cancer Res. 54:5531-5534, 1994; Adams T. E. et al., Cell. Mol. Life Sci. 57:1050-1093, 2000; Dricu A. et al., Glycobiology 9:571-579, 1999; Kanter-Lewensohn L. et al., Melanoma Res. 8:389-397, 1998; Li S.L. et al., Cancer Immunol. Immunother. 49:243-252, 2000) . Los anticuerpos contra IGF-IR también se han descrito en un gran número de otras publicaciones, por ejemplo en Arteaga C.L. et al., Breast Cancer Res. Treatment 22:101-106, 1992; y Hailey J. et al., Mol. Cancer Ther. 1:1349-1353, 2002.

En particular, el anticuerpo monoclonal contra IGF-IR denominado αIR3 se utiliza ampliamente en la investigación de los procesos mediados por IGF-IR y de enfermedades mediadas por IGF-I, tales como el cáncer. El anticuerpo α-IR3 fue descrito por Kull F.C., J. Biol. Chem. 258:6561-6566, 1983. Desde entonces se han publicado aproximadamente cien publicaciones referentes a la investigación y el uso terapéutico de αIR3 con respecto a su efecto antitumoral, solo y conjuntamente con agentes citostáticos tales como la doxorrubicina y la vincristina. El anticuerpo αIR3 es un anticuerpo monoclonal murino que es conocido que inhibe la unión de IGF-I al receptor de IGF pero no la unión de IGF-II a IGF-IR. El anticuerpo αIR3 estimula a altas concentraciones la proliferación de las células tumorales y la fosforilación de IGF-IR (Bergmann U. et al., Cancer Res. 55:2007-2011, 1995; Kato H. et al., J. Biol. Chem. 268:2655-2661, 1993) . Existen otros anticuerpos (por ejemplo 1H7, Li S.L. et al., Cancer Immunol. Immunother. 49:243-252, 2000) que inhiben la unión de IGF-II a IGF-IR más potentemente que la unión de IGF-I. Se proporciona un resumen del estado de la técnica de los anticuerpos y sus propiedades y características en Adams T.E. et al., Cell. Mol. Life Sci. 57:1050-1093, 2000.

La mayoría de los anticuerpos descritos en el estado de la técnica se originan en el ratón. Dichos anticuerpos no resultan útiles, tal como es bien conocido del estado de la técnica, para la terapia de pacientes humanos sin alteraciones adicionales como la quimerización o la humanización. Basándose en estas desventajas, los anticuerpos humanos resultan claramente preferentes como agentes terapéuticos en el tratamiento de los pacientes humanos. Los anticuerpos humanos son bien conocidos del estado de la técnica (van Dijk, M.A. y van de Winkel, J.G., Curr. Opin. Chem. Biol. 5:368-374, 2001) . Basándose en dicha tecnología, pueden producirse anticuerpos humanos contra una gran diversidad de dianas. Se describen ejemplos de anticuerpos humanos contra IGF-IR en los documentos nº WO 02/053596, nº WO2004071529, nº WO2005016967, nº WO2006008639, nº US20050249730, nº US20050084906, nº WO2005058967, nº WO2006013472, nº US20030165502, nº WO2005082415, nº WO2005016970, nº WO03106621, nº WO04083248, nº WO2003100008, nº WO2004087756, nº WO2005005635 y nº WO2005094376.

Sin embargo, todavía existe una necesidad de anticuerpos contra IGF-IR con beneficios convincentes para los pacientes que necesitan terapia antitumoral. El beneficio relevante para el paciente es, en términos simples, la reducción del crecimiento tumoral y una prolongación significativa del tiempo hasta la progresión causada por el tratamiento con el agente antitumorigénico.

Routier F.H. et al., Glyconjugate J. 14:201-207, 1997, informan del patrón de glucosilación de un anticuerpo IgG1 humanizado expresado en las células CHO-DUKX. Este anticuerpo muestra una proporción molar Fuc: Man de 0, 8: 3, 0, lo que equivale a una proporción de fucosilación del 80%. Niwa R. et al., J. Immunol. Methods 306:151-160, 2005, informan de que los anticuerpos IgG1 e IgG3 anti-CD20 producen recombinantemente en CHO DG44 una fucosilación del 90% y 91%, respectivamente. Mimura Y. et al., J. Immunol. Methods 247:205-216, 2001, informan de que el butirato incrementa la producción de IgG quimérica humana en células CHO-K1, manteniendo la función y el perfil de glicoformas. Los perfiles de oligosacáridos muestran un contenido considerable de estructuras de glicano afucosiladas. Raju T.S., BioProcess International 1:44-53, 2003, informan del impacto de la variación de la glucosilación por parte de los sistemas de expresión sobre la actividad biológica de las inmunoglobulinas terapéuticas y la nomenclatura. Ma S. et al., Anal. Chem. 71:5185-5192, 1999, informan del análisis de carbohidratos del rituximab. El rituximab muestra una fucosilación de 9-10% (Niwa R. et al., J. Immunol. Methods 306:151-160, 2005) . Fujii S., J. Biol. Chem. 265:6009-6018, 1990, informan de que la IgG bovina incluye aproximadamente 11% de IgG afucosilada. Mizuochi T., J. Immunol. 129:2016-2020, 1982, informan de que la IgG humana se encuentra afucosilada aproximadamente al 14%. Bergwerff A.A., Glycoconjugate J. 12:318-330, 1995, informan de que los anticuerpos producidos en ratones SP2/0 contienen oligosacáridos ácido N-glicolilneuramínico (NGNA) en grandes cantidades. Nahrgang S. et al., en: Animal Cell Technology: Products from Cells, Cells as Products, Bernard A. et al. (editores) , Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, NL, 1999, páginas 259 a 261, informan de que para la expresión en CHO de IgG1 tras la transfección transitoria, se observa una glucosilación global reducida. Lund J. et al., Mol. Immunol. 30:741-748, 1993, informan de la producción recombinante de un anticuerpo quimérico de ratón-humano en células de transfectoma de ratón. El anticuerpo IgG1 se encuentra afucosilado en una cantidad de 13%. Patel

T.P. et al., Biochem. J. 285:839-845, 1992, informan de la glucosilación de anticuerpos procedentes de células de hibridoma y de ascites de ratón. Niwa R. et al., J. Immunol. Methods 306:151-160, 2005, informan de una fucosilación para el anticuerpo IgG1 anti-CD20 de 91% tras la producción recombinante en CHO DG44, y Mori K. et al., Biotech. Bioeng. 88:901-908, 2004, de una fucosilación del 94%. Davies J. et al., Biotechnol. Bioeng. 74:288-294, 2001, informan de que la expresión de anticuerpos con glicoformas alteradas conduce a un incremento de la ADCC. Sheeley D.M. et al., Anal. Biochem. 247:102-110, 1997,... [Seguir leyendo]

1. Anticuerpo ligante de receptor del factor I de crecimiento similar a la insulina (IGF-IR) , caracterizado dicho anticuerpo porque es producido por medios recombinantes en una célula CHO que es la línea celular depositada DSM ACC2795.

2. Célula CHO capaz de expresar recombinantemente un anticuerpo según la reivindicación 1, caracterizada porque es la línea celular depositada DSM ACC2795.